周光现
- 作品数：10 被引量：54H指数：3
- 供职机构：西北农林科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省科技攻关计划国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 山羊绒毛干中线粒体DNA和核DNA的提取与PCR扩增被引量：4
- 2013年
- 本研究以PCR缓冲液、MgCl2溶液和蛋白酶K为裂解提取液,建立了一种从山羊绒毛干中快速提取DNA的方法。结果表明,该方法不仅能从山羊绒毛干中提取出线粒体DNA和核DNA,而且能够有效地进行线粒体基因和核基因组基因的PCR扩增,为拓展羊绒样品在个体识别、遗传资源评价、分子进化和分子标记辅助育种等研究领域中的应用奠定基础。
- 耿荣庆周光现韩旭峰李伟李碧波王小龙陈玉林
- 关键词：山羊绒线粒体DNA核DNADNA提取PCR扩增
- 酵母培养物对羔羊生产性能、营养物质表现消化率及瘤胃发育的影响被引量：39
- 2011年
- 【目的】研究2种精粗比日粮中添加酵母培养物(YC)对陕北绒山羊羔羊生产性能、营养物质表观消化率及瘤胃发育的影响。【方法】采用2×2因子试验设计,将16只日龄和体质量相近的羔羊随机分为4组:Ⅰ组.日粮精粗比3∶7+20 g/kg YC;Ⅱ组.日粮精粗比3∶7,不添加YC;Ⅲ组.日粮精粗比5∶5+20 g/kg YC;Ⅳ组.日粮精粗比5∶5,不添加YC。计算各组羔羊的平均增加体质量、平均日增质量、干物质采食量(DMI)及料质量比。采用不完全收粪法收集粪样,测定其中干物质、有机物、粗蛋白(CP)、粗脂肪、中性洗涤纤维(NDF)及酸性洗涤纤维的表观消化率。试验结束后屠宰全部试验羊,取瘤胃组织测定瘤胃乳头高度、宽度和瘤胃壁厚度。【结果】Ⅰ组羔羊平均增加体质量、平均日增质量均显著高于Ⅱ组(P<0.05);Ⅲ组DMI显著高于Ⅳ组(P<0.05),Ⅰ组DMI高于Ⅱ组,但差异不显著(P=0.077);4个处理组的料质量比差异均不显著(P>0.05),其中Ⅰ组最小(7.72)。Ⅰ组羔羊CP、NDF的表观消化率显著高于Ⅱ组(P<0.05),而Ⅲ组与Ⅳ组间各营养物质的表观消化率差异均不显著(P>0.05)。Ⅲ组羔羊瘤胃乳头高度、宽度均极显著大于Ⅳ组(P<0.01),瘤胃壁厚度显著大于Ⅳ组(P<0.05)。日粮精粗比与YC的互作效应对CP、NDF的表观消化率影响显著(P<0.05),对瘤胃乳头宽度影响极显著(P<0.01)。【结论】日粮中添加YC能够提高羔羊的DMI和平均日增质量,以及高粗料日粮的CP和NDF表观消化率;YC可促进羔羊瘤胃发育,在高精料日粮中效果更显著;日粮精粗比与YC对CP、NDF表观消化率及瘤胃发育的影响存在互作效应。
- 寇慧娟陈玉林刘敬敏曹宝红周光现张思慧张恩平
- 关键词：精粗比酵母培养物营养物质表观消化率瘤胃发育羔羊
- 日粮中添加硫酸钠对陕北白绒山羊瘤胃纤维素降解率的影响
- 2011年
- 【目的】研究含不同水平硫酸钠日粮对陕北白绒山羊瘤胃纤维素降解率的影响,为选择适宜的硫添加水平提供理论依据。【方法】选择4只健康、体质量（28~32 kg）相近且安装永久性瘤胃瘘管的陕北白绒山羊为试验动物,采用4×4拉丁方单因素试验设计,试验分4个时期进行,每个时期14 d,分别饲喂硫酸钠添加水平为0（对照组）,2.0,4.8,6.4 g/kg的4种日粮,测定瘤胃内青贮饲料干物质（DM）、中性洗涤纤维（NDF）、酸性洗涤纤维（ADF）的动态降解率,计算青贮饲料瘤胃DM、NDF、ADF的有效降解率（PED）,并进行显著性检验。【结果】与对照组相比,日粮中添加硫酸钠对瘤胃食糜外流速率（Kp）无显著影响;提高了瘤胃内青贮饲料DM、NDF、ADF的PED值,而且当硫酸钠添加水平分别为4.8和6.4 g/kg时,PED值有显著或极显著提高。【结论】日粮中添加硫酸钠可以提高陕北白绒山羊非产绒期瘤胃内粗饲料纤维的PED值,且PED值随着硫酸钠添加水平的增加而增大,当硫酸钠水平为6.4 g/kg时,青贮玉米PED值最大,从而使青贮玉米得到了更好的利用。
- 刘敬敏陈玉林寇慧娟曹宝红张恩平周光现张思慧
- 关键词：陕北白绒山羊硫酸钠瘤胃中性洗涤纤维酸性洗涤纤维降解率
- 一种快速提取纯化检测毛样蛋白方法
- 本发明公开了一种快速提取纯化检测毛样蛋白方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品分类，分别剪成小段；(2)0.15％壬基酚聚氧乙烯(9)醚60℃清洗20min，吸干；(3)dd水60℃清洗5min，吸干；(4)二氯甲烷...
