曹清香
- 作品数：9 被引量：17H指数：2
- 供职机构：衡阳市妇幼保健院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人巨细胞病毒IE1-GFP融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2007年
- 目的构建增强型绿色荧光蛋白(GFP)与人巨细胞病毒(HCMV)IE1融合蛋白真核细胞表达载体,为IE1基因的表达和功能研究提供基础。方法将质粒pNEB193-IE1和载体pEGFP-C1分别进行双酶切获得目的基因IE1片段和空载体,回收纯化后用T4连接酶将两者连接并转化E.coli JM109,用SalⅠ、BamHⅠ双酶切后琼脂糖电泳鉴定阳性克隆。结果双酶切pEGFP-C1-IE1后,琼脂糖电泳可见到大小约1 476 bp的片段,与IE1预期片段大小一致,即IE1亚克隆入pEGFP-C1。结论成功地构建了HCMV IE1-GFP融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1-IE1。
- 陈琳陈熙曹清香尹卫国余敏君万艳平
- 关键词：GFP真核表达
- 衡阳地区女性感染21种型别人乳头瘤病毒现状分析被引量：9
- 2014年
- 目的了解衡阳地区21种型别人乳头瘤病毒(HPV)感染女性的现状与分布规律。方法以2012年4月至2013年5月在衡阳市妇幼保健院就诊自愿接受宫颈癌筛查的8 032例女性为研究对象,收集宫颈组织脱落细胞标本;采用凯普医用核酸分子快速杂交系统检测标本中21种型别HPV基因,统计分析女性HPV感染率及HPV基因分布。结果在8 032例标本中,有1 664例检出1种或2种以上的HPV,女性HPV感染率为20.72%;居前六位的HPV型别分别为HPV16、52、58、81、53、18。在1 664例HPV感染女性中,单一HPV感染率为76.44%,多重感染率为23.56%,且多为二重感染;感染HPV的各年龄组总阳性率随年龄增长呈"U"型分布,但不同年龄组总阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论衡阳地区女性HPV感染率相对较高,且以高危型HPV感染为主,HPV16居第1位。
- 曹清香高红唐清戴文谢文柳万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒基因型女性
- 人巨细胞病毒IE1真核表达载体的构建与表达被引量：2
- 2008年
- 目的构建人巨细胞病毒(HCMV)IE1真核表达载体,观察其在真核细胞内的表达,为HC-MVIE1核酸疫苗的相关研究奠定基础。方法将质粒pNEB193-IE1用SalⅠ、BamHⅠ双酶切与载体pEGFP-C1连接构建重组载体pEGFP-C1-IE1;双酶切鉴定后,取重组载体pEGFP-C1-IE1用EcoRⅠ、HindⅢ双酶切与载体pcDNA3.1(-)连接构建重组质粒pcDNA3.1(-)-IE1,双酶切和测序鉴定;将重组质粒pcDNA3.1(-)-IE1转染HeLa细胞,RT-PCR检测IE1 mRNA的表达。结果重组载体pEGFP-C1-IE1和pcDNA3.1(-)-IE1双酶切后均可切出约1 476 bp目的片段;重组载体pcDNA3.1(-)-IE1测序结果登录GenBank,作BLAST分析,含有1 476 bp目的基因片段,无碱基错配和移码突变,与读码框完全一致;转染重组载体pcDNA3.1(-)-IE1的细胞中可扩增出约1 476 bp的目的条带。结论成功地构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-IE1,且其能在真核细胞内表达。
- 曹清香陈琳余敏君蔡恒玲万艳平
- 925例宫颈轻度炎症患者感染HPV及其基因型分析被引量：1
- 2015年
