卢春敏
- 作品数：15 被引量：28H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利拉鲁肽对低脂联素血症诱导的胰岛素抵抗小鼠成纤维细胞生长因子21及其受体的影响被引量：7
- 2011年
- 探讨利拉鲁肽（liraglutide）对低脂联素血症载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠糖脂代谢和成纤维细胞生长因子21（FGF-21）及其受体（FGFR）的影响。低脂联素血症加重了ApoE^-/-小鼠糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗，并导致了肝脏和脂肪组织FGF-21 mRNA和蛋白表达及血浆FGF-21水平明显升高，脂肪组织FGFR1和β-klotho表达降低，肝脏FGFR1-3和β-klotho均降低。利拉鲁肽干预在改善小鼠糖脂代谢紊乱和胰岛素敏感性的同时部分逆转了FGF-21及其受体的改变。
- 苗宗玉杨刚毅李伶孙滨刘瑞卢春敏张志红徐胜男杜林
- 关键词：利拉鲁肽成纤维细胞生长因子21
- Liraglutide对RNAi介导的脂联素基因抑制ApoE基因敲除小鼠FGF-21及其受体表达的影响
- 目的 探讨Liraglutide对脂联素基因表达抑制的ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠FGF21及其受体表达的影响。方法 健康雄性ApoE-/-小鼠32只，随机分为高脂喂养组(HF组)、空载腺病毒组(GF组)、脂联...
- 卢春敏李伶杨刚毅孙滨杨艳苗宗玉张志红徐胜男杜林
- Visfatin基因表达抑制对细胞糖脂代谢的影响
- 第一部分小鼠visfatin-shRNA表达载体构建和筛选
目的:构建小鼠内脏脂肪素visfatin-shRNA表达载体。
方法:设计并合成3条针对小鼠visfatin基因的shRNA序列,分别插入载...
- 卢春敏
- 关键词：VISFATIN3T3-L1VISFATIN3T3-L1脂代谢糖代谢
- 文献传递
- 内脂素对改善胰岛素抵抗及相关基因的作用被引量：8
- 2009年
- 目的探讨内脂素(visfatin)基因过表达对高脂诱导的胰岛素抵抗(IR)大鼠胰岛素敏感性及其信号系统的影响。方法构建大鼠内脂素基因重组真核表达质粒pcDNA3.1(+)-visfatin。20只雄性SD大鼠分为3组。对照组(NC组,n=5):注射0.3mg空载体pcDNA3.1(+),普通饲料组(NT组,n=7)和高脂组(HT,n=8)大鼠注射0.3mg重组质粒pcDNA3.1(+)-visfatin。在实验前(基础值)、第1次钳夹后即刻、质粒处理后3d和第2次钳夹后即刻,分别自各组大鼠颈静脉取血,分离血浆,采用Westernbloting测定血浆内脂素蛋白表达。在转染前和转染后3d采用两次高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术评价大鼠胰岛素敏感性的变化,并测定大鼠空腹血浆胰岛素(FIns)、血糖(BG)、血浆游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及葡萄糖输注率(GIR)等指标。采用斑点印迹法检测胰岛素受体底物-1(IRS-1)酪氨酸磷酸化,采用RT-PCR法测定过氧化物酶体增生激活受体γ(PPARγ)mRNA表达水平的变化。结果内脂素质粒注射3d后及第2次钳夹术后,NT和HT组血浆内脂素水平较注射前均升高(P<0.01)。质粒注射后3d,NT、HT组大鼠TC和HDL-C均较注射前明显降低(P<0.05)。钳夹术中,NT和HT组大鼠GIR较注射前明显升高(P<0.01)。NT和HT组大鼠肝脏和肌肉组织中IRS-1酪氨酸磷酸化水平和肝脏中PPARγmRNA水平也较NC组均明显升高(P<0.05和P<0.01)。NT组脂肪组织中PPARγmRNA水平较NC组明显增高(P<0.01)。结论内脂素可能通过上调PPARγmRNA水平和IRS-1酪氨酸磷酸化水平使机体胰岛素敏感性增加。
