张庆国
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：复旦大学附属华山医院运动医学与关节镜外科更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Smad4基因siRNA干扰对小鼠骨骼肌急性钝挫伤愈合的影响被引量：4
- 2012年
- 目的:了解以慢病毒为载体的Smad4 siRNA转染小鼠急性钝挫伤骨骼肌的转染效率以及抑制骨骼肌纤维化、减轻疤痕生成、促进骨骼肌损伤修复的能力。方法:用自制打击装置将54只雌性C57bl小鼠(体重20～25g)右侧腓肠肌中段造成急性钝挫伤模型,随机分为①PBS对照组、②Smad4siRNA注射组、③scrambled siRNA注射组三组,每组18只。小鼠急性钝挫伤伤后10 d,分别在三组损伤部位注射PBS、Smad4 siRNA、scrambled siRNA各0.1 ml。分别于伤后第28 d处死各组小鼠取材,荧光显微镜下观察局部绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)表达,在损伤部位取材骨骼肌组织行Real Time-PCR和Western blot方法检测Smad4基因和蛋白表达,Masson染色以及Vi-mentin免疫组化检测各组小鼠急性钝挫伤后腓肠肌局部纤维化及疤痕生成情况,生理学方法检测各组小鼠骨骼肌强直收缩和快速颤搐收缩能力,了解小鼠损伤骨骼肌愈合情况。结果:①scrambledsiRNA注射组和Smad4 siRNA注射组小鼠损伤骨骼肌部位均可检测到GFP表达,Smad4 siRNA注射组肝脏组织内并未检测到GFP表达;②Smad4 siRNA注射组损伤部位骨骼肌Smad4基因和蛋白表达明显降低;③Smad4 siRNA注射组骨骼肌疤痕生成以及vimentin表达明显低于scrambled siRNA注射组和PBS对照组;④Smad4 siRNA注射组小鼠腓肠肌强直收缩和快速颤搐收缩明显高于PBS对照组和scrambled siRNA注射组。结论:以慢病毒为载体的Smad4 siRNA可成功转染小鼠急性钝挫伤骨骼肌,并长期发挥抑制Smad4基因及蛋白表达的作用,并抑制骨骼肌损伤后纤维化,减轻疤痕生成,改善骨骼肌损伤后的愈合质量,促进骨骼肌损伤修复。
- 李宏云陈疾忤陈世益陈始秋张庆国
- 关键词：骨骼肌钝挫伤SIRNA
- γ干扰素对小鼠骨骼肌钝挫伤后转化生长因子-β-Smad信号通路表达的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察γ干扰素（IFN-γ）局部注射对小鼠骨骼肌钝挫伤后纤维化以及转化生长因子-β（TGF—B）-Smad信号通路表达的影响。方法将30只成年雌性C57bl小鼠随机分为正常组（A组）、磷酸盐缓冲液（PBS）注射组（B组）和hIFN-γ注射组（C组），每组10只。B、C组采用50g钢球于30cm高度下砸的方法造成双侧腓肠肌钝挫伤，分别于伤后1、2、3周局部皮下注射0．1ml PBS或hIFN-γ,A组不行任何处理；4周后取双侧腓肠肌检测。以Masson染色后计算胶原纤维面积评估骨骼肌纤维化程度，Western blot检测TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达水平。结果Masson染色显示B组胶原面积最大为（14074．0±15．2）μm^2（P〈0．05），C组为（4019．0±13．4）μm^2高于A组（1741．0±10．1）μm^2（P〈0．05）；TGF-β1在B、C组表达增高（P〈0．05），但两组之间表达差异无统计学意义（P〉0．05）；3组间Smad4、7的表达差异无统计学意义（P〉0．05）；Smad2、3及其磷酸化蛋白在B、C组表达升高（P〈0．05），其中磷酸化的Smad2、3在C组较B组表达明显降低（P〈0．05）。结论局部注射hIFN-γ,未发现影响TGF-β1的表达，但能够有效降低Smad2、3磷酸化蛋白的表达，可能是其抑制损伤骨骼肌纤维化的作用机制。
- 张庆国陈疾忤陈世益李宏云陈始秋张健蒋佳
- 关键词：Γ干扰素骨骼肌转化生长因子-Β1
