曾恒 作品数:23 被引量:85 H指数:4 供职机构: 华中科技大学同济医学院附属同济医院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 国家自然科学基金 卫生部卫生公益性行业科研专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
转化生长因子—β1对大鼠胰岛素的影响 2002年 目的:研究转化生长因子(transforming growth factor TGF-β1)对大鼠同种胰岛移植物体内外的内分泌功能及存活的影响。方法:构建TGF-β1的真核表达载体pcDNA3-TGF,并将其转染纯化后的Wistar大鼠胰岛,RT-PCR检测TGF-β1和大鼠胰岛素(Insulin 1 Insl)在实验组和对照组胰岛中的表达,放射免疫法(radioimmunological assay RIA)检测体外培养液中的胰岛素含量;链脲霉素(streptozotocin STZ)60mg/kg腹腔内注射制作SD大鼠模型,分别将实验组和空白对照组Wistar胰岛素移植到受体SD大鼠的肾包囊下,观察其在体内逆转糖尿病的作用以及作用时间的长短,并检测受体大鼠的糖耐量。结果:实验组胰岛有TGF-β1和Insl的表达,而对照组仅有Insl的表达;实验组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为(3.86±1.24)ng/ml和(8.43±1.59)ng/ml,对照组体外培养液中的胰岛素含量在基础相和刺激相分别为(4.13±1.45)ng/ml和(8.95±1.74)ng/ml,组间无显著生差异(P>0.05),而组内有显著性差异(P<0.05);实验组平均正常血糖维持时间(26.8±2.9天)比对照组(13.2±4.5天)显著延长。对照组糖耐量曲线均明显高于实验组。结论:TGF-β1对胰岛移植物的内分泌功能无损害作用,但是可以延长胰岛移植物体内存活时间。 曾恒 范骥 等关键词:转化生长因子 胰岛 糖尿病 骨肉瘤诱导分化与多药耐药表型的生物学性状比较 被引量:3 2007年 [目的]探讨诱导分化剂诱导骨肉瘤分化时同骨肉瘤耐药状态产生的分化情况的异同点,以便正确认识分化与耐药相关性。[方法]以诱导分化剂ATRA,IL-4处理人成骨肉瘤细胞系,对比MG-63耐药表型MG-63/R,观察瘤细胞生物学性状。用原位杂交分析在这一转化过程上凋亡调控基因P53,bcl-2 mRNA表达,用Tunel法分析细胞的凋亡。MTT法检查细胞对药物敏感性。[结果]MG-63/R,以及IL-4,ATRA处理的MG-63,细胞均出现分化,AT-RA处理的MG-63表现多药耐药性,并同MG-63/R表现出了相似的特性而IL-4处理的细胞分化的同时并未出现耐药。[结论]肿瘤细胞分化的过程中有可能出现一种顽固的多药耐药的亚分化状态,这种差异性分化的产生可能同细胞种类、状态、药物作用特点及剂量有关,如何控制细胞向耐药状态的分化为肿瘤的治疗提出了新的难题。 曾恒 陈安民 李锋 方煌 夏仁云关键词:骨肉瘤 分化 IL-4 经肌间隙椎弓根螺钉固定术结合椎体内植骨术治疗胸腰椎骨折的疗效与安全性评价 被引量:4 2019年 目的探讨经肌间隙椎弓根螺钉固定术结合椎体内植骨术治疗胸腰椎骨折的临床效果及安全性。方法选择2018年1月~12月华中科技大学协和江北医院收治的胸腰椎骨折患者60例,所有患者行椎弓根螺钉固定术结合椎体内植骨术,根据手术入路分为观察组和对照组,每组30例;观察组患者采用经肌间隙入路,对照组患者采用传统背部正中入路。比较2组患者手术时间、术中出血量、术后引流量及住院时间;分别于术前及术后第2、4、8天检测患者血清肌酸激酶水平;分别于患者术前和术后即刻、3个月测量伤椎椎体前缘高度及后凸Cobb角;分别于术前及术后24 h、3个月采用视觉模拟评分法(VAS)评估患者腰背痛情况,并观察2组患者并发症发生情况。