- 杨艳杨刚毅李伶张凌苗宗玉卢春敏
- 关键词：PPARΓ高胰岛素-正葡萄糖钳夹技术
- 未知功能基因JAZF1过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢的影响被引量：1
- 2010年
- 目的 观察JAZF1基因（Juxtaposed with another zincfinger gene 1）过表达对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢相关基因的影响.方法 采用实时荧光定量PCR（RT-QPCR）法检测JAZF1 mRNA在健康C57BL/6J小鼠多种组织表达分布情况;构建JAZF1真核表达载体并瞬时转染3T3-L1细胞,RT-QPCR法检测JAZF1、糖脂代谢相关基因mRNA的表达;用Western印迹法测定各组细胞JAZF1蛋白水平;油红O染色比色法检测细胞内脂质积聚的变化.结果 转染48 h后,JAZF1转染组脂肪细胞中,JAZF1 mRNA及蛋白表达明显高于阴性对照和空载组,激素敏感脂肪酶（HSL）mRNA表达水平明显增加（P〈0.05）,脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）、类固醇调节元件结合蛋白1（SREBP1）mRNA相对表达量明显降低（均P〈0.01）,脂肪细胞甘油三酯酶（ATGL）、葡萄糖转运子1（GLUT1）、GLUT4 mRNA表达并无明显改变;油红O染色显示JAZF1转染组细胞内脂质积聚明显降低（P〈0.05）.结论 JAZFl在C57BL/6J小鼠多种组织均有表达,提示其可能在维持正常生理功能中起着一定作用.3T3-L1细胞过表达JAZF1可减少脂质合成、增加脂解,并可明显改善脂质积聚,可能是肥胖和糖尿病治疗的一个潜在靶点.
- 杨艳李伶杨刚毅孙滨卢春敏苗宗玉
- 关键词：3T3-L1细胞糖代谢脂代谢
- Liraglutide对RNAi介导的脂联素基因抑制ApoE基因敲除小鼠脂肪细胞因子的影响
- 目的 探讨Liraglutide对脂联素基因表达缺陷的ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠脂肪细胞因子的影响.方法 健康雄性ApoE-/-小鼠32只，随机分为高脂喂养组(HF组)、空载腺病毒组(GF组)、脂联素RNAi...
- 苗宗玉李伶杨刚毅孙滨杨艳卢春敏张志红徐胜男杜林
- Visfatin ShRNA腺病毒载体的构建及对细胞表达的影响
- 2013年
- 目的:Visfatin是由内脏脂肪细胞分泌的一种脂肪细胞因子,它能够发挥拟胰岛素作用,并能促进脂肪细胞的分化、合成及积聚,与糖脂代谢有着密切的联系,但其确切生理功能及作用机制仍有待进一步研究。本实验成功构建了visfatin ShRNA腺病毒载体,并验证其对Hepal-6细胞visfatin mRNA表达的影响。旨在为进一步研究visfatin在影响糖脂代谢方面的作用机制提供一个简便可行的分子生物学研究平台。方法:将前期构建的pGenesil1.2-visfatin质粒双酶切,得到目的片段mU6-visfatin ShRNA,克隆入穿梭质粒pShuttle-Basic-EGFP,I-CeuI+I-SceI双酶切后转入pAdxsi载体,经筛选、鉴定后,通过脂质体转染HEK293细胞,包装后得到腺病毒Adxsi-GFP-mU6-visfatin,病毒颗粒法(viral particle,VP)和半数组织感染量法(50%tissue culture infective dose,TCID50)测定其滴度。感染hepal-6细胞后,实时定量PCR检测visfatin的mRNA表达。结果:经酶切及测序鉴定,结果与预期一致。VP法检测病毒滴度为3.20×1012VP/mL,TCID50法测得滴度为2×1011PFU/mL。重组病毒感染后,对小鼠Hepal-6细胞visfatin基因mRNA表达抑制率>70%。结论:成功构建了visfatin ShRNA重组腺病毒载体,并能有效抑制小鼠Hepal-6细胞visfatin基因表达,为后期进一步研究visfatin在糖脂代谢方面的作用机制提供了一个基因表达下调的生物学模型。
