张京宣 作品数:27 被引量:30 H指数:3 供职机构: 山东出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 国家质检总局科技计划项目 博士科研启动基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 轻工技术与工程 生物学 更多>>
一种检测番茄斑萎病毒的方法 本发明公开了一种焦磷酸测序技术检测番茄斑萎病毒的方法,先依据番茄斑萎病毒N基因设计特异性引物及焦磷酸测序引物;再提取待测样品的核糖核酸,然后分别以N基因的特异性引物进行聚合酶链式反应扩增;用琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行检... 吴兴海 陈长法 封立平 魏晓棠 冯黎霞 张京宣 王简文献传递 梨泡状溃疡类病毒分子标准样品及其制备方法 本发明提供一种梨泡状溃疡类病毒分子标准样品及其制备方法,具体包括PBCVd的原料选取、标准样品的制备、均匀性和稳定性检查、定性检定、定值等过程。所述标准样品的制备方法包括:由PBCVd病毒液中提取病毒RNA、RT‑PCR... 张成标 吴兴海 王振华 孙敏 历艳 张京宣 宋涛 王英超文献传递 双引物探针RT-Realtime PCR检测马铃薯A病毒 被引量:2 2012年 马铃薯A病毒(Potato virus A,PVA)是我国重要的检疫性有害生物。本研究根据PVA中CP基因(coat protein gene)的保守序列,设计了两套PCR引物和TaqMan探针,建立了双引物探针RT-RealtimePCR检测PVA的方法。该方法采用实时荧光PCR技术,有效地提高了检测的灵敏度;同时两套引物探针相互验证,有效提高了结果的准确性。实验结果表明,本方法准确、灵敏、简便、快速,检出低限可达0.5fg/μL植物总RNA。 张京宣 梁炜 耿金培 陈洪俊 杨益娥 粟智平关键词:马铃薯A病毒 CP基因 PCR 旅邮检口岸截获杂草疫情分析及防控 被引量:1 2017年 目的研究旅邮检口岸截获杂草的疫情现状,探讨防控杂草疫情扩散传播的有效措施。方法统计2011~2015年旅邮检口岸截获杂草的种属类别、频次高低以及来源分布地区和年度截获量的数据信息,分析杂草疫情风险。结果部分体积小、重量轻、带附属结构的杂草种类较易扩散传播,这些入侵的外来杂草能够对生态环境及农业安全生产带来危害。杂草来源地区分布较广,但来源于周边国家和地区的频次较高,年度截获杂草总量呈现逐年递增的趋势。结论旅邮检口岸通过引入先进的智能检测设备并且提升查验人员的专业素质,可以有效减少外来入侵杂草通过口岸入境的数量;通过加强法制宣传结合行政处罚的方式能够有效控制人为因素造成的疫情传播。这些措施能够防止疫情通过旅邮检口岸扩散传播到国内。 李瑞 厉艳 齐振华 张京宣 王英超 邵秀玲 伏建国 于文涛关键词:截获 基于HDA的超级细菌耐药基因NDM-1检测方法的建立 被引量:3 2011年 本研究以建立解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法为目的,选择三种超级细菌NDM-1基因(metallo-beta-lactamase 1 gene)为目的基因,设计并合成特异性引物,建立和优化了可快速检测该种基因的HDA检测方法。特异性和灵敏度检测结果表明:该方法对NDM-1基因检测具有特异性,最低检测限可达10fg/μL,灵敏度高于普通PCR。提示HDA是一种针对NDM-1的快速、灵敏、便捷的非PCR核酸扩增技术。 梁炜 张京宣 张云霞 魏晓棠 杨伟克 林黎明 曹际娟关键词:超级细菌 霍乱弧菌SDA-琼脂糖凝胶电泳检测技术研究 被引量:3 2011年 选取霍乱弧菌ompW基因片段,设计链置换扩增(strand displacement amplification)特异性引物,建立霍乱弧菌SDA快速检测方法,同时对设计的引物的灵敏度、特异性进行研究,结果发现所建立的SDA检测技术对霍乱弧菌的检测灵敏度达到7.0×102cfu/mL,特异性检测发现,SDA技术可以特意性地扩增霍乱弧菌。 梁炜 尼秀媚 雷质文 魏晓棠 张京宣 姜英辉 吴兴海 宋涛关键词:霍乱弧菌 SDA 进境多肉植物细菌性褐腐病的病原分离与鉴定 被引量:6 2017年 目的通过对病变叶片进行细菌的分离鉴定,明确韩国进境多肉植物上叶片褐色腐烂病斑的病原。方法采用组织分离法,从韩国进境多肉植物叶片中分离纯化到1株细菌菌株,对该菌株进行了鉴定和生物学特性研究。结果形态及培养特征、生理生化特性的研究结果表明该菌株在营养琼脂(nutrient agar,NA)培养基上单菌落圆形淡黄色,边缘整齐。菌体直杆状,周生鞭毛运动,无芽孢,为革兰氏阴性菌。经形态鉴定、培养特征、生理生化、致病性测定及16S rDNA序列分析,确认引起该多肉植物发生褐腐病的病原是菠萝泛菌(Pantoea ananatis)。结论经过对发生细菌性褐腐病的叶片进行病原分离与鉴定,有效阻止了菠萝泛菌的远距离传播。 厉艳 王英超 宋涛 张京宣 邵秀玲 王晓素关键词:多肉植物 病原鉴定 跨境植物病原精准检测体系的建立与应用 邵秀玲 厉艳 吴兴海 牟海青 封立平 张京宣 孔德英 粟智平 路延笃 甘琴华 王英超 该项目属于农业科学中的植物检疫领域。 生物入侵是全球关注的重大问题,中国也深受其害,美国因入侵生物造成经济损失每年达1500亿美元,中国每年损失约2000亿元人民币,约占国民生产总值的1.5%。准确、快速检出高风险植物病...关键词:关键词:植物病毒 植物检疫 肠炎沙门氏菌的链置换恒温扩增(SDA)快速检测试剂盒及其检测方法 本发明涉及一种用依赖于链置换扩增技术的肠炎沙门氏菌恒温扩增快速检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒内有模板预处理反应液、链置换扩增反应液Ⅰ、Bst DNA Polymerase,BsoBI。检测肠炎沙门氏菌的方法包括细菌DN... 张京宣 彭青 魏晓棠 李美芹 宋涛 尼秀媚 雷质文 李伟涛 毕建秀 张健文献传递 基于AFLP方法对不同地理种群棉褐带卷蛾遗传分化的研究 被引量:1 2013年 利用3对AFLP引物对我国棉褐带卷蛾4个地理种群进行了遗传分化研究。共扩增得到224个DNA条带,其中多态条带195个;遗传多样性分析表明各群体均具有较高的遗传多样性水平,Nei遗传多样性指数为0.1425~0.1578,Shannon多样性指数为0.2137~0.2383。群体间的遗传分化系数(Gst)和基因流(Nm)分析结果表明,北方的苹小卷叶蛾与南方茶小卷叶蛾之间产生了明显的遗传分化,而北方的苹小卷叶蛾不同种群间则存在着大量的基因交流,遗传分化程度很弱。AMOVA分析结果显示66.81%的变异来源于种群内。UMAGA聚类分析表明,北京种群、陕西种群和山东种群间遗传距离较小,聚在一起为一分支,福建的茶小卷蛾单独为一分支。推测棉褐带卷蛾种群间的遗传分化与寄主有关联,与地理距离不相关。 魏晓棠 张成标 张京宣 尼秀媚 胡东青 宋涛关键词:AFLP 遗传分化 地理种群