李炯
- 作品数：55 被引量：59H指数：4
- 供职机构：四川大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金霍英东基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学电子电信更多>>
- IL-4在制备治疗重症肝炎的药物中的用途
- 本发明属于生物医药领域，本发明所要解决的技术问题是提供IL-4的一种新用途。具体来讲，是提供了IL-4在制备重症肝炎的药物组合物中的用途。在用量为0.1μg/kg/d～5μg/kg/d时治疗重症肝炎具有好的效果。为重症肝...
- 李炯魏于全
- 应用细菌双杂交系统技术寻找与人PCIA1基因相互作用的基因被引量：1
- 2007年
- 目的探寻与新近发现的人类交叉免疫反应抗原（homo sapiens cross-immune reaction antigen）基因PCIA1相互作用的基因,为其功能研究提供线索。方法应用Stratagene公司的细菌双杂交系统和人胚肾cDNA文库,构建诱饵质粒pBT-PCIA1,与靶质粒pTRG-cDNA文库大规模地共转化报告菌株,筛选并分离具有相互作用的pTRG-cDNA阳性克隆,经DNA序列分析和生物信息学确定靶基因。结果发现7种靶蛋白基因,其中3种基因功能尚不清楚,其余4种具有重要生理功能,突变或表达异常都会导致严重疾病;α-辅肌动蛋白-4（actinin,alpha4,ACTN4）、鞘脂激活蛋白原（prosaposin,PSAP）或真核翻译起始因子（eukary-otic translation initiation factor 3,subunit 10 theta,EIF3S10）过表达都会促进肿瘤发生和演进。结论细菌双杂交系统技术探测蛋白质之间的相互作用,是一种提供新基因功能研究信息的有效方法;PCIA1基因表达与肿瘤形成、侵袭和转移密切相关。
- 李祖茂文艳君来松涛倪睿邓洪新阚兵李炯刘钧敬小梅程平石薇贾永喜
- 关键词：双杂交系统技术
- 小鼠血清乙型肝炎病毒前S2抗体间接ELISA检测方法的建立被引量：3
- 2013年
- 目的建立小鼠血清乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)前S2抗体间接ELISA检测方法。方法以HBV前S2(1～26)多肽包被酶标板,利用方阵滴定法确定间接ELISA法的最适工作条件,验证该方法的精密度、灵敏度和特异性,并与商品化试剂盒进行比较。结果确定最佳抗原包被浓度为2μg/ml;血清稀释度为1︰10,37℃反应30 min;HRP标记的羊抗小鼠IgG最佳稀释度为1︰10 000,37℃反应30 min;TMB底物37℃显色15 min,以2.1×阴性对照血清A450均值(阴性对照血清小于0.05时按0.05计算)为Cut-off值。该方法具有良好的试验内和试验间精密度;与商品化试剂盒比较,灵敏度为100%,特异性为97.3%,二者符合率为98.5%。结论已成功建立HBV前S2抗体间接ELISA方法,可用于小鼠血清中前S2抗体的检测。
- 蒋丽明谭昌耀李炯
- 关键词：前S2抗体酶联免疫吸附测定
- 小鼠凋亡相关新基因PNAS-4真核表达载体的构建、表达及体外抗肿瘤作用被引量：3
- 2007年
- 目的:对小鼠凋亡相关新基因PNAS-4(mPNAS-4)进行克隆,构建其真核表达载体,并在小鼠Lewis肺癌细胞系LL2中转染表达;探讨mPNAS-4基因转染LL2细胞过表达所诱导的体外肿瘤细胞凋亡情况。方法:用RT-PCR从小鼠肝脏组织中克隆mPNAS-4编码区cDNA,构建重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-mPNAS-4;用脂质体将pcDNA3.1(+)-mPNAS-4转染小鼠Lewis肺癌LL2细胞;用RT-PCR检测转染细胞中mPNAS-4的过表达情况;通过MTT、流式细胞术(FCM)及DNALadder分别检测转染细胞的增殖与凋亡情况。结果:从小鼠肝脏组织中克隆到mPNAS-4全长cDNA并成功构建其真核表达载体pcDNA3.1(+)-mPNAS-4,转染小鼠Lewis肺癌LL2细胞可使其mRNA表达明显上调。mPNAS-4过表达能抑制LL2细胞增殖并诱导其凋亡。结论:mPNAS-4过表达对小鼠Lewis肺癌LL2细胞的生长有明显的抑制和诱导凋亡作用。
- 袁铸严飞赵新宇邓洪新李炯
- 关键词：基因转染真核表达凋亡
- 白介素-1家族新成员在自身免疫性疾病银屑病中具有的重要免疫调控功能
- <正>银屑病是一种多基因遗传背景下的自身免疫性皮肤病,全世界范围内发病率约为2%-3%。皮肤角质形成细胞与过度活化的炎性细胞相互作用是引发、维持银屑病病理特征的关键因素,探索新型细胞因子的免疫调控功能对银屑病发病机制的深...
