孔玉英
- 作品数:28 被引量:90H指数:6
- 供职机构:中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家自然科学基金上海市科学技术发展基金更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- hB1F与HNF1协同调控HBV增强子Ⅱ的功能被引量:3
- 2000年
- 人 B1结合因子(human B1 binding factor, hB1F)是本实验室克隆到的一个新的转录因子,它能够结合于HBV增强子Ⅱ(EN Ⅱ)的B1区并反式激活其功能.对hB1F和其他反式激活EN Ⅱ的肝细胞核因子间在功能上的相互关系进行了研究.氯霉素乙酰转移酶(chloramphenicolacetyltransferase, CAT)报告基因分析发现, hB1F与 HNF3β, HNF4间在激活 EN Ⅱ的功能上仅存在简单的加和性,而hB1F和HNF1共同存在的情况下却能够产生很强的协同效应.进一步利用GSTpull-down实验在体外证明了这两种因子间存在特异的直接相互作用.研究结果表明,hB1F与HNF1协同地调控HBV增强子Ⅱ的功能.
- 蔡彦宁李嵋周青孔玉英汪垣
- 关键词:乙型肝炎病毒HB1F
- 带有preS抗原决定簇的乙肝表面抗原的DNA免疫研究被引量:3
- 1999年
- 构建了 3种融合了preS抗原决定簇的乙肝表面抗原 (HBsAg)的表达质粒 .在COS M6细胞中暂时表达的结果显示 ,在CMV启动子转录调控下融合基因表达的蛋白可以有效地分泌至细胞外 ,并且同时具有HBsAg ,preS1和 preS2抗原性 .带有 preS抗原决定簇顺序的质粒DNA直接免疫BALB/c小鼠后 ,能诱发小鼠产生抗S抗体 ,抗体滴度高于仅带有S基因的表达质粒 .带有 preS1抗原决定簇顺序的质粒还可以使小鼠产生较高滴度的 preS1抗体 ,而且preS1抗体的出现早于S抗体 .
- 惠静毅李光地孔玉英汪垣
- 关键词:乙肝表面抗原DNA免疫抗体
- 一种调控小鼠孤儿核受体的启动子及其用途
- 本发明公开了一个调控小鼠基因mLRH-1(mouse liver receptor homolog 1)在胚胎发育过程中高表达的启动子P2的核苷酸序列及其用途。此启动子在作为早期发育体外模型的小鼠胚胎干细胞中具有很强的活...
- 谢幼华汪垣高大明孔玉英
- 文献传递
- 带肝细胞受体结合区的HBV表面抗原蛋白性质的研究——preS区有不同缺失的表面抗原蛋白性质的比较被引量:3
- 1994年
- 本文用聚合酶链反应(PCR)构建了四对preS区有缺失突变的乙型肝炎病毒表面抗原基因。对这些突变体及我们以前构建的缺失突变体在哺乳动物细胞中的表达和产物性质进行了比较,结果表明,preS区的部分缺失并不影响羧端S区的基本结构和氨端preS区的表面分布性。当缺失preS1区滞留顺序(a.a.2—19)后,preS区对S区带主要抗原决定簇的区域的掩蔽明显减弱。我们发现过长的preS区严重影响表面抗原蛋白从哺乳动物细胞中的分泌,除已知的滞留顺序外,preS1的另一区域(a.a.48—65)可能也有阻滞表面抗原蛋白分泌的作用,而preS2区对LS蛋白分泌的阻滞不起主要作用。preS1的肝细胞受体结合区(a.a.21—47)和S区直接融合所得蛋白性质稳定,分泌良好,有很强的抗preS1抗原性,是值得发展为新型疫苗的带preS1肝细胞受体结合区的表面抗原蛋白。
- 徐可立俞贤明孔玉英汪垣李载平
- 关键词:乙型肝炎病毒蛋白表面抗原
- 肝细胞核因子hB1F与HNF1间存在直接相互作用及功能上的协同
- HNF1,HNF3β,HNF4及hB1F(human B1 binding factor)均是重要的肝细胞核因子(hepatocyte nuclear factor),在肝细胞特异基因的表达,肝脏的分化发育中发挥着极为重...
