徐娴 作品数:30 被引量:49 H指数:4 供职机构: 南京工业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 江苏省自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 轻工技术与工程 理学 更多>>
一种核苷酸序列及其在提高菌株耐酸性中的应用 本发明公开了一种核苷酸序列,该核苷酸为全局转录调控因子的基因序列,本发明还公开了该核苷酸序列在提高菌株耐酸性中的应用。 黄和 高茜 江凌 徐晴 徐娴 李霜文献传递 番茄红素基因工程菌多酶调控研究进展 被引量:1 2017年 作为类异戊二烯化合物中四萜的代表性产品番茄红素,在生物体中是典型的多酶参与催化的反应产物,在2-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸盐(MEP)和甲羟戊酸(MVA)合成途径中起着至关重要的作用。从番茄红素在原核和真核中的多酶合成途径出发,针对番茄红素合成途径的各种优化策略,首先介绍了多酶合成中的常规调控方法,包括多基因共表达质粒构建、基因顺序调控、启动子与核糖体结合位点调控及基因敲除和替换等方法。之后介绍了一些新型的多酶调控方法,包括多片段组装技术、人工支架自组装方法等。最后重点介绍了这些多酶调控方法在番茄红素合成中的应用。这些多酶合成调控方法为构建高产番茄红素菌株提供了极大的启发和研究基础。 徐加莉 左思仪 谢承佳 江凌 李霜 黄和 徐娴关键词:番茄红素 基因工程 一种利用全细胞催化合成海藻糖的方法 本发明涉及一种利用全细胞催化合成海藻糖的方法。发酵培养能大量生产海藻糖合酶的重组大肠杆菌细胞,通过使用生物表面活性剂对重组细胞进行通透性处理,经处理的细胞以麦芽糖为底物子啊磷酸盐缓冲体系中合成海藻糖。经透性化处理的大肠杆... 黄和 江凌 崔怀言 唐飞 李霜 徐娴文献传递 枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶基因的克隆及高效表达 被引量:13 2007年 扩增了枯草芽孢杆菌中的葡萄糖脱氢酶基因(gdh),构建了诱导型表达载体pET-gdh,导入E.coliBL21(DE3)后获得了高效表达葡萄糖脱氢酶基因的重组菌BL21/pET-gdh。经过诱导时间、诱导温度参数的优化,IPTG诱导后重组菌BL21/pET-gdh的葡萄糖脱氢酶比酶活高达9.65 U/mg蛋白,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白质表达量占全菌胞内可溶性蛋白的53%,实现了葡萄糖脱氢酶基因的高效表达,为氧化还原酶催化系统提供高效率的NADP+与NADPH循环奠定了基础。 徐娴 谢承佳 何冰芳关键词:葡萄糖脱氢酶 辅酶再生 一种耐重金属汞的真菌菌株及其应用 本发明公开了一株出芽短梗霉菌菌株<I>Aureobasidium pullulans </I>F134M,该菌株经分离、筛选、鉴定、诱变获得,已保藏于广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为:GDMCC No:60070... 黄和 唐苏苏 江凌 俞亚东 徐晴 徐娴文献传递 基于同源重组的裂殖壶菌遗传转化体系的构建及验证 2015年 【目的】裂殖壶菌是一种能高效生产DHA的海洋真菌;基因工程技术已经成功应用在微生物改造和代谢机理研究中,利用基因工程技术对裂殖壶菌进行改造首先需要构建适合裂殖壶菌的遗传转化体系;【方法】本文利用电转化的方法将含有18S r DNA同源重组片段的ble基因导入裂殖壶菌中,通过zeocin抗性平板筛选出阳性菌株,并设计ble基因引物,以裂殖壶菌基因组为模板,进行PCR验证ble基因是否成功结合到裂殖壶菌染色体上。【结果】筛选获得的抗性菌株基因组上确实PCR出ble基因片段,对改造菌株与原始菌株进行发酵培养,发现改造后菌株在生物量、油脂含量、DHA含量及脂肪酸分布等方面和原始菌株基本一致。【结论】抗性基因的插入不会影响菌株的正常代谢,该体系的构建为后续其他外源基因导入奠定基础。 庄小燕 陈胜兰 纪晓俊 徐娴 任路静关键词:裂殖壶菌 RDNA 同源重组 采用可视化方法通透性处理大肠杆菌细胞生产海藻糖合成酶 被引量:3 2014年 采用一种新的工业过程操作优化方法——可视化优化方法,对利用生物表面活性剂硫酸粘杆菌素通透性处理重组大肠杆菌BL21生产海藻糖合成酶的工艺条件进行优化。结果表明:以1.40 g/L的硫酸粘杆菌素为渗透剂,35℃渗透处理72 min,即得透性化细胞海藻糖合酶,酶活是传统超声破碎法制得的2.09倍。所得透性化细胞间歇反应时,以30%麦芽糖为底物进行海藻糖转化实验,转化率可达70%,重复使用16批(12 h/批),转化率可保持在65%以上。 崔怀言 江凌 张文婧 唐飞 徐娴 李霜 黄和关键词:海藻糖合成酶 硫酸粘杆菌素 甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌Rosetta中的高效表达 被引量:14 2007年 甲酸脱氢酶是氧化还原酶辅酶NAD(P)^+和NAD(P)H再生循环体系中的关键酶。实验中,用PCR方法扩增了假丝酵母Candida boidinii中甲酸脱氢酶基因(fdh),分别构建了诱导型表达载体pUC-dh和pET- fdh,以E.coli Rosetta为表达宿主,获得了能够高效表达甲酸脱氢酶的重组菌。经诱导后重组菌Rosetta/pET- fdh的FDH比酶活为0.399U/mg(蛋白),Rosetta/pUC-fdh的FDH比酶活为0.163U/mg(蛋白)。经SDS- PAGE分析,Rosetta/pET-fdh和Rosetta/pUC-fdh表达的FDH蛋白分别占菌体可溶性总蛋白的17%和10%,实现了fdh基因在Rosetta中的高效表达。研究中所构建的重组菌为氧化还原反应中的辅酶再生奠定了良好的基础。 徐娴 贾红华 何冰芳 韦萍关键词:辅酶再生 甲酸脱氢酶 一种耐重金属汞的真菌菌株及其应用 本发明公开了一株出芽短梗霉菌菌株<I>Aureobasidium pullulans </I>F134M,该菌株经分离、筛选、鉴定、诱变获得,已保藏于广东省微生物菌种保藏中心保藏,保藏编号为:GDMCC No:60070... 黄和 唐苏苏 江凌 俞亚东 徐晴 徐娴酶催化反应生产过氧乙酸的方法 本发明公开了一种酶法生产过氧乙酸的方法,本方法以短链乙酸酯和过氧化氢为底物,由乙酰木聚糖酯酶过水解催化反应生成过氧乙酸。 李霜 陶惟一 黄和 徐娴 江凌文献传递