周彦妮 作品数:5 被引量:4 H指数:1 供职机构: 四川大学华西医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
不同途径过继回输致耐受树突状细胞延长小鼠移植心脏存活研究的系统评价 被引量:4 2012年 目的系统评价采用不同途径过继回输致耐受树突状细胞(tolerogenic dendritic cells,Tol-DCs)对移植心脏存活的影响及可能机制。方法计算机检索PubMed、EMbase和ISI,查找关于过继回输Tol-DCs对移植物存活影响的动物实验,检索时限均从建库至2011年3月5日。参照循证医学系统评价的方法,以同种异体移植心脏存活时间为终点指标,分析Tol-DCs对移植心脏存活的影响;通过整合纳入文献信息,总结Tol-DCs延长移植物存活的机制。结果最终纳入44篇文献,含4种Tol-DCs诱导方式,包括过继回输基因修饰、药物干预、细胞因子诱导及其他源性(脾源、肝源)Tol-DCs。纳入研究多数采用一次性尾静脉输注2×106Tol-DCs。我们采用森林图呈现实验组和未处理组移植心脏存活时间,半定量评价4种诱导方式产生的Tol-DCs对移植心脏存活时间的影响。结果显示4种Tol-DCs均能有效延长移植心脏的存活时间,基因修饰组平均延长存活时间为22.02±21.9 d(3.2倍于对照组),药物诱导组为25.94±16.9 d(4.3倍),细胞因子诱导组为9.00±8.13 d(1.9倍),其他源性Tol-DCs组为10.69±9.94 d(2.1倍)。与英文摘要保持一致:过继回输Tol-DC延长移植物存活的机制有:(1)诱导T细胞低反应性(MLR);(2)削弱对移植物的细胞毒性杀伤效应(CTL);(3)诱导T细胞向2偏移(CK)(;4)诱生Treg。结论对MHC全错配近交系同种异体心脏移植受者小鼠,过继回输基因修饰、药物干预、细胞因子诱导及其他源性(脾源、肝源)Tol-DCs均可显著延长移植物存活或诱导免疫耐受。其中以基因修饰和药物诱导的Tol-DCs延长存活时间效果最为显著,且过继回输基因修饰的可靠性和稳定性强于药物诱导。 吴文桥 单娟 李幼平 罗蕾 孙桂香 周彦妮 杨彤 夏梦娟 郭颖嘉 冯莉关键词:心脏移植 胰腺星形细胞在胰腺纤维化中的研究进展 2017年 目的综述胰腺星形细胞在胰腺纤维化中的研究进展,了解胰腺星形细胞的特性、活化及对胰腺纤维化作用的机制。方法查阅近年来国内外有关胰腺星形细胞及其在胰腺纤维化研究中的相关文献,对胰腺星形细胞及其与胰腺纤维化的关系及致病机制进行综述。结果胰腺炎和终末期移植胰腺伴随的纤维化与胰腺星形细胞的活化密切相关,而胰腺星形细胞的活化对胞内外的一些信号通路分子等的影响和调节的详细机制还需要深一步探讨。结论研究胰腺星形细胞的活化机制能对胰腺纤维化的过程进一步了解,以便于下一步寻找干预的新靶点。 龙丹 周彦妮 李鸿生 王思琪 李露 张家碧 冯莉 李胜富关键词:胰腺炎 胰腺纤维化 胰腺星形细胞 细胞活化 免疫荧光检测p53与线粒体共定位的实验方法探索 2020年 目的探索研究p53与线粒体共定位的最佳免疫荧光条件,为检测蛋白质与线粒体共定位的研究提供参考。方法低氧处理HeLa细胞,免疫印迹检测p53表达;分别使用甲醇固定HeLa细胞、甲醇:丙酮混合液(体积比1∶1)固定HeLa细胞、4%多聚甲醛固定HeLa细胞,前二者不作通透处理,后者用0.1%聚乙二醇辛基苯基醚(Triton-X 100)通透,同时染色p53和线粒体;用4%多聚甲醛固定HeLa细胞后,降低Triton-X 100浓度至0.05%、0.025%、0.01%和0.005%,同时染色p53和线粒体;用4%多聚甲醛固定HeLa细胞后,Triton-X 100浓度降至0.01%和0.005%,通透标记p53后再次使用0.1%Triton-X 100重新通透细胞器膜染色线粒体。