孙铂光
- 作品数:18 被引量:22H指数:3
- 供职机构:中国科学院海洋研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 一种海豚链球菌DNA疫苗及其应用
- 本发明涉及免疫学领域,具体的说是一种海豚链球菌DNA疫苗及其应用。海豚链球菌DNA疫苗为pCNSiE。本发明的疫苗对海豚链球菌的免疫保护效率达95%本发明的疫苗在免疫后两个月内的免疫保护效率没有明显减弱。
- 孙黎孙云孙铂光
- 文献传递
- 坎氏弧菌热不稳定溶血素基因的克隆表达、蛋白纯化及其活性被引量:5
- 2010年
- 坎氏弧菌(Vibrio campbellii)是水产养殖动物的重要致病菌。本研究构建了坎氏弧菌热不稳定溶血素(TLH)基因的重组表达质粒pET26b(+)/tlh,并转入大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达带有6个组氨酸的TLH融合蛋白,然后利用Ni琼脂糖亲和层析柱进行纯化。SDS-PAGE分析显示,该溶血素能够大量表达,分子量约为42kD。纯化的TLH(0.41mg/mL)具有较强的溶血活性(溶血圈直径为16mm)及磷脂酶活性(晕圈直径为15mm)。其溶血活力的最适温度为37℃,在75℃下培养30min即丧失活力;最适pH为6,pH大于或小于6时都会导致其稳定性下降;一价金属离子如Na+、K+对溶血活性几乎没有影响,而部分二价金属离子如Ca2+、Co2+会导致溶血活性降低。本研究结果对阐明坎氏弧菌的致病机理及基因工程疫苗开发有重要意义。
- 孙婧孙铂光贾爱荣张晓华
- 关键词:溶血素蛋白纯化溶血活性
- 一种含有未甲基化CpG的DNA序列(CpG-DNA)及其应用
- 本发明涉及免疫学领域,具体的说是一种在牙鲆中具有免疫刺激效应的含有未甲基化CpG的DNA序列及其在抗病毒中的应用。含有未甲基化CpG的DNA序列(CpG-DNA)为牙鲆中具有免疫刺激效应的CpG-DNA序列,由序列表SE...
- 孙黎周志侠孙铂光
- 文献传递
- 海水鱼类主要病原菌的致病性及其环境适应机制
- 张晓华陈吉祥于敏孙铂光杨慧
- 该项目所属学科为水产生物病害与控制.病害频发已成为中国海水养殖业可持续发展的主要瓶颈,其中以细菌性病害最为严重.迫切需要寻找环境友好型病害防治技术,这就要求对病害发生机制有深入了解.项目组围绕海水养殖鱼类主要病原菌的流行...
- 关键词:
- 关键词:海水养殖病原菌病害防治
- 哈氏弧菌外膜蛋白及其应用
- 本发明涉及疫苗学领域,具体的说是两种哈氏弧菌外膜蛋白及其应用。外膜蛋白为序列表SEQ ID No.1和No.2中的氨基酸序列所示。具体为以哈氏弧菌T4为模板,分别以173F/173R和214F/214R为引物分别PCR扩...
- 孙黎于兰萍孙铂光胡永华
- 文献传递
- 哈维氏弧菌溶血素基因vhhA在大肠杆菌中的表达及活性研究被引量:9
- 2007年
- 哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)是水产养殖动物(鱼、虾)的重要致病菌。已发现哈维氏弧菌对鱼类的致病性与其分泌的胞外产物中的溶血素相关,致病力最强的菌株VIB 645有2个碱基序列非常相似的溶血素基因,vhhA和vhhB。本研究将vhhA克隆于pET-24d(+)表达质粒,VHH溶血素蛋白作为1种带6组氨酸的融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了过量表达。重组菌在鱼血平板上表现出很强的溶血活性,并且在卵磷脂平板上表现出磷脂酶活性。SDS-PAGE分析表明,表达蛋白的分子量约为43 kDa。在17,25和37℃时重组的VHH溶血素蛋白都能得到很好的表达,达到最大表达量的时间分别为9,6和3 h。在25℃进行诱导时,分泌到上清液中的表达蛋白的量最多。
- 钟英斌张晓华陈吉祥孙铂光李筠
- 关键词:哈维氏弧菌融合蛋白溶血活性
- 一种迟缓爱德华氏菌蛋白酶的免疫应用
- 本发明涉及分子疫苗学领域,具体的说是一种迟缓爱德华氏菌蛋白酶的免疫应用。以迟缓爱德华氏菌TX1为模板,采用F1/R1为引物进行PCR扩增,PCR产物与载体pET259连接,获得质粒pETArl,转化大肠杆菌BL21(DE...
- 孙黎周泽军孙铂光迟恒
- 文献传递
- 哈维氏弧菌VHH溶血素作用机理的研究
- 随着水产养殖业近年来的迅速发展,海水养殖动物的细菌性病害造成了巨大的经济损失。由弧菌属细菌/(Vibrio spp./)引起的弧菌病/(Vibriosis/)是在世界各地鱼、虾、贝类等海水养殖动物中普遍流行、危害最大的细...
- 孙铂光
- 关键词:哈维氏弧菌
- 文献传递
- 一种含有未甲基化CpG的DNA序列(CpG-DNA)及其应用
- 本发明涉及免疫学领域,具体的说是一种在牙鲆中具有免疫刺激效应的含有未甲基化CpG的DNA序列及其在抗病毒中的应用。含有未甲基化CpG的DNA序列(CpG-DNA)为牙鲆中具有免疫刺激效应的CpG-DNA序列,由序列表SE...
- 孙黎周志侠孙铂光
- 文献传递
- 不同海洋弧菌中5类溶血素基因的分布及其与溶血活性和磷脂酶活性的相关性被引量:6
- 2007年
- 用57株海洋弧菌,包括26株弧菌标准菌株、20株哈维氏弧菌、11株副溶血弧菌(从不同宿主和不同地理环境中分离得到),用PCR法合成5类相应的地高辛标记的溶血素基因探针,利用其进行Southern Blot,检测这5类溶血素基因在57株弧菌中的分布。结果显示,在57海洋株弧菌中,含有TDH、HlyA、TLH、δ-VPH和HLX溶血素基因的菌株分别为2株、2株、49株、3株和30株。另外,1株霍氏格里蒙菌(Grimontia hollisae)和1株副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)中分别含有2个TDH溶血素基因。用鱼血平板和卵磷脂平板检测57株弧菌的溶血活性和磷脂酶活性,结果表明,弧菌溶血活性和磷脂酶活性与TLH溶血素基因具有显著相关性,与另外4类溶血素基因的关系不明显。
- 王淑娴张晓华孙铂光陈吉祥
- 关键词:弧菌溶血素基因溶血活性