结果观察组患者的手术时间、住院时间显著短于对照组,术中出血量和术后引流量显著少于对照组(P<0.05)。术前及术后第8天2组患者血清肌酸激酶水平比较差异无统计学意义(P>0.05);术后第2、4天,观察组患者血清肌酸激酶水平低于对照组(P<0.05)。2组患者术后第2、4天血清肌酸激酶水平显著高于术前,术后第8天血清肌酸激酶水平显著低于术前及术后第2、4天(P<0.05)。2组患者术前伤椎后凸Cobb角、椎体前缘高度比较差异无统计学意义(P>0.05);2组患者术后即刻及3个月伤椎后凸Cobb角小于术前,椎体前缘高度大于术前(P<0.05);术后即刻及3个月2组患者伤椎后凸Cobb角及椎体前缘高度较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者术前VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);术后24 h及3个月时观察组患者VAS评分显著低于对照组(P<0.05);2组患者术后24 h及3个月时VAS评分显著低于术前(P<0.05),术后3个月时VAS评分显著低于术后24 h(P<0.05)。观察组和对照组患者并发症发生率分别为6.7%(2/30)、23.3%(7/30),观察组患者并发症发生率低于对照组(χ^2=3.726,P<0.05)。结论经肌间隙入路 吴永光 全炜琨 胡玄 曾恒关键词:胸腰椎骨折 Relationship between the Expression of MTA1 Gene and Invasion and Metastasis of Human Osteosarcoma Cells 2006年 Objective: To compare the expression level of metastasis associated-1 (MTA1) in the higher and lower metastasis sublines of human osteosarcoma cells (MG63), and to investigate the relationship between the expression level of MTA1-EGFP and in vitro invasion and metastasis of human osteosarcoma cells. Methods: The expression level of MTA1 in two sublines of MG63 cells was detected by semi-quantitative RT-PCR, and cell invasion assay and cell proliferation assay were used to evaluate the invasive capacity in vitro in two sublines. The lower metastasis line of MG-63 cells were transfected with MTA1-EGFP full-length cDNA expression plasmid by lipofectamine. The changes of the MTA1-EGFP expression and in vitro invasion potential were measured after transfection. Results: M8 subline expressed significantly higher level of MTA1 than that of M6 subline by RT-PCR. The invasive potentials of low metastasis MG63 cell line were increased after MTA1 gene transfection. Conclusion: