刘朝奇
- 作品数：346 被引量：932H指数：12
- 供职机构：三峡大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化
- 2011年
- 目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。
- 曹卫红黄利鸣王艳林刘朝奇彭平平宋华梅尤程程黄益玲谭寒星吴燕珍
- 关键词：天花粉蛋白基因突变原核表达
- 环状RNA与多囊卵巢综合征关系的研究进展被引量：1
- 2021年
- 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,POCS)是临床常见的生殖内分泌疾病,发病率逐年增高。PCOS的发生发展与多种因素有关,其中遗传因素可能起着关键作用。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一种新型的通用且多样化的内源非编码RNA。circRNA的3'和5'末端可以通过共价键连接在一起,导致其形成环化结构。此外,circRNA在RNA核酸外切酶介导下,能够抵抗降解,保持了高度稳定性。circRNA还具有细胞特异性、组织特异性和时序特异性。与微小RNA相比,circRNA是更理想的疾病生物标志物,为后续治疗各种疾病提供了新的靶点。越来越多的研究表明circRNA与PCOS的病理生理有关,在内分泌激素分泌、卵泡发育、颗粒细胞增殖与凋亡、遗传倾向等中发挥作用,参与了PCOS发生发展的各个环节。本文综述了近年来circRNA与PCOS关系的相关研究进展,希望能为PCOS的诊断和治疗研究提供新的思路。
- 郑秋云刘朝奇李志英
- 关键词：多囊卵巢综合征颗粒细胞排卵障碍
- 超声微泡在血管病变诊疗中的研究进展被引量：6
- 2021年
- 超声造影剂微泡在诊断治疗中的运用是当前医疗行业研究热点之一,其不仅可以作为造影剂用于改善图像质量而提高诊断水平,还可以通过物理、化学修饰携带不同药物、基因等用于靶向治疗。该文总结了目前超声微泡在血管病变诊疗中的研究进展,对微泡的优势、微泡介导的造影、溶栓和基因治疗等方面进行了全面综述。
- 谭妍迪周军刘朝奇赵云
- 关键词：超声微泡血管病变血管造影术
- HIV-1 Vif的克隆、表达与活性检测被引量：1
- 2010年
- 目的克隆HIV-1Vif基因,构建原核表达质粒,进行蛋白的表达及其生物学活性的检测。方法 PCR扩增Vif基因,并将其克隆到原核表达载体pET28a(+)中,构建原核表达质粒pET28a(+)/Vif,进行双酶切及测序鉴定。获得的阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和Western blot检测分析,利用亲和层析方法纯化Vif蛋白。利用Pull-Down方法检测HIV-1Vif与SH3(HCK)特异性结合活性。结果通过酶切和测序,结果表明重组质粒pET28a(+)/Vif构建正确。SDS-PAGE和Western blot结果鉴定了原核表达的Vif重组蛋白大小正确。纯化了蛋白Vif、SH3和GST。GST pull-down试验说明Vif和SH3蛋白具有体外特异性结合活性。结论成功地克隆、表达和纯化了Vif蛋白,Vif与SH3蛋白具有结合活性,为进一步研究针对Vif与SH3结合的药物筛选提供实验依据。
- 覃晓琳刘朝奇刘徽婷汪龚泽
- 关键词：HIV-1VIF
- 木瓜发酵物通过miR-350-3p/TLR4信号通路改善小鼠非酒精性脂肪性肝炎被引量：2
- 2022年
