徐杰伟 作品数:10 被引量:6 H指数:1 供职机构: 湖州市中心医院 更多>> 发文基金: 浙江省湖州市科技计划项目 浙江省重大科技专项资金 浙江省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
中期因子过表达对肝癌细胞多药耐药的影响 被引量:1 2017年 目的探讨中期因子(midkine,MK)过表达对肝癌细胞多药耐药(multidrug resistance,MDR)的影响。方法将肝癌SMMC7721细胞转染pIRES2-EGFP-MK重组质粒后,分别以实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法及流式细胞术检测MK基因mRNA和蛋白水平,通过流式细胞术检测细胞内DNR蓄积。MTT法检测细胞对不同化疗药物的敏感性了解MK对肝癌细胞多药耐药的影响。结果pIRES2-EGFP—MK重组质粒转染肝癌SMMC7721细胞后,MK基因mRNA和蛋白产物MK的表达水平明显增高。提示MK重组质粒达到了对MK转录的有效增强。中期因子转染组细胞胞内DNR蓄积量显著降低(4.06±0.88,P〈0.05),对ADM、5-FU的Ic。显著增加(15±3,27±4,P〈0.05)。结论经pIRES2-EGFP—MK重组质粒转染肝癌细胞后.细胞内中期因子表达的增高可增强肝癌细胞对不同化疗药物的耐药性。 慎华平 周轼瑜 徐杰伟 邱建 魏云海 张鸣杰 张国雷 严强关键词:肝细胞 多药耐药相关蛋白类 CK2β,XIAP在胆管癌组织中的表达及其临床意义 目的: 检测胆管癌组织中CK2β和XIAP蛋白的表达水平,并分析与临床病理参数及预后的相关性。 方法: 免疫组化法检测、比较50例胆管癌和20例正常胆管组织中CK2β和XIAP蛋白的表达水平,并分析胆管癌CK2β和XIA... 徐杰伟关键词:胆管癌 蛋白激酶CK2 XIAP 预后 文献传递 沉默MK基因增强肝癌Bel/Fu细胞对5-氟尿嘧啶的敏感性及可能的机制 被引量:1 2017年 目的:研究沉默中期因子(midkine,MK)基因表达后人肝癌氟尿嘧啶(uorouracil,Fu)耐药细胞株Bel/Fu对5-Fu敏感性的变化,并初步探讨可能的作用机制。方法:采用脂质体瞬时转染法将MK-siRNA转入Bel/Fu细胞,分别应用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测MK mRNA及蛋白的表达水平。MKsiRNA联合5-Fu处理后,分别采用MTT及FCM法检测肝癌Bel/Fu细胞的增殖抑制率及凋亡情况,采用蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,Akt)信号通路中相关蛋白磷酸化PI3K、磷酸化Akt和核因子-κB(nuclear factorkappa B,NF-κB)及凋亡相关蛋白Bcl-2、survivin和caspase-3的表达水平。结果:MK-siRNA转入Bel/Fu细胞后,MK mRNA和蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.05)。MK-siRNA转染组5-Fu对Bel/Fu细胞的半数抑制浓度(half inhibitory concentration,IC50)为(472±21)μg/mL,明显低于空白对照组的(2 035±34)μg/mL(P<0.05);细胞凋亡率为(32.10±3.61)%,明显高于空白对照组的(7.90±0.91)%(P<0.01);PI3K/Akt信号通路中相关蛋白p-PI3K、p-AKT、NF-κB、Bcl-2和survivin蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.05),而凋亡蛋白caspase-3表达明显上调(P<0.05)。结论:siRNA沉默MK基因表达后可增强肝癌Bel/Fu细胞对5-Fu的敏感性,其机制可能与调控PI3K/Akt信号通路的活化相关。 徐杰伟 慎华平 邱建 魏云海 王雁 严强关键词:小分子干扰 姜黄素增强人胆管癌细胞株QBC939对吉西他滨敏感性的研究 被引量:4 2018年 目的探讨姜黄素对人胆管癌细胞株QBC939吉西他滨的增敏作用及其机制研究。