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张俊斌
作品数:
1
被引量:4
H指数:1
供职机构:
中山大学附属第一医院
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发文基金:
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
陈鹏
中山大学附属第一医院
王深明
中山大学附属第一医院
王劲松
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崔进
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张俊斌
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陈鹏
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中华医学杂志
年份
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2012
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年轻与老年小鼠血管内皮细胞microRNA的差异表达
被引量:4
2012年
目的观察年轻与老年小鼠血管内皮细胞(EC)microRNA(miRNA)表达差异及意义。方法原代分离并培养雄性C57BL/6J小鼠年轻和老年EC,免疫组化Ⅷ因子染色对EC进行鉴定,体外比较年轻和老年EC增殖速度,采用miRNA基因芯片分析年轻与老年EC内miRNA表达差异谱,荧光定量PCR(qRT.PCR)进行验证。免疫印迹(Westernblot)检测EC内皮细胞型一氧化氮合成酶(eNOS)表达。结果免疫组化Ⅷ因子染色证实原代分离的细胞为EC;在0.5%、1%、5%、10%、20%血清浓度下,MrITr比色法测得年轻EC的吸光度值(A值)分别为0.260±0.006、0.350±0.011、0.404±0.027、0.519±O.034、0.590±0.040;老年EC的A值分别为0.360±O.011、0.480±0.019、0.532±0.025、0.641±0.036、0.710±0.038,发现老年EC增殖速度比年轻EC快(P〈0.05);排除性别差异,经miRNA基因芯片,qRT—PCR证实miR一135a、miR-182、miR-96、miR-31、miR-126-3p和miR·362-5p在年轻EC表达上调(表达差异倍数分别为34.54±1.8、5.44±1、12.8±1、3.1±0.6和14.5±1.1),miR-335—3p和miR-335—5p在老年EC表达上调,表达差异倍数分别为3.3±0.6和2.1±0.3;其中,老年EC内miR-335-3p的上调,年轻EC内miR-135a,miR-96上调可能与老年EC内eNOS表达降低相关。结论随年龄增长,EC的miRNA发生变化,调节EC内的基因表达,与衰老相关。
张俊斌
朱小南
崔进
陈鹏
王深明
王劲松
关键词:
老年
血管内皮细胞
MICRORNA
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