There may be a relationship between MTA1 and invasive potentials of human osteosarcoma cells, and MTA1 may play a role in the molecular mechanism of tumor metastases and be a potential target for gene therapy of osteosarcoma. Further studies of MTA1 in human ostersarcoma cell metastasis are needed. 李新志 陈安民 易成腊 郭风劲 罗政强 曾恒 徐卫国关键词:OSTEOSARCOMA INVASION 骨肉瘤耐药表型与核DNA阿霉素结合能力 2002年 目的:骨肉瘤的MDR基因表达与否是影响骨肉瘤患者愈后的重要因素之。但是现行检测MDR表达的方法尚无一种可以满意的应用于临床,本实验中主要研究核DNA同阿霉素结合能力评价(Adriamycin BindAssayABA)作为一种临床检测骨肉瘤MDR表型的方法可行性及可信性。方法:10例骨肉瘤患者术中切除的标本行ABA检测。核DNA同阿霉素结合的骨肉瘤细胞百分比(AB%)同标本切片后MDR探针原位杂交的结果进行比较。结果:10位患者中3位患者的AB%>80%(93.3±2.517%),而6位患者的原位杂交结果MDR表达阳性。经等级相关分析示二者为负相关(rs=-0.711,P<0.05),MDR阳性的患者的AB%平均为31%,而MDR阴性患者AB%为81%,差异有显著性。结论:从本实验的结果来看ABA法操作简单,检测所需周期短,结果高度可信,是一种可能应用于临床,指导骨肉瘤的术后化疗的有效指标。并直接反应骨肉瘤对化疗药物敏感性的可行方法。 曾恒 陈安民 等关键词:骨肉瘤 多药耐药 阿霉素 MDR 人骨肉瘤多药耐药细胞模型的建立 2002年 目的:建立人骨肉瘤细胞多药耐药亚系。方法:采用ADM间断冲击法,将MG-63暴露于ADM中,残留存活细胞克隆,扩增建系,并用FITC标记的P-gp抗体检测Mdr 1表达情况,用MTT,ABA法及流式细胞术检测肿瘤细胞的耐药特征。结果:本实验建立了六株P-gp表达阳性多药耐药细胞亚系:MG-63/R1,MG-63/R2,MG-63/R3,MG-63/R4,MG-63/R5,MG-63/R6。用免疫荧光术可以检测到P-gp的表达,用MTT可见各亚系细胞相对于亲本细胞对ADM耐药分别增至1.6,4.8,11.8,33,49.2,71.5倍。ABA法显示诱导产生的细胞亚系细胞内ADM累积能力明显下降,这说明Mdr1表达P-gp增加,并用维拉帕米拮抗P-gp的作用,可见细胞内ADM累积能力不同程度上升,柔红霉素荧光直方图可见肿瘤细胞的耐药程度越来越高。结论:MDR1/P170在骨肉瘤的多药耐药的特性上起着至关重要的作用,而且这些骨肉瘤多药耐药细胞亚系为进一步研究骨肉瘤多药耐药的生物学特征及发展新的逆转多药耐药的药物打下基础。 杨彩虹 曾恒 等关键词:骨肉瘤 多药耐药 细胞模型 阿霉素 Bcl-xL基因转染对脊髓损伤细胞凋亡的影响 被引量:4 2004年 目的 观察脂质体介导的Bcl-xL基因体内转染对大鼠脊髓损伤后伤区脊髓细胞凋亡和神经功能恢复的影响。 方法 制备大鼠胸段脊髓T8,9压迫损伤模型。 38只大鼠分成三组 :(1)损伤 +pSFFV .Bcl-xL转染组 (实验组 ,15只 ) ;(2 )损伤 +pSFFV .GFP转染组 (对照组 ,15只 ) ;(3)假损伤组 (8只 )。将阳离子脂质体质粒混合后直接注入大鼠损伤脊髓 ,伤后 3d和 7d利用半定量逆转录 -聚合酶链式反应 (RT -PCR)和免疫组化检测Bcl-xL基因体内表达 ;原位末端标记 (TUNEL)法检测细胞凋亡 ;采用开放场地试验BBB评分和斜板试验 ,评价神经功能。 