周健
- 作品数：17 被引量：132H指数：4
- 供职机构：首都医科大学附属北京天坛医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 胚胎干细胞及其应用前景
- 2006年
- 侯颖周健王衡
- 关键词：胚胎干细胞人胚胎干细胞
- 猪体细胞α-1，3-半乳糖基转移酶基因的敲除并敲入HLA-G1基因的研究
- 异种器官移植面临的免疫学障碍表现为超急性排斥(HAR),急性血管排斥反应(AVR),细胞介导的排斥反应和慢性排斥反应.由于猪血管内皮细胞上的α-Gal表达是天然抗体的靶位点,是引起HAR的重大障碍,α-Gal是通过α-1...
- 周健
- 关键词：猪体细胞基因打靶
- 文献传递
- 敲除猪α1,3-半乳糖基转移酶基因并敲入HLA-G1基因的打靶载体构建被引量：3
- 2005年
- 本实验室已克隆到猪α1,3半乳糖基转移酶基因(α1,3GT,第九外显子不全)。其中pMD3arm载体上有5.0kb的片段,该片段包括了小部分第8外显子,完整的第8内含子和一部分第9外显子。本实验中利用LAPCR的方法,从猪的基因组中获得约2.0kb的猪α1,3GT的第9外显子序列的扩增产物,将片段克隆于pGEMTeasy载体。将5.0kb和2.0kb片段分别作为打靶载体的5′,3′同源臂,以neo为正选择标记基因,以GFP为负选择标记基因,构建敲除猪α1,3半乳糖基转移酶基因并同时能表达人白细胞抗原HLAG1基因的的打靶载体pZJ。经酶切图谱和测序结果的鉴定成功地构建出敲除猪α1,3半乳糖基转移酶基因并同时能表达人白细胞抗原HLAG1基因的正负双向选择的打靶载体,为异种器官移植提供了很好的探索。
- 周健林爱星陈永福
- 关键词：基因打靶
- 猪、牛成纤维细胞α-1，3-半乳糖基转移酶基因的敲除以及人白细胞抗原-G1基因的敲入被引量：4
- 2007年
- 构建了敲除猪α-1,3-GT并敲入人白细胞抗原HLA-G1基因的打靶载体pZJ,其中以新霉素抗性基因（Neo）为正筛选基因,绿色荧光蛋白基因（GFP）为负筛选基因。采用优化的脂质体转染法将打靶载体pZJ转染于一个长势良好的胎猪成纤维细胞系中,经7天G418（600μg/ml）药物筛选,共获得30个Neo抗性细胞克隆,其中12个为非绿色荧光细胞克隆,7个扩大培养良好,提取阳性克隆细胞的基因组DNA并进行PCR检测。经PCR结果检测,打靶载体转入到胎猪成纤维细胞中,其中3个非荧光阳性单克隆细胞在细胞基因组中进行了定点整合。以同样的脂质体转染条件将pZJ转染牛胎儿成纤维细胞,经筛选并对其进行PCR检测,其中2个均为定点整合阳性。该研究为今后克隆出表达HLA-G1而不表达α-1,3-GT基因的个体猪,从而提供可以真正用于临床的异种器官打下了基础,也为猪牛之间的跨物种敲除提供了一个佐证。
- 周健林爱星陈永福
- 关键词：基因打靶
- 氨基酸与肝性脑病被引量：4
- 2003年
- 周健林爱星
- 关键词：氨基酸肝性脑病支链氨基酸
- 药物代谢酶CYP2D6和CYP2C19的基因多态性与个体化治疗被引量：18
- 2009年
- 药物代谢酶的活性高低是决定药物代谢强度和持久性的主要因素。参与药物代谢的酶主要有细胞色素P450（cytochromep450，CYP450）同工酶、N-乙酰转移酶（N．acefyltransferase，NAT）、醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase，ADH）和酯酶（esterase）等，而在众多代谢酶中，CYP450酶起着非常重要的作用，它可代谢降解大约40％～50％的药物。CYP450酶又称混合功能氧化酶或单加氧酶，是一种以血红蛋白为辅基的B族细胞色素超家族蛋白酶，广泛存在于动物、真核有机体、植物、真菌和细菌中，是必不可少的结构酶。
- 周健吕虹康熙雄
- 关键词：CYP2C19药物代谢酶CYP2D6个体化治疗基因多态性P450酶
- 中国汉族人群不同性别、年龄、体重指数之间细胞色素氧化酶CYP2C19基因多态性的检测被引量：81
- 2007年
