孙智慧
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：浙江大学医学院附属第一医院更多>>
- 发文基金：浙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 感觉神经TRPV1受体在心肌缺血和血压调节中的作用及其机理探讨
- 郑良荣王利宏姚磊韩杰朱建华邱原刚夏淑东陈君柱胡晓晟孙智慧
- 冠心病、高血压是现代社会的常见病、多发病，严重危害人类的健康。该课题针对感觉神经末梢瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)在心肌缺血保护、血管舒张调节中的作用及其相关机制进行研究，采用基因敲除、心肌缺血再灌注、糖尿病神经...
- 关键词：
- 关键词：冠心病高血压
- 小鼠降钙素基因相关肽基因重组腺病毒载体的构建及其在心肌细胞的表达
- 2010年
- 目的:利用AdEasy腺病毒载体系统,构建小鼠降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因重组腺病毒载体,并验证其在心肌细胞中的表达。方法:采用RT-PCR方法扩增出含有小鼠CGRP全长cDNA的基因片段,并将其插入PUC57载体,经EcoRⅤ和SalⅠ双酶切,将小鼠CGRP基因亚克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV,形成重组质粒pShuttle-CMV-CGRP。经Pm eⅠ酶切线性化后,在大肠杆菌BJ5183中与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1同源重组产生重组腺病毒质粒AdEasy-pShuttle-CGRP。重组腺病毒质粒在XL-Gold细胞中扩增,经PacⅠ酶切线性化后,转染人胚肾293细胞进行重组腺病毒的包装,并经氯化铯纯化得到重组腺病毒AdEasy-pShuttle-CGRP。用纯化后的重组腺病毒转染原代培养的乳鼠心肌细胞,荧光显微镜下观察转染效果。通过尾静脉导入重组腺病毒7 d后,放免法测定心肌中CGRP的表达量。结果:测序证实PUC57-CGRP重组质粒中含有小鼠CGRP基因的cDNA;重组穿梭质粒pShuttle-CMV-CGRP经双酶切鉴定后可见约7.5 kb和423 bp片段;重组腺病毒质粒AdEasy-pShuttle-CGRP经PacⅠ酶切可见长约3kb与30 kb DNA片断。转染293细胞进行包装,7 d后细胞出现病变效应,回收病毒重复感染293细胞,在荧光显微镜下可见绿色荧光蛋白表达。提取病变293细胞中重组腺病毒进行目的基因的PCR鉴定为阳性。构建好的重组腺病毒经纯化后具有很高的滴度,并且成功转染了原代培养的乳鼠心肌细胞。通过放免法证实,该载体可以显著增加小鼠心脏中CGRP的表达。结论:成功构建携带CGRP基因的重组腺病毒载体,该重组腺病毒载体AV-CGRP可以显著增加心脏中CGRP的表达量,为进一步研究CGRP基因治疗奠定了基础。
- 孙智慧韩杰邵蕾王利宏宋俊贤魏钟海郑良荣
- 关键词：降钙素基因相关肽基因疗法
- 辣椒素敏感感觉神经与血压调控的关系被引量：2
- 2009年
- 孙智慧郑良荣
- 关键词：高血压血压调控
- 辣椒素敏感感觉神经与血压调控的关系
- 目的探讨辣椒素敏感感觉神经(CSPAN)与心血管系统稳态调节的关系。方法通过免疫细胞化学技术发现肾脏和血管系统分布有感觉神经纤维,提示这些感觉神经可能参与心血管系统稳态的调节。结果通过在一些盐诱导的高血压模型研究发现,C...
- 孙智慧郑良荣
- 关键词：血压调控高血压
- 文献传递
- 转录因子在心肌肥大中的调控作用被引量：1
- 2009年
- 虽然近年来对心力衰竭的治疗有了很大的进步,但其病死率、致残率仍然很高。心肌重构是心力衰竭发展的一个重要病理机制,目前认为抑制心肌重构是预防和治疗心力衰竭的重要手段,而心肌细胞肥大是心力衰竭发展过程中心肌重构的一个主要特征之一。大量研究表明心肌细胞转录因子在心肌细胞肥大过程中起重要调控作用,一些心肌细胞转录因子在受到肥大刺激信号作用后能够被激活并且在心肌肥大过程中起重要作用。该文对几种转录因子在心肌细胞肥大过程中的最新研究状况作一简单介绍。
- 白宝宝孙智慧陶谦民
- 关键词：心肌肥大转录因子信号转导
- 瞬时受体电位通道与心律失常的关系被引量：2
- 2010年
- 瞬时受体电位通道(TRP)超家族组成超过50种阳离子通道,分布在几乎所有心血管组织中,可以整合多种物理和化学的刺激诱导Ca2+进入胞内。TRP通道家族对心脏节律的维持起着关键作用:TRPC可能通过钙池操纵Ca2+通道参与起搏调控;肥厚心肌中TRPM4表达上调,通过瞬时性内向电流(Iti)参与延迟后除极的发生;TR-PC1和TRPC6参与牵张诱发性心律失常的发生;在缺血缺氧的病理条件下,ATP/UTP的释放激活TRPC3/7引发心电异常。将来有望通过干预TRP活性来开发新一代的抗心律失常药物。
- 孙智慧郑良荣
- 关键词：心血管病学瞬时受体电位通道心律失常
- 转录因子在心肌肥大中的调控作用
- 心力衰竭是许多心脏疾病最后共同的去向。虽然近年来对心力衰竭的治疗有了很大的进步,但是仍然不令人满意,其导致的病死率、致残率仍然较高。心肌重构是心力衰竭发展的一个重要病理机制,目前认为抑制心肌重构是预防和治疗心力衰竭的重要...
- 白宝宝孙智慧陶谦民
- 关键词：心肌肥大转录因子信号转导
- 文献传递
- 基因治疗在心肌缺血再灌注损伤中的研究进展被引量：2
- 2009年
- 通过溶栓和经皮冠状动脉血管成形术达到再灌注是即将发生急性心肌梗死的标准处理措施。尽管缺血区的血流复灌对心肌的挽救具有重要意义,再灌注本身可能导致缺血损伤基础上的进一步心肌损伤。目前对心肌缺血再灌注损伤分子和细胞机制的更深理解以及心血管系统基因操作工具的利用,为基因治疗提供了可能性。为了提高人类血管基因治疗的有效性和安全性,对基因转导臷体,基因递送技术和有效治疗基因的鉴定等方面的基础研究是非常必要的。
- 孙智慧郑良荣
- 关键词：缺血再灌注损伤基因治疗心肌保护