方法将人胆管癌细胞QBC939培养后分为对照组、5μg/m1单药姜黄素组、0.625μg/m1单药吉西他滨组及5μg/m1姜黄素联合0.625μg/m1吉西他滨组,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞周期及凋亡变化,同时用Westernblot法检测相关蛋白核因子±κB(NF±κB)、细胞周期蛋白(Cyclin)B1、凋亡抑制蛋白(1AP)-1的表达改变。结果姜黄素联合吉西他滨处理人胆管癌细胞QBC939后12、24、48、72h的抑制率分别为(10.00±0.02)%、(23.10±0.03)%、(33.234±0.01)%、(48.304±0.05)%,显著高于对照组及单药组(P=0.001、0.000、0.000、0.000)。两药联合作用后能使(28.75±3.23)%的人胆管癌细胞QBC939被阻滞在G2/M期,显著高于单药姜黄素组及单药吉西他滨组[(14.494±2.20)%、(11.824±2.10)%;P=0.000],且细胞凋亡率为(13.644±3.40)%,显著高于对照组、单药姜黄素组及单药吉西他滨组[(4.534±0.56)%、(6.47±0.98)%、(9.874±1.12)%,P=0.000];姜黄素联合吉西他滨作用于人胆管癌细胞株QBC939后NF±κB及下游分子CyclinB1和IAP±1蛋白的相对表达量分别为0.3004±0.001、0.4074±0.036、0.4754±0.032,显著低于对照组、单药姜黄素组及单药吉西他滨组(P=0.000、0.001、0.003)。结论姜黄素可增强人胆管癌细胞株QBC939对吉西他滨的敏感性,其机制可能与NF±κB信号通路的抑制相关。 徐杰伟 邱建 董顺利 钟婧 叶国超关键词:胆管细胞癌 姜黄素 吉西他滨 核因子-ΚB 过表达中期因子增强SMMC 7721细胞对5-Fu耐药及可能机制研究 2019年 目的探讨过表达中期因子(MK)增强SMMC 7721细胞对5-氟尿嘧啶(5-Fu)耐药及其可能的机制。方法将SMMC 7721细胞转染pIRES2-EGFP-MK重组质粒过表达,采用实时荧光定量PCR(qPCR)和蛋白质印迹法(WB)检测MK mRNA和蛋白的表达。5-Fu处理后,采用MTT法检测SMMC 7721细胞对5-Fu的耐药。采用WB法检测磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和NF-κB及Bcl-2、survivin、caspase-3的表达。结果将SMMC 7721细胞转染pIRES2-EGFP-MK重组质粒过表达后,MK mRNA和蛋白的表达增加,ConC组细胞对5-Fu的IC50显著高于Con-A组、Con-B组[(27.36±4.31)mg/L vs (4.57±0.34)mg/L,(4.96±0.46)mg/L],差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,与Con-A组、Con-B组比较,Con-C组细胞p-PI3K(0.66±0.04 vs 0.35±0.03,0.57±0.03)、p-Akt (0.31±0.02 vs 0.17±0.02、0.25±0.02)、NF-κB (0.63±0.05 vs 0.27±0.02,0.53±0.04)、Bcl-2(0.42±0.04 vs 0.13±0.01, 0.38±0.04)、survivin(0.58±0.04 vs 0.18±0.02,0.51±0.04)呈现高表达,caspase-3(0.41±0.04vs 0.88±0.06,0.43±0.03)呈现低表达(P<0.05)。结论过表达MK可增强SMMC 7721细胞对5-Fu耐药,其机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。 慎华平 徐杰伟 朱霄峰 邱建 魏云海 张国雷 黄惠莲 严强关键词:SMMC 5-氟尿嘧啶 磷脂酰肌醇3-激酶 蛋白激酶B 氯化锂对肝癌细胞BEL-7402增殖、周期的影响及其作用机制 2013年 目的探讨氯化锂对人肝癌细胞BEL-7402增殖、周期的影响及其作用机制。