结果低氧后p53表达上调(P<0.01),可用于后续免疫荧光实验。使用甲醇和混合液固定组均可同时在细胞核及细胞质内观察到明显的p53信号,并可观测到其与线粒体的共定位,混合液组共定位更明显。多聚甲醛固定组用0.1%Triton-X 100通透后p53信号主要在细胞核内,未能观察到共定位;使用4%多聚甲醛固定后,降低Triton-X 100浓度至0.05%和0.025%在一定程度上削弱p53核内信号,增强共定位信号,但细胞核内信号仍强于细胞质,当降低至0.01%和0.005%,细胞质内检测到p53信号,细胞核内未检测到p53信号,提示此条件下核膜未被通透,但同样也未能通透线粒体膜,导致线粒体标记失败;二次通透完全规避p53核内信号,并成功标记线粒体,检测到p53与线粒体的共定位。结论使用甲醇或混合液固定可观察到p53与线粒体共定位,其中混合液效果更佳;使用4%多聚甲醛固定结合2次通透可有效避免核内信号,检测到p53和线粒体的共定位。 龙丹 冯莉 陈雪璐 李胜富 周彦妮关键词:P53 线粒体 共定位 免疫荧光 HIF-3α在线粒体的表达及意义 2019年 目的探究低氧诱导因子-3α(HIF-3α)定位至线粒体的现象及其生理、病理意义。方法①低氧(1%O2)或脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰甘氨酸(DMOG)、氯化钴(CoCl2)模拟低氧处理人宫颈癌细胞系HeLa和人肾癌细胞系ACHN后,蛋白质免疫印迹(Western blot)和免疫荧光(IF)检测HIF-3α在细胞中的分布及其在线粒体中的表达;②通过酶敏感实验观察HIF-3α的线粒体亚结构定位;③采用Western blot检测HIF-3α在正常小鼠不同器官组织、人肝癌组织线粒体中的表达情况。结果①在检测的2种细胞系(HeLa和ACHN细胞)中,HIF-3α在常氧及缺氧条件下均可定位至线粒体,且缺氧组HIF-3α在线粒体中的表达高于常氧组;②HIF-3α的消化模式与线粒体外膜蛋白一致;③HIF-3α在小鼠多种器官组织中均可定位线粒体,HIF-3α在人肝癌组织线粒体中的表达高于正常及癌旁组织。结论 HIF-3α在常氧及缺氧条件下均可定位至线粒体外膜,低氧可促进其线粒体定位;该现象可能与肝癌的发生发展相关。 李露 周彦妮 李胜富 龙丹 李鸿生 冯莉 李幼平关键词:线粒体 低氧 常氧 细胞和组织中两种线粒体标记方法的比较 2020年 目的比较探针和抗线粒体蛋白抗体标记细胞及组织中线粒体的效果,为相关研究选取适合的标记方法提供参考。方法在经体积分数4%多聚甲醛固定的HepG2细胞中,分别使用100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗葡萄糖调节蛋白75(Grp75)抗体标记线粒体;在经体积分数4%多聚甲醛固定的HeLa细胞中,分别使用75 nmol/L、100 nmol/L MitoTracker Deep Red探针和抗Grp75抗体标记线粒体;取人肝组织冰冻切片,经4%多聚甲醛固定后,分别使用150 nmol/L MitoTracker Deep Red和抗Grp75抗体标记线粒体。共聚焦显微镜下观察。结果MitoTracker Deep Red探针标记细胞线粒体的效果不如抗Grp75抗体标记清晰,且在HeLa细胞中有非特异性染色,抗体标记可更清楚地反映线粒体的点状和管状分布;在组织中MitoTracker Deep Red探针标记的单个细胞更均匀,标记线粒体的特异性更高,效果优于抗体染色。结论在细胞中使用抗Grp75抗体标记线粒体效果更好,能直观反映线粒体的分裂融合状态;在组织中使用MitoTracker Deep Red染色效果更佳。 龙丹 周彦妮 冯莉 李胜富关键词:线粒体 葡萄糖调节蛋白75 探针