梁光萍 作品数:74 被引量:248 H指数:11 供职机构: 第三军医大学西南医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 重庆市自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
血管内皮细胞EA.hy926对短期低氧的反应性研究 被引量:3 2007年 目的观察短期低氧应激对血管内皮细胞的影响。方法制作血管内皮细胞低氧应激模型,采用低细胞毒性的染料Almnar Blue染色法测定常氧和低氧培养条件下的细胞活力,采用流式细胞技术检测细胞周期,采用膜联蛋白V-荧光素/碘化丙锭(Annexin V-fluorescein/PI)双标记法检测细胞凋亡,应用蛋白免疫印迹方法(Westem blot),检测细胞内缺氧诱导因子和增殖细胞核抗原的表达。结果短期低氧(1~3 h)应激可以增强血管内皮细胞活力,细胞周期显示细胞4倍体峰比例增高,随着低氧时间的延长(6~12 h),细胞4倍体峰回落至常氧水平。短暂低氧(3 h),细胞凋亡比例明显增高。蛋白免疫印迹检测显示,缺氧诱导因子-1α和增殖细胞核抗原在低氧后表达增高,与低氧反应呈时间效应依赖关系。结论短期低氧启动了以增殖和活力增高为特征的血管内皮细胞适应性反应,同时也诱导了以细胞凋亡为特征的细胞损伤性反应。 苏踊跃 梁光萍 刘友生 陈建 杨宗城 罗向东关键词:低氧 内皮细胞 增殖 脱噬作用 TRAIL受体及其信号转导通路研究进展 被引量:7 2001年 TRAIL是新近发现的TNF超家族成员 ,它有五种特异性结合受体 ,即TRAIL R1、R2、R3、R4和OPG。TRAIL R1和R2是转导TRAIL凋亡信号的受体 ,TRAIL R3、R4和OPG则形成三聚体 ,与TRAIL结合后阻止死亡信号向下转导。本文介绍了TRAIL的结构、生理功能及其受体介导信号转导通路的最新研究进展。 梁光萍 杨仕明 罗向东关键词:TRAIL 信号转导 TRAIL受体 细胞凋亡 线粒体翻译延伸因子Tu对烧伤大鼠心肌氧化损伤的影响 被引量:2 2013年 严重烧伤后,心脏自身的。肾素一血管紧张素系统迅即激活并引起心肌局部血流量下降,这一变化导致烧伤早期缺血缺氧性心肌损伤。前期研究显示,心肌局部血流量于烧伤后10min开始下降,并在伤后1、3h显著减少。烧伤后1h起心肌力学参数即显著下降,提示心肌损害。由于心脏是循环动力器官,心肌损伤促进了严重烧伤后其他器官的缺血缺氧损伤。线粒体是心肌组织中的重要细胞器,执行细胞包括能量生成、代谢调控、离子稳定、活性氧簇(ROS)产生等在内的核心功能。正常情况下,线粒体内0.2%~2.0%的氧在代谢过程中会转变为过氧化物, 张东霞 颜洪 胡炯宇 张家平 滕苗 童大力 向飞 张琼 房亚东 梁光萍 黄跃生关键词:烧伤 心肌 人血管内皮细胞缺氧早期基因系列表达分析文库的建立及分析 2009年 目的:建立常氧及缺氧早期人血管内皮细胞基因系列表达分析文库,对表达谱数据进行初步分析,为创伤后多器官功能障碍的防治奠定基础。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞株(EA.hy926),分为正常对照组和缺氧3h处理组。采用长标签基因系列表达分析方法(LongSAGE)建立常氧及缺氧3h组人血管内皮细胞基因表达文库,通过与Genebank数据库比对确认基因,对所得标签进行初步分析。结果:通过LongSAGE技术构建了常氧和缺氧脐静脉内皮细胞LongSAGE文库。缺氧SAGE文库测得30756个标签,其中识别出的基因总数为13879,比例为45.13%;重复的双标签体总数为762。常氧SAGE文库测得标签数为31213,其中识别出的基因总数为13665,比例为43.78%;重复的双标签体总数为758。结论:成功建立了人脐静脉内皮细胞常氧和缺氧早期LongSAGE文库,获得涵盖上万个转录本信息的表达谱数据,为创伤后多器官功能障碍的防治奠定基础. 梁光萍 苏踊跃 陈建 罗向东 陈渝关键词:血管内皮细胞 缺氧 基因表达谱 缺氧对人脐静脉内皮细胞株增殖与活力的影响 目的观察缺氧对人脐静脉内皮细胞增殖与活力的影响。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞株 EA.hy926分为常氧组和缺氧组。常氧组常规培养,缺氧组细胞充入混合气体(含体积分数94%N、5%CO、1%O)后置于37℃孵育1、3... 梁光萍 苏踊跃 陈建 罗向东 杨宗城文献传递 中国烧伤康复治疗现状 被引量:15 2013年 我国烧伤创面的治疗有着悠久的历史,但直到1958年才成立第1个专门的烧伤治疗单位。在过去50多年里,我国烧伤治疗水平取得很大进展,尤其表现在重度烧伤患者的存活率上,在一些烧伤中心可达98.9%。 