结果脊髓损伤后 3d和 7d损伤局部Bcl -xLmRNA和蛋白较对照组和假损伤组表达明显增多 ;TUNEL结果显示 ,实验组损伤节段细胞凋亡数比对照组明显减少 ,神经功能改善。 结论 脂质体介导Bcl-xL体内转基因治疗可有效转染脊髓的神经细胞 ;外源性Bcl-xL在损伤脊髓的过度表达可减少脊髓不完全性损伤后凋亡引起的神经元死亡和增强神经细胞成活 ,促进神经功能恢复。 易成腊 陈安民 徐卫国 郭风劲 李锋 曾恒 肖骏 杨彩虹关键词:脊髓损伤 细胞凋亡 神经功能 免疫组化 p16、p27蛋白在骨巨细胞瘤和骨肉瘤中的表达 被引量:1 2001年 目的 :探讨抑癌基因 p16、p2 7在骨巨细胞瘤 (GCT)和骨肉瘤 (OS)中的蛋白表达特点及其在骨肿瘤发生中的意义。方法 :应用 SABC免疫组织化学方法检测 p16、p2 7蛋白在 16例骨肉瘤、4 6例骨巨细胞瘤 (其中 Jaffe 级 18例、 级 6例、 级 12例 )中的表达。结果 :p16和 p2 7蛋白的阳性表达均定位于骨肉瘤细胞、骨巨细胞瘤的基质细胞的细胞核和细胞质内。在骨巨细胞瘤 级、 级、 级和骨肉瘤中 p16蛋白的阳性表达率依次为 16 .7%、6 2 .5 %、6 6 .7%和 2 5 % ;p2 7蛋白的阳性表达率依次为 11.8%、5 6 .3%、5 0 %和 2 5 %。p16和 p2 7蛋白的骨巨细胞瘤 级中的阳性表达率显著地低于 级和 级 (P<0 .0 5 ) ,p16蛋白在骨肉瘤与骨巨细胞瘤 级之间的阳性率差异有显著性意义 (P<0 .0 5 ) ,而 p2 7蛋白在骨肉瘤和骨巨细胞 级之间的率差异则不具有显著性意义 (P>0 .0 5 )。结论 :p16、p2 7基因在骨巨细胞瘤和骨肉瘤的发生中起重要作用 ,但其阳性表达率不足以单独作为判断恶性程度和预后的指标。 许小涛 杨彩虹 曾恒关键词:P16蛋白 P27蛋白 免疫组织化学 骨肉瘤 骨巨细胞瘤 化疗药上调DR4、DR5表达体外逆转人骨肉瘤对TRAIL的耐受 被引量:1 2008年 目的研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)与化疗药对人骨肉瘤的联合作用及其受体(TRAILR)在人骨肉瘤中的表达间的关系。方法应用细胞计数、AO/EB染色、流式细胞术等方法比较检测阿霉素、顺铂、甲氨喋呤、紫杉醇单独作用和与TRAIL联合作用于MG-63及骨肉瘤组织的细胞毒效应;应用原位杂交、WesternBlot方法检测人骨肉瘤细胞系MG-63及新鲜骨肉瘤组织用药前后TRAILR的表达。结果阿霉素、顺铂和紫杉醇增强死亡受体的表达,且与TRAIL联合作用诱导人骨肉瘤细胞凋亡的效率显著强于单用。结论阿霉素、顺铂、紫杉醇通过上调DR4、DR5表达逆转人骨肉瘤对TRAIL的耐受。 杨彩虹 陈安民 曾恒 陈剑锋关键词:骨肉瘤 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 整合素αvβ_3对体外骨肉瘤细胞增殖与侵袭力的影响 被引量:3 2008年 目的研究整合素αvβ3在骨肉瘤细胞增殖和侵袭性生长中的作用,为以整合素αvβ3为靶点治疗人骨肉瘤提供实验依据。方法①采用MTT比色法和PCNA免疫组化检测法,观察不同浓度的整合素αvβ3抗体对体外培养的MG-63骨肉瘤细胞增殖的影响;②建立Boyden小室细胞侵袭模型,观察不同浓度的整合素αvβ3抗体对体外培养的骨肉瘤细胞侵袭能力的影响。结果①整合素αvβ3抗体对体外培养的MG-63骨肉瘤细胞的增殖有明显的抑制作用,其作用表现出明显的量效关系(P<0.05);②整合素αvβ3抗体显著降低体外培养的MG-63骨肉瘤细胞的侵袭能力,其作用亦表现出明显的量效关系(P<0.05)。结论整合素αvβ3对骨肉瘤细胞的恶性增殖和侵袭性生长具有促进作用,其为抗整合素αvβ3治疗骨肉瘤提供了实验依据。 曾恒 陈安民 李锋 杨彩虹关键词:整合素ΑVΒ3 骨肉瘤 增殖细胞核抗原 侵袭力