- 目的研究木瓜发酵物(CSF)对高脂饲料(HFD)联合葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的改善作用,探讨木瓜发酵物对非酒精性脂肪性肝炎小鼠miR-350-3p/Toll样受体4(TLR4)信号通路的调控机制。方法采用益生菌发酵皱皮木瓜,应用高脂饲料联合葡聚糖硫酸钠诱导小鼠非酒精性脂肪性肝炎模型。将SPF级雄性昆明小鼠随机分为正常组、模型组及木瓜发酵物低、高剂量组,每组10只。灌胃给药,每天1次,连续20 d。其间,正常组给予正常饲料,模型组和木瓜发酵物组均给予高脂饲料,模型组及木瓜发酵物组在最后5 d连续给予2.5%葡聚糖硫酸钠。计算小鼠肝指数;检测小鼠血清甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)含量;HE染色法观察小鼠肝脏组织病理学变化;采用RT-qPCR法检测小鼠肝脏组织中miR-350-3p、TLR4、白细胞介素6(IL-6)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达情况;Western Blot法分析小鼠肝脏中TLR4、TNF-α蛋白表达情况。结果与正常组比较,模型组小鼠肝指数、甘油三酯和胆固醇均有升高(P<0.05),HE染色结果显示肝脏出现明显脂肪变性和炎症反应,RT-qPCR结果显示TLR4和炎性因子(IL-6、TNF-α)表达明显升高(P<0.05),而miR-350-3p表达降低(P<0.05);与模型组比较,木瓜发酵物可使小鼠肝指数、肝脏甘油三酯和胆固醇明显降低(P<0.05),TLR4和炎性因子(IL-6、TNF-α)表达降低(P<0.05),而miR-350-3p表达升高(P<0.05)。结论木瓜发酵物可有效改善高脂饲料联合葡聚糖硫酸钠诱导的小鼠非酒精性脂肪肝炎的炎症反应,其机制可能与调控miR-350-3p/TLR4信号通路有关。
- 李晓晓魏承亮刘朝奇刘明靓陈叶梓袁丁张长城袁成福
- 关键词：小鼠
- 木瓜不同萃取部位对肝细胞脂肪变性的保护作用
- 覃玉娥沈雪莲刘朝奇
- 一种五子衍宗方总多糖的提取方法及其应用
- 本发明提供一种提取五子衍宗方总多糖的提取方法及其在治疗肝损伤等疾病上的应用。取干燥药材，75%乙醇浸泡过夜，水回流提取2次，合并滤液减压浓缩后加入95%乙醇至终浓度60%，静置过夜，过滤，沉淀用丙酮洗涤，得五子衍宗方总多...
- 袁丁张长城王婷刘朝奇赵海霞周志勇顿耀艳黄威峰
- miRNA在宫颈癌早期诊断中的应用及其价值探讨被引量：11
- 2012年
- 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，在世界女性癌症发病率中排第2位，病死率排第5位。宫颈癌的发生、发展和转归是一个极其复杂的多阶段、多基因调控异常的过程。研究表明miRNA在细胞代谢、增殖、分化和凋亡等生物学过程中发挥着重要的调节作用，miRNA能够识别特定的目标mRNA．
- 汤文凡刘朝奇佐满珍
- 关键词：MIRNA宫颈癌妇科恶性肿瘤癌症发病率
- 中药竹节参资源品质评价、规范化种植、药效机理研究与应用
- 袁丁张长城王婷廖朝林刘朝奇周志勇张美德邹坤顿耀艳赵海霞蔡三金孙志伟艾伦强任东明何毓敏
- 该项目属于人口与健康领域。主要内容及创新：该项目对国内竹节参的资源进行了较系统的调查，明确了野生竹节参的资源储量及其主要分布，建立了竹节参的显微观察和基因鉴定方法；运用HPLC指纹图谱法对不同地区与不同品种的竹节参品质质...
- 关键词：
- 关键词：中药竹节参
- 基于RAPD标记竹节参及其近缘植物的品种鉴别
- [目的]通过RAPD分子标记技术获得竹节参及其近缘植物(人参、西洋参、三七以及竹节参变种狭叶竹节参、羽叶竹节参、珠子参)的DNA指纹图谱,根据特异性条带,构建人工绘制植物品种鉴定图(MCID),实现中药竹节参及其近缘人参...
- 周志勇许成李菁刘朝奇袁丁
- 关键词：竹节参