- 刘大伟李伶杨刚毅杨晓敏卢春敏
- 关键词：VISFATIN腺病毒载体RNA干扰
- 高脂喂养apoE^-/-小鼠组织成纤维细胞生长因子21及其受体的改变被引量：2
- 2010年
- 目的探讨在环境和遗传因素共同诱导的胰岛素抵抗状态下组织成纤维细胞生长因子21（FGF-21）及其受体（FGFR）的变化。方法雄性apoE^-/-小鼠，随机分为普通喂养组（NF组，n=20）和高脂喂养组（HF组，n=20），喂养16周。以3-[^3H]-葡萄糖为示踪剂的扩展胰岛素钳夹技术评价小鼠胰岛素敏感性和糖代谢变化。用实时荧光定量PCR法检测肝脏和脂肪组织FGF-21、FGFR1、FGFR2、FGFR3和FGFR4以及B—klothomRNA表达，用Western印迹法测定血浆和组织FGF-21蛋白水平。结果HF组小鼠空腹血糖、血浆胰岛素、甘油三酯、游离脂肪酸和胆固醇水平明显升高（均P〈0．01）。在钳夹稳态时，HF组血浆胰岛素水平明显高于NF组（P〈0．01），HF组葡萄糖输注率（GIR）明显低于NF组（P〈0．01）。在钳夹结束时，HF组葡萄糖清除率（GRd）明显低于NF组（P〈0．01）。钳夹稳态期，NF和HF组肝糖输出率（HGP）分别被抑制约70％和51％（均P〈0．01）。HF组肝和脂肪组织FGF-21和B—klothomRNA水平均明显高于NF组（均P〈0．01）。HF组肝和脂肪组织FGFR1和FGFR3mRNA的表达明显较NF组显著增高（P〈0．01和P〈0．05）。FGFR4mRNA水平在HF组肝组织中的表达明显高于NF组（P〈0．05）。HF组血浆FGF-21蛋白水平明显高于NF组（P〈0．01），肝和脂肪组织FGF-21蛋白水平也显著升高（均P〈0．05）。结论高脂喂养apoE^-/-小鼠FGF-21、β-klotho及FGFR1和FGFR3水平显著升高，它们可能是FGF-21调节糖脂代谢的主要作用靶点。
- 孙滨杨刚毅李伶程玉兰李钶杨艳卢春敏苗宗玉
- 关键词：成纤维细胞生长因子21成纤维细胞生长因子受体高脂喂养胰岛素抵抗
- ApoE-/-小鼠胆固醇代谢机制研究
- 目的:建立高脂诱导ApoE基因敲除(ApoE)小鼠胰岛素抵抗(IR)模型,探讨其对胆固醇代谢及其相关基因表达的影响。方法:健康雄性ApoE小鼠,鼠龄8周,随机分为普通饲料组(NF组,n=10)和高脂饲料组(HF组,n=1...
- 程玉兰李伶杨燕孙滨杨刚毅李钶苗宗玉卢春敏
- 关键词：APOE基因敲除胰岛素抵抗胆固醇代谢
- 文献传递
- 肺癌肿瘤抑制因子1基因过表达对肝细胞糖脂代谢相关基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 探讨肺癌肿瘤抑制因子1（TSLCI）基因表达上调对小鼠肝癌细胞Hepal-6糖脂代尉相关基因mRNA表达的影响；结果显示，TSLC1基因过表达降低脂代谢基因脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰辅酶A羧化酶（ACC）的表达（P〈0．05或P〈0．01），增加脂肪组织甘油三酯水解酶（ATGL）的表达（P〈0．05），对激素敏感脂肪酶（HSL）、葡萄糖转运蛋白（GLUT）1和GLUT4的表达无显著影响，提示TSLC1过表达可能抑制肝细胞的脂肪生成，促进脂肪分解。
- 杜林杨刚毅李伶杨艳卢春敏苗宗玉
- 关键词：糖脂代谢基因表达
