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PKC在Ca^(2+)信号调节MPF活性中的作用: 2003年; 用Fura-2AM作为染料,用F-2000荧光分光光度计测细胞内Ca2+浓度的改变。用A23187-Ca2+载体提高细胞内Ca2+浓度,同时用PKC的特异性抑制剂calphostin C作用细胞来阻断PKC途径,观察MPF活性改变。结果表明:300nmol/L的Calphostin C可以最大限度地抑制PKC活性。Calphostin C不能影响A23187引起的细胞内Ca2+浓度的升高。A23187处理前加入300nmol/L光激活Calphostin C不能降低MPF的活性,而A23187单独却可以引起MPF的活性降低。与对照组相比,差异不显著,p<0.05。; 刘莹张杰王亚杰具英花赵昕宗志红于秉治; 关键词：细胞内钙蛋白激酶C 细胞周期

人新基因HBRP基因工程细胞系的建立被引量：1: 2004年; 在研究牛精浆蛋白 (bovineseminalplasmaproteins ,BSPproteins)及其相关蛋白在受精卵发育过程中的重要作用时 ,在人睾丸组织中发现并克隆了一个与BSP蛋白相关新基因的序列 ,其开放阅读框架 (openreadingframe ,ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有4个纤连蛋白Ⅱ型结构域 ,与BSP蛋白在结构上有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedprotein ,HBRP) ,并在GenBank注册 ,登录号为AF2 791 4。预测该蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,并已成功地将该基因定位在 1 9号染色体 1区 3带上。为进一步研究该新基因的生物学功能 ,利用重组质粒pEGFP C2 HBRP转染人胚肾HEK2 93细胞 ,通过G41 8筛选出药物抗性克隆 ,建立了稳定的基因工程细胞系 ,为该基因功能的研究奠定了基础。; 张杰刘莹惠答美宿文辉宗志红于秉治; 关键词：基因工程细胞系 19号染色体

ubiquilin3基因在小鼠组织中的表达及意义被引量：1: 2011年; 目的探讨ubiquilin3基因在小鼠心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、大肠、睾丸、卵巢、子宫等多种组织及不同周龄小鼠睾丸组织的表达及其意义。方法分别利用PCR、Western、Northern等方法,观察ubiquilin3基因在小鼠多种组织、不同周龄的小鼠睾丸组织,mRNA和蛋白水平的表达。结果在mRNA和蛋白水平上,ubiquilin3基因在其他组织中均没有表达,而在小鼠睾丸组织中特异性表达;在不同周龄的小鼠睾丸组织中,从2周龄的小鼠睾丸组织开始表达,3周表达量逐渐增加,至4周小鼠中表达量达最高,且在成熟小鼠中持续表达。结论 ubiquilin3基因在小鼠睾丸组织特异表达,在成熟小鼠中表达量达到最高值,推测其与小鼠精子生成及精子成熟过程相关。; 张杰郑慧丽闫威

蛋白激酶在NIH3T3细胞中对促成熟因子的作用被引量：3: 2005年; 目的:研究蛋白激酶C(PKC)在NIH3T3细胞中,对G2/M期的关键调节因子促成熟因子(MPF)的调控作用,检测MPF两种亚基p34cdc2和cyclinB在翻译水平的改变。方法:用aphidicolin,流式细胞仪检测细胞周期同步化。Westernblot做蛋白表达水平的检测。结果:50μmol/L的OAG使3T3细胞周期阻断在G2/M期。OAG对p34cdc2的表达没有影响,但可以使cyclinB的表达减少,对照组与处理组差异显著。结论:PKC激活剂OAG通过降低cyclinB的表达引起p34cdc2的活性改变而调节细胞周期。; 李雪松刘莹张杰于秉治; 关键词：蛋白激酶C 细胞周期

AURKB与MAPK参与调控小鼠受精卵早期发育被引量：1: 2012年; Aurora激酶是肿瘤研究领域的热点,近年来有研究表明该激酶家族在卵母细胞减数分裂中也起着重要的调节作用,但对于其在哺乳动物早期胚胎发育中的研究鲜有报道.本研究通过实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫荧光检测了Aurora激酶B(Aurora kinaseB,AURKB)在小鼠受精卵中的表达和定位,运用RNA干扰技术观察了AURKB功能缺失后对小鼠受精卵发育早期的影响,并检测丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路抑制后小鼠受精卵卵裂及AURKB表达、活性变化.结果表明,在小鼠受精卵第一次卵裂进程中,G2/M期为AURKB的稳定表达时相,其蛋白在G1/S期少量分布于细胞浆,G2期聚集于染色质周围,进入有丝分裂后分布于全细胞.AURKB的功能缺失可导致受精卵发生异常分裂.MAPK通路的抑制亦可破坏受精卵的正常卵裂,并下调AURKB的蛋白表达及活性.结果提示,Aurora激酶B是小鼠受精卵早期发育所必需的,并与MAPK通路的激活相关.; 许琳刘彤韩峰宗志红王国丽于秉治张杰; 关键词：丝裂原激活蛋白激酶小鼠受精卵早期发育有丝分裂

生物化学理论课程PBL模式的教学实践被引量：16: 2005年; 为适应当前以实践能力和创新能力为核心的素质教育的要求,中国医科大学生物化学与分子生物学教研室于2004学年下半年在2003级五年制临床医学专业进行了小规模、阶段性的以问题为基础学习模式的教学实践。结果表明,这一教学模式在提高学生自学能力和知识运用能力上有积极的促进作用。; 于爱鸣张杰刘莹邢伟魏金荣孙黎光关一夫; 关键词：生物化学 PBL 教学模式

人新的精子结合蛋白HBRP新功能的研究被引量：2: 2004年; 目的:探讨新发现的人睾丸组织中与精浆蛋白BSP相关的新基因的生物学功能。方法:利用真核重组表达质粒pcDNA3/HBRP转染人胚肾HEK293细胞,建立稳定的真核表达细胞系,并用放射自显影检测该细胞系的PKC活性。结果:HBRP蛋白对PKC活性有明显的抑制作用。结论:确定了人新的精子结合蛋白HBRP的功能之一是抑制PKC活性。; 张杰刘莹宗志宏惠答美刘奕于秉治; 关键词：HBRP 真核表达 PKC活性

人新的蛋白激酶抑制剂HBRP功能的研究: 目的:研究新基因HBRP(Human BSP-Related Protein)的生物学功能。我们从人精子中纯化了一个PKC(protein kinase C)的抑制剂,但经测序发现与BSP(bovine seminal ...; 张杰刘莹宗志宏惠答美刘奕于秉治; 关键词：HBRP 抑制剂 PKC活性; 文献传递

重组人睾丸精子结合蛋白对人精子蛋白激酶A及蛋白激酶C活性的影响: 2008年; 为探讨人睾丸精子结合蛋白(human testis sperm binding protein,hTSBP)促进人精子获能的分子机制,检测了重组hTSBP对人精子蛋白激酶A(PKA)和蛋白激酶C(PKC)活性的影响。用重组载体pcDNA3.1/myc-His(-)B-tsbp转染真核细胞后,金属亲和层析纯化表达的重组蛋白质His6-TSBP;重组蛋白质处理健康成人精子后,分别提取精子胞浆及胞膜蛋白组分,发现重组蛋白质可以与精子胞膜结合;经放射自显影检测,发现0.1mg/ml重组蛋白质可以提高人精子中PKA的活性,对精子膜PKC活性无显著影响。; 宿文辉王国丽张杰金博冯晨张哲徐小燕于秉治; 关键词：精子功能蛋白激酶A 蛋白激酶C

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张杰