梁菲菲
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 供职机构：福建医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省高等学校新世纪优秀人才支持计划福建省卫生厅医学创新课题更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙型肝炎病毒剪接特异蛋白相结合的肝细胞蛋白
- HBV基因组剪接变异体 (spliced variants of hepatitis B virus genomes)是一大类由HBV前基因组RNA (pregenomic RNA, pgRNA) 经剪接并逆转录产生的亚...
- 梁菲菲
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA剪接转化生长因子Β
- 文献传递
- CytoTrap细胞质酵母双杂交筛选与2447nt-489nt乙型肝炎病毒剪接特异蛋白相结合的肝细胞蛋白
- HBV基因组剪接变异体(spliced variants of hepatitis B virus genomes)是一大类由HBV前基因组RNA (pregenomic RNA, pgRNA)经剪接并逆转录产生的亚基因...
- 梁菲菲
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA剪接
- 乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白HBSP与TGFβ1诱导蛋白1相互作用促进TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化被引量：5
- 2017年
- 目的探讨乙型肝炎病毒剪接特异性蛋白(Hepatitis B spliced protein,HBSP)与转化生长因子1诱导蛋白1(transforming growth factor-β1-induced transcript 1,TGFβ1I1)相互作用对TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)的影响。方法构建HBSP慢病毒表达载体,利用293T细胞包装慢病毒颗粒,感染Huh7肝癌细胞株。以5ng/mLTGFβ1分别诱导稳定表达HBSP的慢病毒细胞株及其对照细胞株,观察细胞形态的变化,并提取细胞蛋白,Westernblot检测上皮间质转化标志物E-钙黏素(E-cadherin,E-cad)、紧密连接蛋白(Claudin-1)、β-链蛋白(β-catenin)、N-钙黏素(N-cadherin,N-cad)的变化。进而以TGFβ1I1特异性siRNA转染上述细胞,Westernblot观察以上指标变化情况。最后以侵袭小室实验和划痕实验分别检测TGFβ1诱导的细胞侵袭与迁移能力的变化。结果筛选获得稳定表达HBSP的慢病毒细胞株Huh7-HBSP-flag-HIV及其对照细胞株Huh7-flag-HIV。以TGFβ1诱导后在显微镜下观察到细胞形态由紧密的上皮形态变为松散的间质形态;特异性抗体检测表明上皮标志物E-cad、Claudin-1、β-catenin表达量下降,而间质标志物N-cad表达上升。侵袭小室实验和划痕实验表明TGFβ1诱导的HBSP表达株侵袭及迁移能力增强。而转染TGFβ1I1特异性siRNA可逆转以上现象。结论 HBSP与TGFβ1I1相互作用可促进TGFβ1诱导的肝癌细胞上皮间质转化并增强其侵袭迁移能力,提示HBSP在HBV相关性肝细胞肝癌发生发展中具有重要的致病意义。
- 陈婉南黄俊高梁菲菲闫小利轩丹丹林旭
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA剪接上皮间质转化
- 乙型肝炎病毒DNA聚合酶TP257抗α-干扰素机制初步探讨
- 2011年
- 目的筛选与乙型肝炎病毒DNA聚合酶N端257个氨基酸(TP257)相结合的抗α-干扰素(IFN-α)相关性肝细胞蛋白,初步探讨TP257抗IFN-α作用机制。方法构建TP257腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-TP257,并与腺病毒骨架载体pADEasy-1重组,以293A细胞包装重组腺病毒。用重组腺病毒感染Huh7细胞并以IFN-α诱导,收获细胞蛋白,Western blot验证TP257蛋白在细胞中的表达。细胞蛋白进行免疫沉淀,SDS-PAGE分离后通过质谱鉴定差异蛋白。结果构建的重组腺病毒AD-TP257能有效感染Huh7细胞并大量表达TP257蛋白。Huh7细胞感染AD-TP257后以IFN-α处理,并通过免疫沉淀筛选到4种差异蛋白,其中3种经肽质量指纹图谱鉴定分别为热休克蛋白60、组蛋白HIST1H2BC和肌凝蛋白调节轻链12A。结论 TP257抗IFN-α效应可能与它和特定肝细胞蛋白结合并相互作用有关。
- 梁菲菲黄连真陈婉南林旭
- 关键词：乙型肝炎病毒DNA聚合酶Α-干扰素免疫沉淀
