曹楠
- 作品数：9 被引量：11H指数：2
- 供职机构：华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目国家自然科学基金国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 多种亚型猪流感病毒混合感染的纯化和鉴定被引量：2
- 2013年
- 为了研究多种亚型猪流感病毒混合感染后病毒的纯化,试验采用鸡胚终点稀释法结合特异血清中和法对可能混合多种亚型猪流感病毒的样品进行纯化,并对纯化结果进行HI和RT-PCR试验进行验证。结果表明:此种方法纯化病毒是可行的,不同代次不含外源病毒。
- 曹楠齐海涛孔维立王衡谭力凯张桂红
- 关键词：猪流感病毒纯化
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立
- 引言/目的猪流感病毒是A型流感病毒属成员,属于正黏病毒科,分阶段的负链RNA病毒。A型流感病毒的亚型鉴定是根据血凝素(Hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)基因的抗原差异性来区...
- 齐海涛孔维立曹楠粟硕谭力凯黄震张桂红
- H1N2亚型猪流感病毒NS1的原核表达及抗原性分析
- 2011年
- 为了进一步监控猪流感病毒对猪群的感染情况,研究对H1N2亚型猪流感病毒NS1基因进行RT-PCR扩增,并将其克隆到表达载体pET-30a(+)上构建重组质粒pET-NS1获得纯化产物,结果表明:NS1蛋白能够高效表达,与预期分子质量大小相符;经Western-blot分析,NS1蛋白能很好地与猪流感活病毒产生血清反应,而不能与灭活疫苗产生血清反应;被检血清稀释度为1∶640时,ELISA检测阳性血清的OD490值约为阴性血清的3倍,差异明显。说明NS1蛋白具有良好的血清学反应特异性。
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- 关键词：猪流感病毒NS1抗原性分析
- 流感病毒受体特异性间接ELISA检测方法的建立
- 2014年
- 本研究采用过碘酸钠法对去唾液酸胎球蛋白进行辣根过氧化物酶(HRP)标记,然后通过两种不同类型的唾液酸转移酶对HRP去唾液酸胎球蛋白进行唾液酸标记,使其成为只含有单一受体的载体。利用MAA和SNA以及已知受体特性的两株流感病毒对唾液酸标记的HRP去唾液酸胎球蛋白进行受体结合特异性鉴定。结果表明,该方法可以快速准确的鉴定流感病毒的受体特异性。
- 邵振文谭力凯粟硕曹楠杨萌萌张桂红
- 关键词：流感病毒
- 流感病毒受体特异性红细胞检测试剂的制备及初步应用
- 2014年
- 为优化流感病毒受体特异性的检测方法,本研究利用霍乱弧菌神经氨酸酶(VCNA)对鸡红细胞(RBC)进行去唾液酸化处理后,再分别通过α2,3和α2,6唾液酸转移酶以CMP-唾液酸作为底物进行不同唾液酸受体的标记,使其分别仅含SAα2,3Gal和SA2,6Gal受体,利用血凝试验和流式细胞仪检测其标记效果。流式检测结果显示,经过α2,3唾液酸转移酶处理的红细胞只含有SAα2,3唾液酸受体,而α2,6唾液酸转移酶只将SAα2,6唾液酸受体标记到红细胞表面。将两种红细胞分别经过人流感病毒和禽流感病毒的检测,表明该方法可以快速鉴定流感病毒的受体特异性。本研究所建立的流感病毒受体特异性标记和检测方法为流感病毒宿主嗜性范围的检测提供了一种有效的技术手段。
- 邵振文谭力凯粟硕曹楠周晗杨萌萌张桂红
- 关键词：流感病毒
- 1株H3N2亚型猪流感病毒的分离鉴定
- 2012年
- 为了解广东猪流感病毒(SIV)的流行变异情况,2010年11月从广东某规模猪场采集流感症状的猪鼻拭子60份,接种10日龄SPF鸡胚,分离到1株猪流感病毒,通过流感分型RT-PCR和HI试验鉴定为H3N2亚型SIV,命名为A/swine/Guangdong/L22/2010(H3N2),进行全基因序列测定及相似性分析发现,该分离株有低致病性流感分子特征,该毒株的8个基因片段连同最近广东猪群流行的流感毒株与2000年前后H3N2人流感病毒有较高的同源性。系统遗传演化显示,该病毒分离株可能是由1999年人源H3N2流感病毒A/Moscow/10/99(H3N2)进化而来。
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- 关键词：H3N2猪流感病毒
- 1株禽源猪流感H6N6病毒的反向遗传系统的建立被引量：3
- 2014年
- 为建立禽源猪流感病毒A/swine/Guangdong/K6/2010(H6N6)的反向遗传系统,本试验构建了包含有GDK6毒株基因组的8个重组质粒,转染293T细胞后成功拯救出病毒r GDK6。救获病毒与亲本病毒拥有相同基因序列,其抗原性、经HI试验、TCID50试验和小鼠攻毒试验表明,救获病毒的生物学特性与对小鼠的致病性与亲本病毒一致。禽源猪流感H6N6病毒的反向遗传系统的成功建立为进一步研究H6亚型流感病毒的分子致病机理与病毒基因功能及新型疫苗创制提供了技术平台。
- 谭力凯张民泽邵振文曹楠粟硕陈济铛周晗张桂红
- 关键词：猪流感
- 猪流感病毒H1、H3、N1、N2亚型分型RT-PCR方法的建立
- 目的：是建立一种特异、敏感、快速的鉴定分型检测方法，为猪流感分子流行病学的调查奠定良好的基础。方法：对猪流感病毒A/swine/GD/170/06 (H1NT), A/swine/GD/164/06 (H3N2)和A/s...
- 齐海涛孔维立曹楠粟硕谭力凯黄震张桂红
- 关键词：猪流感病毒RT-PCR法
- H3亚型猪流感病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 为建立一种快捷、可行的检测H3亚型猪流感病毒(SIV)的方法,本研究根据GenBank中登录的H3亚型SIV HA基因的保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了一种检测H3亚型SIV的SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法,并进行灵敏度、稳定性和特异性试验,与普通PCR进行比较。研究结果表明,标准曲线的循环阈值与模板浓度呈现良好的线性关系,R2为0.994,CV在0.17%～1.41%之间,具有良好稳定性。除H3亚型SIV外,对H1、H4、H6、H9亚型SIV以及猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒和猪圆环病毒2型的检测均为阴性,与普通PCR相比更灵敏。该方法特异性好,准确率高,适于临床分离鉴别H3亚型SIV。
- 郭泗虎王文华张亮权齐海涛曹楠闫明菲黄昌力张超轶张桂红
- 关键词：猪流感H3亚型
