杨明明
- 作品数：111 被引量：257H指数：7
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目“十二五”国家科技计划农村领域更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程文化科学更多>>
- 木聚糖酶和纤维素酶多酶嵌合体的构建
- 2019年
- 为探究木聚糖酶和纤维素酶形成的多酶嵌合体降解纤维素的效果,此研究设计了2个含有不同来源锚定域的重组木聚糖酶基因和重组纤维素酶基因,并设计了含有2个不同来源的粘附域和纤维素结合域的脚手架蛋白基因,体外构建了大肠杆菌E.coil BL21(DE3)表达载体,表达纯化了脚手架蛋白、重组木聚糖酶和纤维素酶。同时,体外组装三种元件形成多酶嵌合体,以微晶粉末纤维素为底物检测其降解纤维素的效率。结果显示,纯化所得的脚手架蛋白Scaf、重组木聚糖酶Xyn10B和纤维素酶Cel48F可在体外组装形成多酶嵌合体,该多酶嵌合体酶活(0.107±0.013 U/mL)显著高于游离酶混合物的酶活(0.084±0.001 U/mL)(P<0.05)。试验表明木聚糖酶Xyn10B和纤维素酶Cel48F可与脚手架蛋白Scaf体外组装形成多酶嵌合体,并可实现对纤维素的高效降解。
- 伏晓丽杨明明
- 关键词：重组酶
- FMDV 2A介导的乳腺上皮细胞双基因表达载体构建及表达
- 2011年
- 构建FMDV 2A介导的人白细胞介素2基因(hIL-2)和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因双顺反子乳腺特异性表达载体,并验证其在乳腺上皮细胞中的表达。克隆奶山羊β-酪蛋白启动子序列,将hIL-2基因序列置于启动子之后,然后利用口蹄疫病毒2A(FMDV 2A)自剪切序列连接EGFP基因,构建出乳腺特异性的双顺反子表达载体pFIENβ,并利用脂质体转染山羊乳腺上皮细胞,然后用RT-PCR技术和Western blot检测hIL-2基因与EG-FP基因的表达。重组质粒pFIENβ经酶切鉴定后表明构建成功,转染质粒PFIENβ和pEGFP-C1的细胞均观察到绿色荧光;从转染pFIENβ的乳腺上皮细胞中扩增出hIL-2基因和EGFP基因,而转染pEGFP-C1的细胞中只扩增出EGFP基因;经Western blot检测,转染pFIENβ的细胞中均表达了hIL-2和EGFP蛋白。结果表明山羊β-酪蛋白启动子能同时启动hIL-2基因和EGFP基因在山羊乳腺上皮细胞中的表达,并且利用FMDV 2A元件实现了hIL-2基因和EGFP基因的非融合型表达。
- 陈秋菊王韵斐崔易虹朱广琴杨明明宋宇轩曹斌云
- 关键词：人白细胞介素2EGFP双顺反子
- 一种山羊产羔性状的分子标记选择方法
- 一种山羊产羔性状的分子标记选择方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在<I>Taq</I>DNA聚合酶、缓冲环境、Mg<Sup>2+</Sup>、dNTPs存在的情况下，利用引物P1和P2在PCR条件下分别扩增KITL基因...
- 曹斌云安小鹏侯金星王建刚宋宇轩杨明明朱广琴王韵斐崔易虹陈秋菊
- 文献传递
- 略阳乌鸡肠道乳酸菌S-层蛋白分离及黏附特性探究
- 本试验旨在分离略阳乌鸡肠道高黏附性乳酸菌,研究其S-层蛋白对黏附的影响。采用16S rDNA高通量测序检测略阳乌鸡盲、回肠乳酸菌的分布和丰度,并从其盲、回肠内容物中分离乳酸菌,16S rDNA测序鉴定种属。通过黏附性试验...
- 李伟杨明明杨亚威吕妍
- 关键词：略阳乌鸡乳酸菌益生特性黏附性S-层蛋白
- 文献传递
- 日粮磷水平及磷限制日粮中添加不同浓度植酸酶对肉用仔鸡生长性能影响的研究被引量：2
- 2018年
- 通过对高热稳定性、高耐酸性植酸酶生产价值的验证,研究了不同梯度日粮磷水平及磷限制日粮中添加不同浓度植酸酶对肉用仔鸡生长性能的影响。选择1日龄的AA白羽肉鸡(♂)800只,随机分为8个处理组,每组10个重复,每个重复10只鸡。处理组1为日粮正常组,基础日粮中有效磷的含量为0.45%;处理组2、3和4为日粮有效磷限制组,分别对日粮中有效磷的含量限制为0.35%,0.3%和0.25%。在处理组4的日粮基础上,分别对处理组5、6和7添加250U/kg,500U/kg和1000U/kg三个浓度梯次的植酸酶A,对处理组8添加100U/kg浓度的植酸酶B。试验期18d。结果表明,日粮有效磷限制组(处理组2、3和4)的肉用仔鸡18日体重、平均日采食量和料肉比等指标全都低于日粮正常组(处理组1),差异显著(P<0.05);根据日粮中不同浓度植酸酶的添加,18日龄内,肉用仔鸡的平均体重(R2=0.6241)和料肉比(R2=0.9383)均呈现线性增长,同时,植酸酶B添加组(处理组8)的日采食量和日增重均优于植酸酶A添加组(处理组5、6和7)(P<0.05)。因此,植酸酶可以有效的缓解日粮中有效磷不足对肉用仔鸡生长性能的影响,植酸酶B饲用效果优于植酸酶A。
- 王普阳龚月生杨明明王力白晓婷
- 关键词：植酸酶肉用仔鸡胫骨质量
- 生产转基因山羊的piggyBac转座子载体构建方法及其应用
- 本发明公开了一种能用于生产转基因山羊的piggyBac转座子载体的构建方法，主要步骤包括：①合成一段包含piggyBac转座子发生转座所必需的PB5′端和PB3′端碱基序列，合成时在PB5′端和PB3′端中间预留出多克隆...