- 李炯
- 文献传递
- 鼻咽癌相关抗原的血清学筛选与鉴定被引量：4
- 2004年
- 目的 有关鼻咽癌肿瘤抗原的研究还仍然集中于研究EB病毒与鼻咽癌的相互关系上 ,而有关鼻咽癌细胞本身的肿瘤抗原的研究到目前为止还几乎是空白。采用SEREX技术筛选与鉴定鼻咽癌相关肿瘤抗原。方法 从鼻咽癌肿瘤组织中提取mRNA ;构建鼻咽癌cDNA表达文库 ;利用SEREX技术筛选鼻咽癌cDNA表达文库 ;对阳性克隆进行测序、生物信息学分析。结果 ①构建的鼻咽癌cDNA表达文库大小为 1.9× 10 8个重组子。②筛选出 10个阳性克隆。③测序 :有 8个阳性结果。④生物信息学分析 :除了一些已知的抗原如MAGE外 ,发现一个热休克蛋白基因家族的新成员 ,其在染色体水平上与HSPCB有 84 %的同源性 ,在氨基酸水平上有 97%的同源性。
- 谢可田聆魏于全邓洪新赵霞李炯文艳君
- 关键词：鼻咽癌抗原血清学CDNA表达文库
- Adiponectin真核表达质粒的构建与表达研究
- 2008年
- 目的构建重组鼠adiponectin真核表达质粒,为进一步研究adiponectin的功能提供实验基础。方法提取鼠脂肪组织总RNA,运用RT-PCR方法扩增鼠adiponectincDNA完全编码区,将扩增产物连接至pCDNA3.1(+)载体,对重组质粒进行测序验证,并检测其体外表达和对小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖抑制作用。结果重组真核表达质粒经PCR扩增后获得一744bp片段,并经测序证实,Western-blot检测到其体外表达。在体外的细胞学实验中,将重组质粒转染入小鼠乳腺癌细胞4T148h后,与对照组相比,可以观察到明显的细胞形态学改变,细胞体积变小皱缩,4T1细胞生长明显抑制。流式细胞术检测到该组细胞中凋亡细胞所占比例明显高于对照组。结论成功构建了鼠重组adiponectin真核表达质粒,该质粒对小鼠乳腺癌细胞4T1的增殖有明显的抑制作用。
- 敬小梅文艳君贾永喜王永生李炯阚兵邓洪新
- 关键词：ADIPONECTIN质粒乳腺癌
- RNA干扰对EGFR高表达鼻咽癌生长抑制的实验研究
- 栾建刚梁传余郭青李新民赵茂茂张杰文艳君李炯张华王丽
- 恶性肿瘤仍是危及人类健康的主要杀手。我国为鼻咽癌高发地区，尽管晚期鼻咽癌的传统治疗方法(放疗、化疗和外科补救手术)在不断进展，但最近几十年，在全球范围内鼻咽癌癌治愈率仍无明显改善。近年兴起的生物治疗疗法，取得一定进展。有...
- 关键词：
- 关键词：鼻咽癌RNA干扰
- 小鼠IL-4重组质粒的构建及目的蛋白的表达和纯化被引量：2
- 2009年
- 目的构建重组小鼠白细胞介素-4(rmIL-4)原核表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化目的蛋白并鉴定。方法将优化后的小鼠IL-4cDNA片段克隆到原核表达载体pET-32a(+)上,获得重组质粒pET32/rmIL-4,转入BL21(DE3)中经IPTG诱导表达得到包涵体。经复性处理后,依次用阴离子交换柱和分子筛纯化蛋白。对纯化得到的蛋白用Western blot检验免疫学特异性,用mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖实验和动物实验测定其生物学活性。结果经酶切和测序证实重组质粒pET32/rmIL-4构建成功。诱导得到的包涵体用3mol/L盐酸胍溶液洗涤后溶于加有β-巯基乙醇的7mol/L盐酸胍溶液中变性,在pH9.5的条件下梯度透析复性。纯化出的蛋白经Western blot鉴定,能与抗小鼠IL-4抗体特异性结合;经细胞和动物实验鉴定,rmIL-4蛋白具有生物学活性,能刺激mIL-4生长依赖性细胞株CTLL-2增殖,使小鼠体内细胞因子发生从TH1到TH2的漂移。结论成功制备了高纯度、具有生物学活性的小鼠IL-4,为进一步研究其生物学功能提供了条件。
- 罗晓蕾任潇潇黄浓郁邱吉李倩周西坤李炯
- MIG(CXCL9)表达载体构建及体外活性鉴定
- 2006年
- 目的构建M IG(CXCL 9)真核表达载体,为利用M IG研究肿瘤基因治疗奠定基础。方法从pBLA ST-M IG上切下含M IG全长的cDNA序列,定向插入pORF-m cs真核表达质粒,构建pORF-M IG重组质粒;然后经酶切分析和测序鉴定后,通过脂质体介导转染CO S-7细胞;再进一步用免疫印迹法鉴定重组质粒的表达活性,用趋化试验鉴定生物学活性。结果pORF-M IG重组质粒经酶切分析和测序证实含有M IG的全长cDNA序列,转染CO S-7细胞后高效表达M IG蛋白,对活化的淋巴细胞有趋化作用。结论成功构建了M IG(CXCL 9)真核表达质粒,为进一步利用pORF-M IG研究恶性肿瘤基因治疗奠定基础。
- 张汝田聆肖飞文艳君李炯侯建梅张伶李刚姚兵陈县城梅开
- 关键词：趋化因子转染肿瘤基因治疗