- 目的了解衡阳地区TCT结果为轻度炎症患者人乳头状瘤病毒（HPV）的感染率及基因亚型的分布情况。方法以2012年4月-2013年4月在衡阳市妇幼保健院就诊,TCT结果为宫颈轻度炎症且自愿接受HPV检测的925例女性为研究对象,采用凯普医用核酸分子快速杂交系统检测标本中21种HPV基因,统计分析HPV感染率及HPV基因亚型分布。结果在925例宫颈轻度炎症的妇女中,有216例感染了HPV,感染率为23.35%;其中,198例（21.41%）感染HR-HPV,18例（1.95%）感染LR-HPV;以HPV16居多,其次是HPV52、HPV58、HPV53、HPV81和HPV18。172例（79.63%）为单一感染,44例（20.37%）为混合感染。宫颈轻度炎症妇女年龄高峰为18岁~29岁,以后随年龄增长逐渐下降;各年龄组HPV感染总阳性率、HR-HPV感染阳性率和LR-HPV感染阳性率差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论衡阳地区TCT结果为宫颈轻度炎症女性HPV感染率较高,且以HR-HPV感染为主;应对宫颈轻度炎症女性进行HPV检测和追踪,以便监控宫颈癌高危人群。
- 曹清香唐清戴文胡晖易彦
- 关键词：液基细胞学检测宫颈炎人乳头状瘤病毒基因型
- 人巨细胞病毒IE1蛋白促进巨噬细胞分泌IL-1β、TNF-α及凋亡被引量：1
- 2008年
- 为了研究HCMV IE1-GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞分泌活性及其凋亡的影响,将真核表达载体pEGFP/IE1转染至巨噬细胞(Mφ),转染48h后,用荧光显微镜观察GFP-IE1融合蛋白或GFP的表达与定位。ELISA法检测细胞培养上清中IL-1β或TNF-α的含量以及用RT-PCR检测其mRNA的表达情况,并收集Mφ经PI染色后流式细胞术(FCM)检测其凋亡率。结果发现,GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时表达且定位于细胞核,GFP定位于整个细胞中。GFP-IE1融合蛋白在Mφ内瞬时高表达使Mφ分泌IL-1β和TNF-α量及其mRNA表达量均增加且Mφ凋亡率明显上升,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而GFP表达对Mφ分泌及其凋亡无影响(P>0.05)。HCMV IE1瞬时高表达可上调Mφ分泌细胞因子IL-1β和TNF-α并促进Mφ凋亡。
- 刘安元陈琳万艳平陈熙朱翠明余敏君曹清香
- 关键词：巨噬细胞IL-1ΒTNF-Α凋亡
- 人巨细胞病毒IE1核酸疫苗的构建及其免疫效果的初步研究
- 目的:构建人巨细胞病毒(HCMV)IE1核酸疫苗pcDNA3.1(-)-IE1,通过免疫BALB/c小鼠,初步研究其产生的体液免疫和细胞免疫应答水平,为进一步研发HCMV IE1疫苗奠定实验基础。 方法: (1)将重...
- 曹清香
- 关键词：人巨细胞病毒免疫效果细胞增殖
- 文献传递
- 人巨细胞病毒疫苗及其研究进展
- 2007年
- 人巨细胞病毒（HCMV）在人群中多为潜伏感染，对免疫功能低下者如新生儿、器官移植、造血干细胞移植和AIDS病人，可造成严重危害甚至死亡。抗HCMV感染免疫有体液免疫和细胞免疫，尤其是细胞免疫发挥关键作用。使用HCMV疫苗诱导体液免疫和细胞免疫预防HCMV感染是有效和理想的选择。
- 曹清香陈熙万艳平
- 关键词：巨细胞病毒体液免疫细胞免疫
- HPV18型E2蛋白高表达对巨噬细胞凋亡及其分泌功能的影响被引量：4
- 2008年
- 目的:研究HPV18E2及其N端(TAD)、C端(DBD)与GFP融合蛋白瞬时高表达对巨噬细胞(MΦ)凋亡及分泌活性的影响,为进一步研究E2蛋白在HPV18致癌机制中的作用奠定实验基础。方法:通过PCR从现有真核表达载体pEG-FP-C1/E2上分别扩增出TAD、DBD基因片段,并构建真核表达载体pEGFP-C1/TAD、pEGFP-C1/DBD。将3种真核表达载体及pEGFP-C1分别转染MΦ,用倒置荧光显微镜观察它们的表达与定位,并以抗GFP抗体为一抗作Westernblot检测它们的表达。通过3种融合蛋白在MФ内的瞬时高表达,在转染48h后分别检测各组细胞培养基中TNF-α和IL-1β的含量,并收集MΦ经染色以及流式细胞术(FCM)观察检测其凋亡。结果:GFP-E2融合蛋白主要表达于细胞核,细胞质内也有表达,而GFP-DBD融合蛋白仅表达于细胞核内,GFP-TAD仅表达于细胞质。GFP-E2、GFP-TAD融合蛋白在MΦ内高表达后MΦ凋亡率上升,细胞因子TNF-α和IL-1β分泌量增加,且GFP-TAD作用强于GFP-E2。而EGFP-DBD无此作用。结论:HPV18E2及其TAD与EGFP融合蛋白瞬时高表达可诱导MΦ凋亡并上调其分泌细胞因子TNF-α和IL-1β。
- 彭俊朱翠明余敏君曹清香王鑫万艳平
- 关键词：人乳头瘤病毒18型E2蛋白巨噬细胞