- 蔡彦宁周青李嵋谢幼华孔玉英汪垣
- 关键词:乙型肝炎病毒HB1F肝细胞核因子
- 文献传递
- 乙型肝炎病毒核心启动子及其上游顺序对其基因表达的调控被引量:20
- 1997年
- 构建了线性化的、从基本核心启动子(Cp)开始并有不同长度Cp上游顺序的、含完整转录单元的HBV基因组克隆,以研究Cp及其上游顺序对HBV基因表达的调控及对HBV子代DNA复制的影响。发现从基本核心启动子Cp开始的HBV转录单元能够有效地起始3.5kbmR-NA转录。Cp上游ENI顺序对子代DNA复制有极强的刺激作用,而ENⅡ更上游顺序对ENⅡ的刺激作用又有所抑制,证明Cp的转录受其上游顺序的正负双重调控。另外,Cp上游还存在与HBV基因表达的细胞专一性有关的调控顺序。
- 傅磊吴雪孔玉英汪垣
- 关键词:乙型肝炎病毒核心启动子
- 能在大肠杆菌中全长表达的丙型肝炎病毒被膜蛋白E2基因及其编码蛋白和应用
- 李光地刘晶汪垣朱立新孔玉英
- 本发明公开了一种能在大肠杆菌中全长表达的丙型肝炎病毒被膜蛋白E2基因及其编码蛋白。该全长表达的丙型肝炎病毒被膜蛋白E2具有E2的抗原性和免疫原性,用来免疫动物可产生抗E2的抗体,为研究完整的HCV E2的抗原性和免疫原性...
- 关键词:
- 关键词:丙型肝炎病毒大肠杆菌
- 乙型肝炎病毒核心启动子的研究
- 成萍尤忠胜孔玉英汪垣
- 关键词:乙型肝炎病毒核心启动子
- 文献传递
- HCV核心区与HBV核心区融合基因的DNA免疫被引量:5
- 1999年
- 构建了在CMV启动子控制下在真核系统表达丙肝核心蛋白基因全长(HCc1 91 )及其氨端片段 (HCc6 9及HCc40 )的表达克隆 ,以及这 3种不同长度的HCc分别与乙肝核心区基因 (HBc1 44 )在羧端融合的表达克隆 .在COS细胞中实现了暂时表达 .ELISA和Westernblot分析表明 ,表达产物具HCc抗原性或同时具有HBc的抗原性 .非融合和融合基因的DNA直接免疫小鼠 ,能有效地产生抗HCc抗体或同时产生抗HBc抗体 .融合形式要比非融合形式产生抗HCc抗体的持续时间长 .结果表明不同长度的HCc的融合并不影响HBc免疫原性的表现 ,却有利于HCc免疫原性的表现 .
- 杨莉刘晶孔玉英汪垣李光地
- 关键词:疫苗基因融合DNA免疫
- 抗HPV16 E7-ribozyme在CV-1细胞中的稳定表达被引量:1
- 1996年
- 构建了由RSV-LTR启动子带动并能在细胞内稳定复制的Ribozyme的自身修剪表达质粒pRSV-Rz523、Ribozyme反义对照质粒pRSV-AE7及人增殖细胞核抗原基因(PCNA)启动子带动的HPV16 E7片段(+554~+686)的真核表达质粒pPCNA-E7。经G418抗性筛选获得了稳定表达Ribozyme的CV-1细胞克隆,其表达水平约为9.0pmol/10~6个细胞,其中活性Ribozyme的量大于50fmol/10~6个细胞,分离得到的Ribozyme可在体外特异切割E7靶RNA片段。通过共转染Ribozyme(或反义对照)和底物表达质粒并筛选出细胞克隆,研究了Ribozyme在细胞中对底物表达水平的影响。初步结果显示,Ribozyme的导入可使细胞内底物E7的RNA表达水平降低了90%(反义对照使E7 RNA表达降低20%)。上述结果提示:在CV-1细胞中表达的Ribozyme不仅在体外,同时在细胞内具有一定的生物学活性,有可能应用于逆转宫颈癌细胞的恶性表型。
- 黄扬中孔玉英汪垣祁国荣陆长德
- 关键词:RIBOZYME乳头状瘤病毒子宫颈癌