张敬友 作品数:56 被引量:74 H指数:4 供职机构: 江苏出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 江苏省教育厅指导性计划项目 江苏省高校自然科学研究项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 自动化与计算机技术 医药卫生 更多>>
太湖藻类分布及其对鱼类的毒性试验 被引量:4 2013年 对太湖9个水域藻类进行监测,结果表明,藻类平均密度在52万~2 660万个/L之间,梅梁湖最高,东部沿岸区最低;1月藻类在太湖地区分布最少,8月最多;蓝藻分布了39.7%,绿藻25.3%,隐藻16.9%,硅藻15.5%,祼藻及其他门类2.6%。微囊藻藻体冻融上清液用生理盐水稀释到1∶10时仍可使草鱼红细胞出现凝集现象,对照不凝聚。在腹腔注射藻细胞冻融液4 h后,草鱼出现死亡现象,其半数致死剂量为380 mg/kg,二次注射6 h后的半数致死剂量为180 mg/kg;腹腔注射的草鱼中毒症状为:游动迟缓、鳞片松散脱落,然后逐渐死亡。解剖后发现肝脏充血肿大,绿色胆汁外流,肝切片后发现细胞浸润,肝细胞分隔成网状,并变性坏死;肾脏淤血凝固,细胞变形。全藻体细胞对乌鳢灌胃毒性试验结果显示,乌鳢起初未见明显的体表症状,但肝脏略有肿大、充血并伴有出血点,以300 mg/kg剂量灌胃,48 h时乌鳢的死亡率为20%。 周毅 石建华 钱伟 沈振华 姚燕林 孟祥龙 徐晔 范广宇 王海涛 张敬友 王维志 段宏安关键词:太湖 藻类毒素 血凝试验 腹腔注射 毒理试验 恩诺沙星在中华绒螯蟹体内的衰减研究 被引量:6 2011年 采用超高效液相色谱—串联质谱法,研究了不同养殖条件下恩诺沙星在中华绒螯蟹体内的残留消除规律。试验结果表明,休药25 d后,各组试验蟹体内恩诺沙星的残留均低于日本规定的残留限量标准(10μg/kg),太湖开放型水域中试验蟹体内恩诺沙星的残留低于仪器的检测限;各组试验蟹体内恩诺沙星残留衰减消除速率总体表现为,室外开放水域中的消除速率快于室内条件;28℃条件下消除速率快于22℃;Ⅴ期幼蟹的衰减消除速率快于扣蟹。 黄金田 熊勇君 吴林坤 郑浩 钱伟 丁涛 张敬友 柯家法 张扬 吕富关键词:恩诺沙星 中华绒螯蟹 超高效液相色谱-串联质谱法 牛常见病毒性传染病定性及定量PCR检测方法研究及试剂盒研制 段宏安 张睿 唐泰山 周毅 赵秀玲 吴玉石 张常印 张敬友 姚燕林 徐晔 简要技术说明:(1)建立了牛地方流行性白血病病毒、牛传染性鼻气管炎病毒(BHV1)、牛病毒性腹泻粘膜病毒和赤羽病病毒各种病毒单一的PCR检测方法,分别扩增BLV gp51基因341bp的片段、BHV1 gB基因478bp...关键词:关键词:PCR检测 病毒 产毒微囊藻PCR检测方法的建立 2013年 [目的]建立产毒微囊藻的PCR检测方法。[方法]根据GenBank上发表的mcyA基因序列保守区域设计一对引物,建立和优化检测产毒微囊藻的PCR方法,并以此方法检测产毒和非产毒微囊藻参考株系。[结果]经PCR检测,产毒藻株出现特异性扩增条带,而不产毒株未出现特异性条带;以10倍系列稀释纯培养的蓝藻细胞作为PCR反应的模板,检测限均为2.46×103细胞/ml;运用建立的方法从天然水体中检测到了产毒微囊藻,对PCR产物序列进行比对,发现PCR扩增片段与铜绿微囊藻(PCC7806)核苷酸序列的同源性为98%。[结论]该研究为水华产毒微囊藻的监测提供了一种新方法。 周毅 徐晔 钱伟 姚燕林 王海涛 张敬友 王维志 段宏安关键词:产毒微囊藻 PCR 同源性 美洲陆生动物狂犬病防控管理进展研究 分别概述美洲不同区域陆生动物狂犬病流行史和现状,据资料追溯不同国家或地区采取的各种狂犬病防控措施及其进展情况,进而比较研究这些措施的适用范围、防控效果和优缺点。