- 陈玉林白丁平方堃杨明明何晓琳
- 文献传递
- 不同基因型小麦光合特性及病虫害防控效果研究
- 良种良法配套是小麦获得优质高产的基础,为了探明适合关中地区种植的小麦品种,选用了西北农林科技大学有代表性的小麦材料18份,通过对其旗叶叶绿素含量SPAD值、光合特性、产量构成因素等指标的测定,从而选出适宜此生态条件的高产...
- 杨明明
- 关键词：小麦光合特性
- 麦芽糖诱导耐碱性木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌中的表达被引量：2
- 2011年
- 文章目的是考察麦芽糖诱导木聚糖酶基因在枯草芽孢杆菌WB700中的表达。以麦芽糖为诱导剂,对诱导浓度、诱导时机、诱导温度和麦芽糖的添加方式等主要因素进行了分析比较。当菌体生长至发酵液吸光值OD600达到1.3时加入终浓度为4.5%麦芽糖,37℃,持续诱导10h,木聚糖酶活力达到最高,为56.32U/mL,通过SDS-PAGE检测对比显示:经麦芽糖诱导表达的木聚糖酶比不加麦芽糖诱导的木聚糖酶表达量高,表达效果更明显。结果表明麦芽糖在最佳的诱导条件下,对木聚糖酶的酶活有明显的提高作用。
- 张云雁杨明明段玉兰周煌凯段春燕龚月生
- 关键词：麦芽糖SDS-PAGE
- 小麦TaCP3基因的克隆及其参与非生物胁迫的表达分析被引量：4
- 2019年
- 半胱氨酸蛋白酶(cysteine protease,CP)是植物中重要的蛋白酶家族之一,广泛参与植物的各种生理过程;TaCP3属于papain-like(木瓜蛋白酶)家族的半胱氨酸蛋白酶,在小麦的生长发育及抗逆中起到重要作用。为研究TaCP3基因的结构特征,以及在干旱、高盐、低温和高温胁迫下的表达情况,从小麦抗旱品种西农538中克隆了TaCP3基因,该基因仅含1个1125bp的开放阅读框,编码374个氨基酸,在蛋白氨基端有一个28个氨基酸残基组成的信号肽,羧基端具有木瓜蛋白酶亚家族的保守结构域。生物信息学分析表明,TaCP3与大麦和山羊草半胱氨酸蛋白酶基因相似性最高。同时,本研究构建了pcold-TF/TaCP3原核表达载体,通过转化大肠杆菌BL21(DE3),成功表达了TaCP3重组蛋白,分子量约为40kD。qRT-PCR结果表明,TaCP3的表达对干旱、高盐、低温和高温胁迫均有响应,初始都呈先降后升的趋势;且对干旱胁迫有强烈的正向响应。
- 张炳慧高翔杨明明杨明明王宪国姚晓露李晓燕李晓燕赵万春
- 关键词：小麦基因克隆原核表达非生物胁迫
- 普通小麦TaTFL1基因的克隆及表达特性研究
- 2018年
- TFL1基因是植物花序分生组织特异性基因,其主要功能是维持植物营养生长和花序的无限生长。本研究利用同源克隆技术获得了TaTFL1部分同源基因的cDNA序列和启动子序列,并利用生物信息学技术对其序列组成、结构特征及进化关系进行了初步分析,并对启动子区顺式作用元件进行了预测,进一步通过实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术对该基因在中国春不同组织以及各组织不同发育阶段的表达情况进行分析。结果表明,TaTFL1蛋白为疏水性蛋白,无信号肽,定位于细胞质中;进化分析显示,TaTFL1与单子叶植物的亲缘关系较近;在启动子中存在着大量的光响应元件,以及分生组织表达相关的顺式调控元件(CAT-box)。qRT-PCR结果表明,TaTFL1基因在各组织中皆有表达,且均表现为花前表达量明显高于花后;在叶片中表达量较低,而在花前的穗下茎中表达量最高,在幼芽、颖壳和籽粒中也有微弱的表达;不同发育阶段的幼穗中,TaTFL1在1～2cm的幼穗中表达量最高,随着幼穗的发育呈现出下降的趋势,且与其他组织相比始终维持着较高的表达水平。综上所述,TaTFL1蛋白具有TFL1家族的典型结构,在小麦幼穗发育初期发挥重要作用。
- 何庆梦高翔杨明明杨明明李晓燕董剑
- 关键词：小麦基因克隆
