包慧芳 作品数:220 被引量:404 H指数:9 供职机构: 中国农业科学院兰州兽医研究所 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 新疆维吾尔自治区高技术研究发展计划项目 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
多粘类芽胞杆菌JE53对香梨采后黑斑病菌抑制效果及贮藏品质的影响 2023年 探究多粘类芽胞杆菌Paenibacillus polymyxa JE53对互隔交链孢Alternaria alternata的抑制效果及香梨贮藏品质的影响,为香梨采后黑斑病的生物防控奠定基础。以无菌水(CK)和1-甲基环丙烯(1-MCP)为对照组、JE53发酵液为处理组,分别处理香梨果实后,一部分采用损伤接种香梨黑斑病菌互隔交链孢A.alternata,置于人工气侯箱贮藏,测定JE53对链格孢菌的抑制效果;一部分置于人工气侯箱贮藏,定期测定果实贮藏品质和生理特性指标。结果表明:JE53可有效抑制梨黑斑病菌在梨果实上的生长,损伤接种条件下,贮藏144 h时抑菌率为30.73%;还可显著提高梨果实中过氧化物酶、过氧化氢酶、苯丙氨酸解氨酶活性,能较好保持果实色度、硬度及可溶性固形物和可滴定酸含量,减少丙二醛积累及抗坏血酸损耗,降低果实失重率。上述结果表明:JE53可有效抑制香梨采后黑斑病病原菌在果实上的生长,并能较好的保持果实品质,可作为香梨采后黑斑病生防菌资源。 郝金辉 林胜楠 吴梓菲 王宁 詹发强 詹发强 史应武 杨蓉 杨蓉 侯新强关键词:生物防治 贮藏品质 生理特性 产朊假丝酵母增殖发酵培养基的优化研究 被引量:4 2014年 【目的】对产朊假丝酵母培养基进行优化,以提高其产率。【方法】通过单因素试验,研究不同碳源、氮源、无机盐对产阮假丝酵母产量的影响,对产朊假丝酵母发酵培养基成分进行筛选和优化研究,在此基础上,利用响应曲面法对主要影响因素进行回归分析。【结果】获得最优的增值发酵培养基组成为蛋白胨36.32g/L,蔗糖76.17 g/L,磷酸二氢钾1.98 g/L,硫酸镁1.5 g/L,硫酸铵1 g/L。【结论】产朊假丝酵母在优化后的培养基下OD值可达0.916,菌体干重可达11.15 g/L,比对照组提高了2.08倍。 齐宏亮 崔卫东 包慧芳 詹发强 王宁 侯敏 王炜关键词:产朊假丝酵母 培养基优化 单因素实验 响应曲面法 棉花根际溶磷菌WJP-7发酵培养基优化及防病增产效果 2023年 【目的】研究棉花根际溶磷菌WJP-7发酵培养基优化及防病增产效果。【方法】采用实验室筛选的高效溶磷菌株P.taiwanensis WJP-7为出发菌株,在优化的假单胞菌发酵培养基上增殖培养。【结果】利用正交试验优化摇瓶发酵培养基,培养基配方为蛋白胨20 g/L,MgCl_(2)15 g/L,K_(2)SO_(4)1.4 g/L。使活菌数达到3.6×10^(9)CFU/mL。摇瓶增菌发酵最优培养基发酵验证试验结果最高活菌数为3.60×10^(9)CFU/mL。菌株WJP-7水剂处理对花期黄萎病防治效果为44.57%,絮期防治效果为50.53%。施用WJP-7水剂对棉田土壤除全氮含量增加不显著,对其它养分和pH值均有显著影响(P<0.05)。菌剂增产率为14.35%和19.51%,【结论】优化了台湾假单胞菌WJP-7摇瓶发酵培养基,菌株WJP-7水剂处理对棉花黄萎病防治效果为50.53%,对棉田土壤除全氮含量不显著外,对其它养分和pH值均显著影响(P<0.05),具有明显的增产效果。 