- 目的:研究细胞色素P4502C19基因(CYP2C19)在中国汉族人群中的基因型及等位基因突变频率,并考察性别、年龄(18～80岁)和体重指数对中国汉族人群CYP2C19遗传多态性的影响。方法:应用PCR与DNA测序技术相结合的方法对283名(126名男性,157名女性;年龄18～80岁,体重指数:17～31)中国汉族健康人进行CYP2C19基因多态性分析。结果:本研究中一共检测到CYP2C19的六个不同基因突变型,野生型纯合子CYP2C19*1/*1占42.4%(120/283),CYP2C19*2和CYP2C19*3的等位基因频率分别为29.2%和6.7%,14.2%(40/283)为CYP2C19的慢代谢基因型。126名男性中,CYP2C19*2和*3的等位基因频率为28.2%和5.2%;157名女性中,CYP2C19*2和*3的等位基因频率为29.9%和8%。18～45岁年龄组,CYP2C19*2和*3的等位基因频率为28.1%和6.6%;大于等于45岁年龄组,CYP2C19*2和*3的等位基因频率为29.9%和6.8%。体重指数小于25,CYP2C19*2和*3的等位基因频率为31.1%和6.6%;大于25,CYP2C19*2和*3的等位基因频率为22.7%和7.0%。结论:在中国汉族健康受试人群中,CYP2C19*2和*3的基因型在不同性别、年龄和体重指数的发生频率没有显著统计学差异。可以初步推断,性别、年龄和体重指数可能不是CYP2C19遗传多态性的主要影响因素。
- 周健吕虹康熙雄
- 关键词：CYP2C19基因多态性等位基因
- CYP2D6 CYP2C19*2基因多态性与利培酮治疗精神分裂症临床效应的相关研究被引量：7
- 2008年
- 目的探讨CYP2D6和CYP2C19基因多态性与利培酮治疗精神分裂症临床效应个体差异之间的相关性。方法应用聚合酶链反应(PCR)与DNA测序相结合的方法检测精神分裂症患者CYP2D6和CYP2C19基因多态性。应用高效液相色谱分别测定利培酮、9-羟利培酮的血药浓度,以治疗前后阳性和阴性症状量表(PANSS)评分减分率评价药物临床疗效,比较不同基因型之间血药浓度和药物临床疗效的差异。结果55例单用利培酮治疗的精神分裂症患者,CYP2D6(C100T)不同基因型之间利培酮血药浓度分布差异有统计学意义(P<0.05),但该位点与该药的临床效应之间没有相关性(P>0.05)。CYP2C19*2(G681A)基因多态性与利培酮在体内代谢以及该药临床效应之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论CYP2D6(C100T)对利培酮血药浓度有影响,但与利培酮的临床效应个体差异间无相关性。CYP2C19*2(G681A)可能不是引起利培酮代谢以及临床效应个体差异的主要因素。
- 周健吕虹康熙雄王刚李文标陈雪彦
- 关键词：CYP2C19利培酮精神分裂症基因型
- 精神分裂症患者CYP2C19、CYP2C9的基因多态性与氯氮平血药浓度的关联分析被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨CYP2C9和CYP2C19基因多态性与氯氮平代谢个体差异之间的相关性。方法:应用PCR与DNA测序相结合的方法检测精神分裂症患者CYP2C19、CYP2C9基因多态性。应用高效液相色谱测定氯氮平的血药浓度,以阳性和阴性症状量表(positiveand negatve symptom scale,PANSS)评分减分率评价药物临床疗效。基因型和等位基因频率分布的两组间比较采用x^2检验。组间血药浓度和疗效比较采用ANOVA检验。结果:91例氯氮平治疗的精神分裂症患者,氯氮平血药浓度与CYP2C9*3、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因多态性之间没有相关性(P>0.05)。结论:CYP2C9*3、CYP2C19*2和CYP2C19*3基因多态性与氯氮平血药浓度之间不存在基因剂量关系。
- 周健姚尚武康熙雄
- 关键词：CYP2C9CYP2C19氯氮平血药浓度
- 中国健康人群与精神分裂症患者CYP2C9遗传多态性的相关研究
- 2009年
- 目的探讨中国健康人群与精神分裂症患者细胞色素P4502C9（CYP2C9）遗传多态性的相关性。方法应用PCR与DNA测序相结合的方法对91例精神分裂症患者（男52例，女39例，平均年龄50．87±9．38岁）与164例健康志愿者（男88例，女76例，平均年龄47．37±14．82岁）进行了CYP2C9的基因多态性分析，根据CYP2C9将精神分裂症患者和健康志愿者基因型分组。结果在对CYP2C9的检测中，没有发现CYP2C9＊2基因型个体，正常对照组CYP2C9＊3（A1075C）的等位基因频率为4％，精神分裂症患者组CYP2C9＊3（A1075C）等位基因频率为5．5％，精神分裂症患者和健康志愿者组间的基因型和等位基因频率差异无统计学意义（X^2=0．669，P〉0．05；X^2=0．637，P〉0．05）。结论CYP2C9＊3（A1075C）可能不是中国精神分裂症患者的一个易感因素。
- 周健姚尚武康熙雄
- 关键词：精神分裂症CYP2C9遗传多态性
