张绍军
- 作品数：7 被引量：60H指数：4
- 供职机构：黑龙江大学更多>>
- 发文基金：黑龙江省自然科学基金国家高技术研究发展计划黑龙江省普通高校骨干教师创新能力资助计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 利用mRNA差异显示技术分离甜菜M_(14)品系特异表达基因的cDNA片段被引量：14
- 2007年
- 二倍体栽培甜菜与白花甜菜杂交、进一步回交而获得的单体附加系M14,其染色体组成中除了含有18条栽培甜菜染色体外,还附加有一条野生白花甜菜第9号染色体,该附加染色体通过母本的传递率为96.5%;单体附加系传递率如此高的原因是因为M14中有无融合生殖基因的存在。本实验采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖品系M14和正常有性生殖的二倍体栽培甜菜A2Y花蕾减数分裂时期的基因表达进行了差异分析。采用GT15A,GT15G,GT15C3种锚定引物,共筛选了20个随机引物,通过RT-PCR检测,获得了6个阳性差异表达的cDNA片段,应用NCBI的BLASTx软件对测序结果进行同源序列、相似序列检索,为进一步克隆无融合生殖基因提供侯选cDNA片段。
- 李海英马春泉于冰高传军张绍军张莹郭德栋
- 关键词：无融合生殖
- 甜菜无融合生殖系花期表达基因的差异分析被引量：6
- 2003年
- 栽培甜菜与白花甜菜杂交而获得的单体附加系M14,其传递率在95%以上,单体附加系的传递率如此高的原因可能是因为M14品种中有无融合生殖基因存在。为了寻找M14品种中无融合生殖基因,本试验在花期分别对二倍体甜菜A2Y和M14品种的花器进行取样,对它们的总RNA进行逆转录,RT-PCR反应,并对其中各种反应参数进行筛选和优化,最终建立起对它们进行mRNA差异反应的最佳体系。此体系的建立为寻找二倍体甜菜A2Y和M14品种之间的差异条带提供了一个稳定、方便的方法。同时也为以后进一步寻找到无融合生殖基因,做了一项基础而又有价值的前期工作。
- 于冰张绍军李海英王桂芝郭德栋
- 关键词：甜菜无融合生殖系
- 甜菜M14无融合生殖特异EST鉴定及全长获得
- 本文采用抑制消减杂交方法，在甜菜开花的减数分裂期取样，建立了甜菜无融合生殖系M14特异表达基因的抑制消减杂交文库，并对全部295个克隆进行了测序，共测得211个序列表达标签，用DNAMAN软件筛选可编码蛋白质的ESTs2...
- 张绍军
- 关键词：无融合生殖抑制消减杂交快速扩增CDNA末端
- 文献传递
- 用TRIzol试剂一步法提取甜菜花蕾中的总RNA被引量：25
- 2004年
- 在花期分别对无融合生殖甜菜M14品系和进行正常有性生殖的二倍体甜菜A2Y品系的花蕾进行取样,采用TRIzol试剂一步法,分别提取了它们的总RNA,并测定了总RNA的浓度及纯度。讨论去除RNA酶的方法、具体操作的注意事项和TRIzol试剂一步法与其它方法相比的优越性。该方法为进一步进行mRNA差异显示分析和抑制消减杂交研究提供了总RNA的来源,也为今后能在甜菜中寻找和克隆与无融合生殖相关的基因提供了可靠的保证。
- 于冰李海英张绍军马春泉郭德栋王桂芝
- 关键词：甜菜无融合生殖总RNA
- AFLP指纹图谱试验体系在甜菜无融合生殖系中的应用被引量：1
- 2004年
- 目的 :比较甜菜无融合生殖品系M1 4子代之间的同一性及亲缘关系 ,从而验证AFLP试验体系在甜菜无融合生殖系中的适用性。方法 :利用已建立的AFLP试验体系 ,通过琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测以及遗传距离的比较来验证这一试验体系。结果 :M1 4子代之间及二倍体甜菜之间的同一性较好 ,其亲缘关系也较近。结论 :验证了所建立的AFLP试验体系的适用性 ,同时也确证了AFLP技术在构建DNA指纹图谱中的优越性 。
- 马春泉李海英张绍军郭德栋王桂芝
- 关键词：甜菜无融合生殖AFLP同一性
- 甜菜无融合生殖系花期差异表达基因cDNA文库的构建被引量：15
- 2006年
- 为了克隆M14（M14是栽培甜菜与白花甜菜杂交产生的单体附加系,由于附加的白花甜菜第9号染色体上存在无融合生殖基因,其传递率可高达97.5%）品系中无融合生殖相关基因,应用抑制消减杂交方法,在甜菜开花的关键时期减数分裂期取样,建立了甜菜无融合生殖系M14与能够进行正常有性生殖的二倍体甜菜A2Y之间差异表达基因的cDNA文库,并对295个克隆进行了测序,共测得179个表达序列标签（Expressed Sequence Tags,ESTs）,通过对生物信息学数据库资料的查询,共得到了89个与已知基因同源的ESTs,90个新的ESTs,选择其中2个EST进行了RT-PCR鉴定,证明在M14中特异表达.以上结果为以后克隆与无融合生殖相关的全长基因打下了基础.
- 于冰李海英马春泉张绍军李荣田郭德栋
- 关键词：甜菜无融合生殖抑制消减杂交ESTS
- 甜菜无融合生殖系花期表达基因的研究
- 采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖系和正常有性生殖的二倍体甜菜花期的基因表达进行了差异分析。采用3种锚定引物,共筛选了40个随机引物,获得一些差异表达片段,对这些差异表达的片段进行克隆和测序,与GenBank数据库...
- 李海英唐艳于冰张绍军马春泉郭德栋
- 关键词：无融合生殖系克隆测序甜菜
- 文献传递