陈建 李曾 慧平 颜洪 梁光萍 谭江琳 杨思思 吴军关键词:烧伤创面 康复治疗 烧伤患者 治疗单 存活率 β_1整合素启动子荧光素酶报告基因载体的构建与鉴定 被引量:2 2006年 目的克隆β1整合素(CD29)启动子区基因全长序列,构建并鉴定β1整合素启动子全长序列荧光素酶报告基因载体pGL3-β1。方法以含β1整合素启动子基因全长序列的基因片段(2 735 bp)的重组pGEM-T easy载体为模板,用含有酶切位点的特异性引物扩增出整合素β1启动子基因全长序列1 756 bp,克隆至荧光素酶表达载体pGL3-basic,构建含正确目的基因的表达载体pGL3-β1,并NheⅠ、XhoⅠ酶切、PCR及测序鉴定;并以该质粒转染人表皮细胞株HaCaT进行活性检测。结果酶切、PCR及序列测定表明,克隆获得的1 756 bp与GenBank DNA序列数据库对比分析序列一致,插入方向正确;且pGL3-β1启动子在人表皮细胞株HaCaT中有明显转录活性。结论成功构建了β1整合素启动子基因全长序列荧光素酶报告基因载体,为下一步研究人β1整合素启动子的活性分析、基因表达调控机制及其信号转导通路等研究奠定基础。 陈卫 苏踊跃 梁光萍 陈建 张曼辉 罗向东关键词:启动区 整合素β1基因剔降血管内皮细胞株的建立及其增殖活力研究 被引量:4 2007年 目的构建人整合素(integrin)β1基因的小干扰RNA(siRNA)表达载体(pGenesil-integrin β1),建立integrin β1剔降血管内皮细胞株,观察integrin β1对EA.hy926细胞株增殖的影响。方法合成integrin β1siRNA模板,经退火后插入到pGenesil-1荧光载体。阳性重组质粒经DoTAP转染至EA.hy926细胞中。蛋白印迹观察pGenesil-integrin β1表达载体对目的蛋白integrin β1表达的抑制效率,绘制转染基因前后细胞生长曲线。结果经酶切、测序验证,pGenesil-integrin β1重组质粒构建成功。转染细胞后,可明显抑制integrin β1的表达。整合素β1基因剔降血管内皮细胞株细胞增殖减慢,与EA.hy926细胞株相比,生长曲线右移。结论成功构建了pGenesil-integrin β1重组质粒,建立了integrin β1下调细胞株,下调integrin β1表达对血管内皮细胞增殖产生负调控作用。 梁光萍 苏踊跃 陈建 闫德雄 陈卫 王秀亮 罗向东关键词:整合素Β1 RNA干扰 血管内皮细胞 缺氧对ECV-304细胞CASK表达及细胞内分布的影响 被引量:1 2007年 目的了解缺氧后ECV-304细胞钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium/calmodulin-dependent serine protein kinase,CASK)蛋白表达及细胞内分布的变化。方法将培养的ECV-304细胞置于缺氧(5%O2)条件培养1、3、6、12h,用Western blot方法检测CASK表达的变化,用免疫组化技术观察CASK在细胞内分布情况。结果ECV-304细胞的CASK表达随缺氧时间延长而逐渐增高,3h开始增加,6h达高峰,12h下降但仍高于正常。免疫组织化学染色的结果显示,随着缺氧时间的延长,细胞染色加深、并出现CASK向核膜聚集的现象。结论缺氧可以影响CASK的蛋白表达和细胞内分布,提示CASK可能是一个新的值得关注的缺氧相关蛋白。 陈建 梁光萍 苏踊跃 陈小玲 陈卫 罗向东 杨宗城关键词:缺氧 ECV-304细胞 CASK下调表达对人血管内皮细胞ECV-304增殖能力的影响 2009年 目的建立CASK下调表达细胞株,研究钙/钙调蛋白依赖性丝氨酸蛋白激酶(calcium,calmodulin-associated serine/threonine kinase,CASK)下调表达对ECV-304细胞增殖能力的影响。方法将包含针对CASK基因干扰siRNA片段的pGenesil-1-hCASK重组质粒转染人ECV-304细胞株,经G418加压筛选,成功筛选出CASK下调表达的细胞株。用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中CASK基因的表达水平。采用流式细胞技术、MTT法观察CASK下调表达对ECV-304细胞增殖能力的变化。结果成功筛选出CASK下调表达ECV-304细胞株(siCASK细胞株),这些细胞在传代过程中绿色荧光蛋白能维持表达,细胞株中转染阳性率在90%以上;经蛋白免疫印迹法检测CASK表达明显降低;siCASK细胞株中G0/G1细胞比率下降,G2M期细胞比率明显上升,增殖指数明显提高,生长曲线左移。结论成功建立了CASK下调表达的ECV-304细胞株,CASK下调表达可导致细胞增殖能力增强。 陈建 苏踊跃 梁光萍 陈渝 罗向东 杨宗城关键词:RNA干扰 细胞增殖