总体来说非免疫措施技术要求低、直观,但成本高、效果差、适用范... 宋阳威 王水明 张敬友 吴亚力 李超美 柯家法 艾峰文献传递 猴痘病毒的PCR快速检测试剂盒及检测方法 本发明涉及一种猴痘病毒的PCR快速检测试剂盒及其检测方法,包括试剂A、B、PCR试剂管、TaqDNA聚合酶、含有猴痘病毒特异的F3L基因片断的pUC57质粒的阳性对照和灭菌的双蒸水阴性对照组成的试剂盒。采用简单快速敏感的... 陈国强 张敬友 蒋原 张常印 姜焱 唐泰山 朱娜 范红结文献传递 马西尼罗热病毒E蛋白部分基因在大肠杆菌中的表达 被引量:1 2007年 参考GenBank发表的西尼罗病毒(west nile virus,WNV)的E蛋白基因序列,自行设计合成一对引物,利用RT-PCR扩增出了WMV E基因318bp片段,将其克隆入pMD18-T-Vector载体中,阳性克隆命名pMD-E,并进行序列分析。进一步亚克隆入表达载体pET-32a(+)。重组质粒pET32a-E转化BL21(DE3)感受态细胞中表达,表达产物经SDS-PAGE可检测到分子量约为32kD的目的蛋白带,经薄层扫描分析,目的蛋白占菌体总蛋白的33.1%。表达产物纯化后,Wester-blotting分析证明表达产物能被WNV的阳性血清所识别,为下一步建立以表达产物为包被抗原建立检测马的WNV的ELISA方法打下了基础。 姜焱 侯玉峰 张常印 王凯民 张敬友 唐泰山 陈国强 陈溥言 张鹤晓美洲陆生动物狂犬病防控管理进展研究 通过分别概述美洲不同区域陆生动物狂犬病流行史和现状,据资料追溯不同国家或地区采取的各种狂犬病防控措施及其进展情况,进而比较研究这些措施的适用范围、防控效果和优缺点。总体来说非免疫措施技术要求低、直观,但成本高、效果差、适... 宋阳威 王水明 张敬友 吴亚力 李超美 柯家法 艾峰关键词:狂犬病 陆生动物 防控措施 文献传递 猴痘病毒PCR检测方法的建立 被引量:3 2011年 从GenBank上调取猴痘病毒的基因序列,经过分析,找出了猴痘病毒的特异性靶基因序列F3L片段,人工合成猴痘病毒MPV(AF380138)F3L基因片段(48048-48509bp)并插入质粒,作为病毒检测的模拟阳性模板。根据该序列设计并合成PCR引物,对模拟的阳性模板进行扩增,结果能扩增出与目的片段大小一致的条带。建立了PCR检测方法,经条件优化后,对鸡痘、禽痘、羊痘等14种相似病毒核酸进行PCR扩增,发现具有良好的特异性。PCR方法能扩增出0.3pg的阳性模板,显示建立的PCR方法具有高效、快速、特异、灵敏的特点,可用于口岸猴痘病毒的检疫。 张睿 陈国强 张敬友 朱娜 蒋原 姜焱 唐泰山关键词:猴痘病毒 PCR 特异性 敏感性 猪链球菌2型溶血素基因的检测 被引量:3 2006年 根据GenBank发表的猪链球菌2型(SS2)溶血素基因(sly)全序列,利用O ligo(7.0)软件设计并合成了可扩增长度为495 bp的引物,从SS2参考菌株ATCC43765和SS2江苏分离株HA9801中扩增出495 bp的条带,利用HindⅢ限制性内切酶对具有相应单一酶切位点的PCR扩增产物进行酶切,获得预期的314 bp和181 bp的2个DNA片段,检测灵敏度达到2.5×102CFU.mL-1;但不能从马链球菌兽疫亚种ATCC35246、大肠埃希氏菌ATCC25922、单增李斯特杆菌ATCC19115/413、金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212中扩增出相应的条带。PCR扩增产物的测序结果与GenBank的猪链球菌sly基因(Z36907)核苷酸序列完全一致。该方法可快速、敏感、特异地检测SS2的溶血素基因。 陈国强 唐泰山 邓碧华 张敬友 张常印 陆承平关键词:猪链球菌2型 溶血素基因 PCR检测