方法应用MTT法及DNA PREP细胞周期法检测BEL-7402经氯化锂作用后的增殖及周期改变情况,Western blot检测糖原合成激酶-3(GSK-3)、失活pGSK-3及其下游分子CyclinD1的表达情况。结果氯化锂可显著抑制BEL-7402的增殖,并呈时间、剂量依赖性(P<0.05);氯化锂可使BEL-7402的G_0/G_1期比例明显降低、G_2/M期比例显著升高(P<0.05);氯化锂作用后GSK-3、失活pGSK-3及CyclinD1蛋白的表达水平均明显升高(P<0.05)。结论氯化锂可抑制肝癌细胞增殖,其机制可能是通过抑制GSK-3活性并上调CyclinD1表达使肝癌细胞阻滞于G_2/M期。 徐杰伟 蒋桂星 曹利平关键词:肝癌 氯化锂 CYCLIND1 pGSK-3α/β(Tyr279/216)和X连锁凋亡抑制蛋白在胆管癌中的表达及其临床意义 2013年 目的研究糖原合成激酶3(GSK-3)活性形式pGSK-3a/β(Tyr279/216)及其下游分子X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)在胆管癌组织中的表达情况,并探讨其表达与胆管癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化法检测50例胆管癌组织和20例正常胆管组织中pGSK-3a/β(Tyr279/216)和XIAP蛋白的表达水平。结果pGSK-3a/β(Tyr279/216)和XIAP蛋白在胆管癌组织中阳性表达率分别为62.O%和68.0%,在正常胆管组织中的阳性表达率分别为10.0%和25.0%,pGSK-30a/β(Tyr279/216)和XIAP蛋白在胆管癌组织中的表达强度显著高于正常胆管组织(均P〈0.001)。Spearman相关分析显示,pGSK-3a/β(Tyr279/216)和XIAP蛋白在胆管癌组织中的表达具有显著相关性(r=0.544,P〈0.001)。pGSK-3a/β(Tyr279/216)蛋白表达与胆管癌的TNM分期(P=0.042)和组织分化程度(P=0.031)有关,XIAP蛋白表达与血清CEA水平有关(P=0.006)。pGSK-3a/β(Tyr279/216)阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为3.2%和26.3%(P=0.002),XIAP阳性表达和阴性表达患者的5年生存率分别为5.9%和25.9%(P=0.018)。多因素分析结果显示,TNM分期(P=0.006)、术前总胆红素(P=0.001)、并发症(P=0.003)和pGSK-3a/β蛋白水平(P=0.002)是影响胆管癌患者预后的独立因素。结论pGSK-3a/β(Tyr279/216)和XIAP蛋白与胆管癌的发生、发展有密切关系,pGSK-30a/β(Tyr279/216)可作为预测胆管癌预后的重要因素。 徐杰伟 周凡 蒋桂星 陈城洋 汪晶晶 曹利平关键词:胆管肿瘤 不同的断肝技术在肝叶切除术中对病人损伤和康复的对比研究 目的比较刮吸法(PMOD)、超声水刀(CUSA)、能量平台(Ligasure)、射频消融法等四种断肝技术在肝切除术中的应用及各自的优缺点。方法回顾性分析我院2010.1~2011.5期间由单一医疗组治疗的26例左肝外叶切... 曹利平 阙日升 周凡 丁国平 金德西 徐杰伟文献传递 中期因子基因调控在肝癌多药耐药中的作用及机制研究 慎华平 邱建 俞晓峰 徐杰伟 魏云海 张国雷 王雁 沈 1.课题来源与背景:原发性肝癌是中国最常见的恶性肿瘤之一,化疗是肝癌治疗中除手术、放疗以外最重要的手段,尽管新的化疗药物及化疗方案不断推出,但疗效仍不尽人意。近年来研究表明,多药耐药现象是导致肝癌化学治疗失败的主要因素,...关键词:关键词:肝癌 肿瘤治疗 药物治疗 Rap1GAP在放射性碘抵抗分化型甲状腺癌中表达下调,诱导激活TGF-β1/Smad通路抑制钠/碘转运体的表达 高卫利 徐永灿 钱福初 卢军 王众 陆伟 徐杰伟 1.课题来源与背景:甲状腺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。在过去的几十年中,其发病率在全世界范围内迅速增加,同时进展期甲状腺癌的数量及其发生肿瘤相关性死亡率也有逐年上升趋势。甲状腺癌主要病理分型分为乳头状癌和滤泡状癌,两...关键词:关键词:甲状腺癌 肿瘤治疗