- 王小龙陈玉林周光现牛怡源师丙波
- 文献传递
- 人XIAP基因多克隆抗体的快速制备方法研究被引量：1
- 2011年
- 【目的】探索快速制备高品质X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)多克隆抗体的方法,为研究XIAP基因的功能及XIAP蛋白在肿瘤组织中的表达量检测提供参考。【方法】通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的原核表达载体;考察细胞密度(OD600)、IPTG浓度、诱导温度和诱导时间对XIAP重组蛋白表达量的影响,以确定XIAP重组蛋白的最佳诱导条件,并用Ni-NTA亲和层析柱法纯化XIAP重组蛋白;用纯化的XIAP重组蛋白对2只成年新西兰白兔进行常规免疫后,再对其中1只进行耳静脉注射加强免疫,连续3d,每天免疫1次,用ELISA检测抗体效价,Western blot检测抗体特异性。【结果】①通过RT-PCR方法获得人XIAP基因的CDs区序列,与pET151/D-TOPO载体连接,构建XIAP基因的原核表达载体,测序后,与GenBank中序列的的相似度为97%。②XIAP重组蛋白的最佳诱导条件为:温度30℃,初始诱导细胞密度(OD600)为0.6,IPTG浓度0.5mmol/L,诱导时间4h。在此条件下,XIAP重组蛋白多以包涵体的形式存在于细胞沉淀中。③利用Ni-NTA亲和层析柱法,在pH为5.9和4.5的洗脱液中均可获得质量浓度为600μg/mL的XIAP重组蛋白。④耳静脉连续加强免疫是刺激动物机体快速产生抗体的有效方法(31d)。ELISA和Western blot检测结果表明,耳静脉连续加强免疫产生的XIAP抗体的效价和特异性均明显高于常规免疫所产生的抗体。【结论】耳静脉连续加强免疫能够显著提高XIAP抗体的效价,且能有效缩短多克隆抗体的制备时间。
- 张婷婷周光现王昕张智英
- 关键词：重组蛋白表达多克隆抗体XIAP基因
- 秦川牛生长抑制素基因克隆及原核表达研究
- 2012年
- 试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。提取秦川牛的骨骼肌总RNA,根据基因库中海福特牛肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点及保护碱基,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,将目的片段插入到PGEX-4T-1中,构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,将重组表达质粒转化至Rosetta(DE3)中诱导表达。结果表明,扩增的秦川牛肌肉生长抑制素全长基因1 128bp,克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与GenBank上发表的一致;成功构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,经IPTG诱导,表达出了GST-M融合蛋白,用GST标签抗体做Western blotting印记证明产物大约69ku,与预期大小相符,并在Rosetta(DE3)菌中成功的进行融合蛋白表达。
- 周光现常馨月阚靖博张恩平
- 关键词：肌肉生长抑制素克隆原核表达蛋白印迹
- 秦川牛ESRRα基因的多态性及其与肉质性状的关联分析被引量：2
- 2012年
- 雌激素相关受体α(Estrogen-related receptorsα,ESRRα)是一个多功能蛋白,主要参与全身能量代谢,并且在脂肪细胞分化过程中起着重要作用。研究采用直接测序与限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)相结合的方法,对282头秦川牛ESRRα基因的第一内含子进行多态性检测,发现一个单核苷酸多态位点(SNP)(C147A)。通过分析得出:在这个秦川牛群体中存在2个等位基因,A和C,两个等位基因的频率分别为0.4025和0.5975,检测到3种基因型,AA、CA和CC,3种基因型的频率分别为0.1844,0.4363和0.3794。ESRRα基因与秦川牛肉质性状的关联分析结果表明:CC基因型对牛的背膘厚有较大影响(P<0.05);而AA基因型和CA基因型个体的大理石花纹则显著高于CC型个体(P<0.05)。
- 张思慧马森曾洁常馨月周光现曹宝红张恩平
- 关键词：遗传多态性
- 陕北白绒山羊次级毛囊周期循环关键基因的筛选及LHX2与miR-144的功能验证
- 绒山羊绒毛是由次级毛囊产生的,具有“软黄金”的美誉,是高档纺织材料,并且次级毛囊是研究毛发再生循环机制的模型。本文拟通过研究陕北白绒山羊次级毛囊发育循环周期的分子机理,进而为提高绒山羊绒毛质量、增加绒毛产量提供理论基础,...
- 周光现
- 关键词：绒山羊毛乳头
- 文献传递
- 蛋白质组学在动物科学研究中的应用被引量：2
- 2015年
- 蛋白质作为功能基因表达的产物,直接或间接参与机体内各种生命代谢活动的调控,为人类认识各种生命活动的本质提供了直观的分子学基础。随着后基因组时代的到来,蛋白质组学必将在包括动物科学在内的众多生物学研究领域内发挥巨大的作用。论文介绍了蛋白质组学的研究现状及其在动物肉品质、奶品质、禽蛋、动物毛发和动物疾病等研究方面的应用,并对应用中的具体理论依据和技术手段进行说明。
- 明浩赵金周光现牛怡源王小龙
- 关键词：蛋白质组学动物科学疾病