王宁 史应武 史应武 杨红梅 楚敏 牛新湘 杨红梅 杨蓉 楚敏 丁荣荣关键词:棉花 溶磷菌 田间应用 吉尔吉斯斯坦伊塞克湖一处土壤样品细菌多样性 2013年 采用纯培养方法从吉尔吉斯斯坦共和国伊塞克湖一处温泉旁的土壤中分离到32株细菌,通过ARDRA分析后得到不同的类群,从各个类群中随机选取1个代表菌株进行16S rDNA序列测定和系统发育的分析。结果表明:分离的菌株分布在假单胞菌属(Pseudomonas)、类芽孢杆菌属(Paenibacillus)、芽孢杆菌属(Bacillus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)、Ly sin ibacillus、溶杆菌属(Lysobacter)、短芽孢杆菌属(Brevibacillus)、根瘤菌属(Rhizobium)、变形杆菌属(Proteus)等9个属,且部分菌株的16S rDNA序列同源性低于97%,可能是潜在的新种。结果揭示了该样点可培养细菌种群的多样性及独特性。 王宁 包慧芳 古丽尼莎.沙依木 王炜关键词:可培养细菌 ARDRA RDNA 猪C型凝集素受体8A骆驼单域抗体酵母展示文库的构建 被引量:1 2018年 为构建猪C型凝集素受体8A(C-type lectin domain family 8,member A,CLEC8A)的单域抗体酵母展示文库,本文首先克隆出了猪CLEC8A基因编码区序列。通过SMART软件分析,鉴定出该受体胞外区基因序列,并插入原核表达载体pET28a(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出了猪CLEC8A胞外区蛋白。表达的蛋白经201佐剂乳化后免疫双峰驼,间接ELISA监测抗体滴度,于六免后15d分离骆驼外周血淋巴细胞。提取总RNA,反转录成cDNA后经巢式PCR扩增获得骆驼WfH基因。纯化的VHH片段与线性化的pCTCON2载体混合后共转入酿酒酵母感受态细胞(EBY100),经细胞内同源重组,成功制备了针对猪CLEC8A受体的骆驼单域抗体酵母展示文库。经菌落计数及测序鉴定结果表明,文库大小约为1.6×10 7,文库重组率达90%,文库多样性丰富。流式细胞术初步鉴定酵母细胞表面成功展示出抗猪CLE8A的单域抗体,为后续文库筛选奠定基础。 魏国燕 李坤 卢曾军 刘在新 孙普 白兴文 李冬 陈应理 包慧芳 李平花 付元芳 张婧 马雪青 曹轶梅关键词:流式细胞术 猪源IFN-λ3在CHO-S细胞中的表达及其抗口蹄疫病毒活性分析 2022年 为了探究猪源IFN-λ3蛋白能否在CHO-S悬浮细胞中表达以及表达蛋白的抗口蹄疫病毒(FMDV)活性,根据NCBI上的猪源IFN-λ3序列,构建真核表达载体pcDNA3.4-IFNλ3-His,将其转染至CHO-K1贴壁细胞中,用间接免疫荧光试验和Western-blot验证重组质粒是否表达IFN-λ3蛋白。将pcDNA3.4-IFNλ3-His转染至CHO-S悬浮细胞中大量制备IFN-λ3蛋白,用AKTA蛋白纯化系统纯化蛋白,用SDS-PAGE和Western-blot方法鉴定纯化出的蛋白,用细胞毒性试验分析纯化蛋白是否具有细胞毒性,用实时荧光定量PCR、Western-blot和空斑试验三种方法研究纯化蛋白的抗FMDV活性。结果显示,重组质粒pcDNA3.4-IFNλ3-His在CHO-K1细胞中瞬时表达IFN-λ3,在CHO-S细胞中以分泌形式表达IFN-λ3;用AKTA系统能够纯化出纯度较高的IFN-λ3蛋白;纯化出的IFN-λ3对PK-15细胞无明显毒性,能够抑制FMDV RNA的复制、减弱病毒蛋白翻译活动以及降低子代病毒的生成。