李加瑞
- 作品数：9 被引量：88H指数：3
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 玉米种子发育过程中直链淀粉积累规律的分析(英文)被引量：2
- 2006年
- 淀粉是玉米种子的主要组成成分,它包括直链淀粉和支链淀粉。支链淀粉的合成需要淀粉合成酶、分支酶和脱支酶的共同作用,而直链淀粉的合成则是在颗粒结合型淀粉合成酶的作用下进行的。颗粒结合型淀粉合成酶基因的突变造成玉米种子的腊质(糯性)表型。与支链淀粉合成的分子机制的研究相比,目前对玉米种子中直链淀粉合成的分子机制了解相对较少。以野生型黄早4玉米自交系和突变体糯玉米为实验材料,研究了种子不同发育时期直链淀粉的积累规律。通过碘染色的方法,观察了玉米种子发育过程中淀粉积累的形态变化。定量分析表明,从授粉后10d至25d,黄早4种子中直链淀粉的含量逐渐增加,同时颗粒结合型淀粉合成酶(GBSS)的活性逐渐提高;而在糯玉米中,直链淀粉和GBSS活性均未检测到。进而,通过RT-PCR方法,从黄早4种子中分离出编码GBSSI的cDNA片段。在授粉后10d至25d的玉米胚乳中均可检测到GBSSI的表达,而在胚中直到授粉后25d才检测到该基因表达的微弱信号。在糯玉米种子中没有检测到该基因的表达。研究结果表明,在玉米种子发育过程中,GBSSI基因的表达通过控制GBSS的合成,最终控制直链淀粉的合成。研究工作为理解玉米种子中直链淀粉合成的分子机制提供了重要信息。
- 郭尚敬李加瑞乔卫华张宪省
- 关键词：玉米GBSSI直链淀粉胚乳
- Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子中直链淀粉含量下降(英文)被引量：58
- 2005年
- 通过RNAi策略转化小麦,以降低小麦种子中直链淀粉的含量。小麦中直链淀粉合成的关键酶是颗粒结合型淀粉合成酶(GranuleboundstarchsynthaseI,GBSSI,即WAXY蛋白),通过RTPCR方法从小麦种子中分离出Waxy基因。Southern杂交分析表明,在基因组中存在3个Waxy基因。Northern杂交分析显示出在授粉后的小麦种子中检测到WaxymRNA。利用RNA沉默策略,将Waxy编码区683bp的正向和反向片段以及150bp内含子,连接于表达载体pCAMBIA3300中玉米ubi1启动子下游。以扬麦10号授粉后15d的幼胚为外植体,利用农杆菌介导的方法进行转化。通过PCR、RTPCR和叶片离体褪绿实验鉴定出4株转基因植株。小麦胚乳I2KI染色和直链淀粉含量测定表明这4株转基因植株直链淀粉含量明显下降。研究结果表明Waxy基因的RNA沉默使转基因小麦种子直链淀粉的含量下降。
- 李加瑞赵伟李全梓叶兴国安宝燕李祥张宪省
- 关键词：小麦WAXYRNA干涉直链淀粉
- 小麦种子基因的表达序列标签分析
- 以授粉后12天的小麦种子为材料构建起cDNA文库,从中随机挑选10000个克隆,提取其质粒DNA,并将其点于尼龙膜上,然后以未受精子房、胚和胚乳中提取的RNA为模板,反转录合成探针分别与膜杂交。根据杂交结果,选取800个...
- 李加瑞王芳张宪省
- 关键词：小麦种子CDNA微阵列胚乳
- 小麦品质性状基因的分离与淀粉品质性状的遗传改良
- 张宪省李加瑞赵翔宇董玉秀王芳刘茂森李兴国
- 该研究从小麦种子的cDNA文库中分离出25个品质性状相关的新基因，包括编码贮藏蛋白的基因以及与淀粉的合成和分解有关的基因，克隆出WGBSSI基因和控制紫粒小麦紫色的关键基因TaDFR。上述基因为小麦品质的改良提供了基因资...
- 关键词：
- 关键词：小麦基因淀粉品质性状
- 紫花苜蓿Na^＋/H^＋逆向转运蛋白基因在拟南芥中表达提高转基因植株的耐盐性被引量：25
- 2008年
- 以紫花苜蓿(Medicago sativa)为材料,利用反转录PCR方法分离了NHX1全长cDNA(命名为MsNHX1)。Southern杂交结果表明,在紫花苜蓿中存在一个小的液泡型Na+/H+逆向转运蛋白基因家族。序列分析表明,该基因所编码的蛋白与拟南芥、水稻和棉花中液泡型Na+/H+逆向转运蛋白具有较高的同源性。在洋葱表皮细胞中瞬时表达MsNHX1-GFP融合基因的结果表明,MsNHX1定位在液泡膜上。Northern杂交发现该基因的表达受高浓度NaCl诱导。MsNHX1在盐敏感酵母突变体中表达可以提高转化子对NaCl的耐受性,说明MsNHX1具有转运Na+的功能。在拟南芥中表达MsNHX1能显著提高植株耐受盐胁迫的能力;而且在受到盐胁迫时,转基因植株比野生型的渗透调节能力更强,生物膜受破坏程度降低,光合能力增强。以上研究结果表明MsNHX1是一个液泡膜Na+/H+逆向转运蛋白,在植物耐受盐胁迫过程中起重要作用。
- 安宝燕罗琰李加瑞乔卫华张宪省高新起
- 关键词：紫花苜蓿NA^+/H^+逆向转运蛋白基因拟南芥耐盐性
- 紫花苜蓿Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>反向转运蛋白基因及其克隆与应用
- 本发明涉及紫花苜蓿Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>反向转运蛋白MsNHX1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析与应用，属于分子生物学和生物技术领域。从紫花苜蓿根中提取总RNA，然后将1微克总RNA反转...
- 张宪省安宝燕李加瑞李祥
- 文献传递
- 小麦品质性状相关基因的分离及种子淀粉品质的遗传改良
- 小麦是世界性的重要粮食作物，在我国是仅次于水稻的第二大粮食作物，其产量与品质直接关系人类食物的供应程度和营养水平。
本文以授粉后12天的小麦种子为材料，构建cDNA文库。从中随机挑选10,000个克隆，利用Bi...
- 李加瑞
- 关键词：小麦种子小麦品质直链淀粉
- 小麦重要功能基因的分离与淀粉品质性状的遗传改良
- 张宪省李加瑞赵翔宇董玉秀王芳李兴国
- 小麦的产量高低和品质优劣，直接关系到人类食物的供应程度和营养水平。从小麦种子的cDNA文库中，利用cDNA微阵列技术分离出一批与品质性状有关的新基因，包括编码贮藏蛋白的基因以及与淀粉的合成和分解有关的基因。同时，克隆出控...
- 关键词：
- 关键词：小麦
- 紫花苜蓿Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>反向转运蛋白基因及其克隆与应用
- 本发明涉及紫花苜蓿Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>反向转运蛋白MsNHX1基因的克隆、重组及耐盐性功能分析与应用，属于分子生物学和生物技术领域。从紫花苜蓿根中提取总RNA，然后将1微克总RNA反转...
- 张宪省安宝燕李加瑞李祥
- 文献传递
