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细菌通气培养与取样装置的改进: 2010年; 针对细菌在通气培养与取样过程中存在的不方便、不灵活、易污染等问题,提出了改进办法,并自主设计了一套既可用于单独培养或取样,也可同时用于培养与取样的实验装置,并对此装置的特征以及优点进行了阐述。实践表明,该装置的研制不仅能使学生从微生物学常规的经典实验中建立创新意识,而且还能使学生树立自主知识产权的保护意识,极大地推动了创新性实验与基础性实验的有机结合。; 李影魏忠彬孙晓媛侯凤钱爱东; 关键词：细菌通气培养

鸡白痢沙门氏菌活的非可培养状态相关基因ybbB和rh1B的鉴定被引量：3: 2011年; 为鉴定细菌活的非可培养状态(VBNC)下的转录基因,本研究采用液体LB培养基在4℃条件下诱导鸡白痢沙门氏菌(S.pullorum)CVCC578株进入VBNC状态,并利用mRNA差异显示RT-PCR技术(DDRT-PCR)分析S.pullorum VBNC状态与正常状态所表达的差异基因。结果表明,在S.pullorum的VBNC状态下克隆得到两个转录基因片段,分别为422 bp和573 bp。序列分析表明:422 bp的cDNA片段与不同沙门氏菌株的tRNA硒尿核苷合成酶(tRNA 2-selenouridine synthase)的ybbB基因的核苷酸和氨基酸同源性均为99%;573 bp的cDNA片段则与不同菌株S.pullorum的ATP依赖性的RNA解旋酶基因(rh1B)的核苷酸同源性为95%～100%,氨基酸同源性为98%以上。在VBNC状态下这两个转录基因的发现,将为S.pullorum的VBNC机理研究奠定基础。; 李影段锐孙晓媛钱爱东王伟利; 关键词：鸡白痢沙门氏菌

鸡白痢沙门氏菌CVCC578标准株VBNC研究模型的建立及鉴定被引量：4: 2010年; 为建立活的非可培养状态(VBNC)研究模型,本研究利用液体LB和4℃联合条件对鸡白痢沙门氏菌CVCC578参考株的进行VBNC诱导,构建VBNC研究模型。同时依靠胎牛血清和程序性升温对处于该状态的菌体进行复苏,并对复苏前后的细菌进行了16SrRNA验证。结果表明:实验菌株经液体LB和4℃联合诱导后,可培养菌数在55d后降至零,总菌数在整个观察期内基本不变,而活菌数在150d后开始下降,180d后下降显著,表明实验菌株可在55d进入VBNC,而且维持时间至180d。当进入该状态后,菌体形态可由杆状变为球杆或球形,并且菌体排列可由单在变为聚集。经复苏和16SrRNA鉴定后,"变态"的细菌被证实为沙门氏菌,而非杂污染菌。该实验为规范VBNC沙门氏菌的鉴定程序以及制订相应的国家检测标准提供了实验依据。; 李影段锐孙晓媛钱爱东王伟利; 关键词：鸡白痢沙门氏菌

利用细菌“活的非可培养状态”开发未可培养微生物资源的研究: 李影段锐单晓枫钱爱东董长颖段冶赵云蛟李公美董浩魏忠彬孙晓媛; 1.课题来源与背景：项目-利用细菌“活的非可培养状态”开发未可培养微生物资源的研究(合同编号20060556)为吉林省科技发展计划。2.技术原理及性能指标技术原理：首先以活的非可培养状态细菌为研究模型，根据细菌基因组中高...; 关键词：; 关键词：细菌检测生物学特性

三株沙门氏菌VBNC状态诱导条件的筛选被引量：9: 2009年; 通过对3株沙门氏菌在不同条件下的诱导,确定沙门氏菌进入VBNC状态的条件,为进一步研究VBNC状态的发生机制奠定基础。以改变沙门氏菌培养环境为主,设计11种条件对3株沙门氏菌进行诱导培养,同时观察其可培养菌数的变化及荧光图像的变化。确定标准株S1在LB液体培养基4℃需氧培养到55d时可培养菌数降为零,同时菌体变为球杆菌,可认为其进入VBNC状态。; 孙晓媛钱爱东李影; 关键词：沙门氏菌 VBNC

细菌活的非可培养状态荧光显微镜观察与计数方法: 本发明涉及一种细菌活的非可培养状态荧光显微镜观察与计数方法，其特征在于：具体步骤是：(1)、VBNC细菌观察样本的前处理；(2)、微孔滤膜疏水性检查与处理；(3)、微孔滤膜染色；(4)、VBNC细菌样本荧光染色；(5)、...; 李影钱爱东段锐王伟利孙晓媛候凤; 文献传递

鸡大肠杆菌活的非可培养状态发生相关基因克隆与分析被引量：2: 2010年; 本研究旨在从分子水平探究细菌活的非可培养状态(VBNC)的发生机制。应用冰乙酸和4℃联合诱导条件,使鸡大肠杆菌进入VBNC状态,并利用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)获得VBNC相关基因。结果表明,从VBNC大肠杆菌中筛选得到的3个差异片段与大肠杆菌23S核糖体RNA基因序列具有较高的核苷酸同源性,分别为98%、98%和99%,而氨基酸的同源性也均在97%以上,表明这3个序列是大肠杆菌23S核糖体rRNA基因的部分序列,同时也是与大肠杆菌VBNC状态发生密切相关的基因。由此推知,当正常大肠杆菌在未暴露任何压力下时,其转录水平较低,特别是23S rRNA的某一(些)基因不显示或受到强烈抑制。当进入VBNC状态后,面临生存压力时,这一(些)基因转录水平明显强于正常状态,而核糖体作为蛋白质合成的主要结构与场所,其某些基因也将积极参与新蛋白质的生物合成。; 李影段锐王伟利孙晓媛钱爱东; 关键词：大肠杆菌

开发未可培养微生物技术的研究进展被引量：6: 2008年; 细菌的"活的非可培养状态"(VBNC,viable but nonculturable)发现于20世纪80年代,处于此状态的细菌不但丧失了在培养基上生长繁殖的能力,而且具有与原菌相似的致病性,成为可以逃避检测的"隐性"传染源,对周围的环境及人类安全构成潜在威胁。作为公认的未可培养微生物,它一直是预防医学、流行病学、微生物生态学以及公共卫生检验检疫方面研究的热点问题之一。现代分子生物学技术和基因组学的深入研究,为开发环境中的未可培养微生物提供了新的研究方法和机遇。其中遗传指纹图谱技术、宏基因组技术显示出一定的优势,同时,随着各种细菌的非可培养状态的实验室模型已日臻成熟,这为开发和利用未可培养微生物资源提供了新的研究思路。; 孙晓媛李影钱爱东; 关键词：VBNC 宏基因组学

细菌的“VBNC”状态在开发未可培养微生物中的探索被引量：4: 2008年; VBNC（Viable but nonculturable）是指非可培养微生物状态，徐怀恕等人在1982年通过对霍乱弧菌和大肠杆菌存活规律的研究，首次发现并提出了细菌“活的非可培养状态（Viable but non—culturable state，VBNC），即细菌在不良环境条件下细胞缩成球形，用常规方法（平板法、最大可能近似值法）培养不能生长繁殖，但仍然具有代谢活性，是活的一种特殊的存在形式。; 孙晓媛李影; 关键词：可培养微生物细菌大肠杆菌霍乱弧菌生长繁殖

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孙晓媛