本研究为发展新型FMDV防控策略提供了新方向。 袁红 白兴文 李坤 李平花 孙普 宋雅丽 焦云娟 刘在新 卢曾军 李冬 包慧芳关键词:口蹄疫病毒 抗病毒活性 玉米青贮过程中乳酸菌动态变化 被引量:9 2010年 为了揭示青贮玉米在发酵过程中乳酸菌数量及种群的动态变化,以及微生物添加剂对乳酸菌种群变化的影响,采用了培养方法计数发酵过程中乳酸菌数目的变化,利用16S rRNA基因序列比对方法分析青贮玉米中乳酸菌的多样性及种群变化趋势。经过对15d时间内青贮玉米中乳酸菌变化趋势的分析显示:一周后对照组乳酸菌数最高达到2.1×106CFU/g,两处理组中处理组Ⅱ乳酸菌数达到最高5.5×107CFU/g;利用MRS平板分离、培养出典型乳酸菌菌落152株,经16S rRNA基因序列比对分析为乳杆菌属和片球菌属,其中86%的菌株属于乳杆菌属。此研究表明微生物添加剂有利于青贮玉米发酵过程中乳酸菌的快速增殖,乳杆菌属和片球菌属都是青贮玉米发酵的启动菌之一,在发酵前期一直存在,但发酵后期乳杆菌属是玉米青贮过程中乳酸菌的主要菌群。 詹发强 包慧芳 崔卫东 王炜关键词:青贮玉米 乳酸菌 猪O型口蹄疫基因工程疫苗候选株的构建及其免疫原性分析 被引量:3 2011年 近年来,O型口蹄疫病毒已演化出多种谱系。目前应用的疫苗已不能有效保护多谱系口蹄疫的流行,这给我国猪口蹄疫的防控带来了极大的困难。为了进一步发展免疫原性好、抗原谱广的猪O型口蹄疫疫苗候选株,本研究以O/HN/93现用疫苗毒株的感染性克隆为骨架,构建了含VP3(58位)和VP1(43、48、137、139、140、141和142位)氨基酸改造的全长克隆。线性化的全长cDNA和T7RNA聚合酶质粒共转染BHK细胞后获得拯救病毒。RT-PCR和乳鼠致病性试验表明拯救病毒遗传稳定,具有与亲本病毒相似的致病性。用拯救的基因工程病毒灭活疫苗免疫猪28d后分别用中国谱系、泛亚谱系和缅甸98谱系猪源毒的流行毒攻击,结果均获得了完全保护(16/16)。O/HN/93灭活疫苗免疫猪能完全保护泛亚谱系和缅甸98谱系猪源病毒的攻击(16/16),但不能完全保护(12/16)中国谱系猪源病毒的攻击。结果表明基因工程病毒制备的灭活疫苗提高了对中国型猪源谱系病毒的免疫保护,拓展了抗原谱,是具有良好开发前景的疫苗候选株。 李平花 白兴文 孙普 李冬 卢曾军 包慧芳 曹轶梅 付元芳 陈应理 谢宝霞 殷宏 刘在新关键词:猪口蹄疫 免疫原性分析 一种O型口蹄疫病毒突变株及其制备方法和应用 本发明提供了一种O型口蹄疫病毒突变株及其制备方法和应用,属于疫苗候选株技术领域。O型口蹄疫病毒突变株以rHN病毒株作为母本病毒株,将VP3蛋白的G–H环中以下氨基酸发生突变:第173位天冬氨酸突变为天冬酰胺,第174位缬... 白兴文 刘在新 卢曾军 包慧芳 李平花 李冬 孙普 付元芳 陈应理 曹轶梅 马雪青 李坤 张婧 陈冬冬 宫晓华文献传递 SDS┐PAGE和免疫印迹技术对绵羊肺炎霉形体和丝状霉形体山羊亚种膜蛋白的分析 被引量:9 1997年 SDS┐PAGE和免疫印迹技术对绵羊肺炎霉形体和丝状霉形体山羊亚种膜蛋白的分析1)逯忠新邓光明包慧芳梁桂香(中国农业科学院兰州兽医研究所730046)绵羊肺炎霉形体(y-98,下同)和丝状霉形体山羊亚种(PG3,下同),都能引起山羊传染性胸膜肺炎,两... 逯忠新 邓光明 包慧芳 梁桂香关键词:绵羊 霉形体 SDS-PAGE