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大鼠肝微粒体法评价20种中药有效成分对CYP2C9酶的作用被引量：4: 2013年; 目的建立体外大鼠肝微粒体中CYP2C9酶活性测定方法,并以此方法评价20种中药有效成分单体对大鼠CYP2C9酶的作用。方法以双氯芬酸(Diclofenac)为探针,在实验组大鼠肝微粒体孵育体系中加入20种中药有效成分单体,在37℃水浴温孵15 min后冰乙腈终止反应,HPLC测定各孵育体系中探针药物的代谢产物4'-羟基双氯芬酸的转化率,并与对照组比较其差异来评价各有效成分对CYP2C9酶活性的作用。结果 4'-羟基双氯芬酸、双氯芬酸及其内标香豆素三者分离良好且无其他内源性物质干扰;动力学考察表明双氯芬酸在0.25 mg/mL的大鼠肝微粒体体系中孵育15 min,测得酶动力学参数V max为0.145 6 nmol/(min·mg),K m为8.270μmol/L;抑制实验考察发现:黄芩素、蛇床子素、大黄素、獐牙菜苦苷、淫羊藿苷、白藜芦醇实验组中4'-羟基双氯芬酸转化率分别为(402.60±10.58)、(210.90±10.26)、(414.46±10.32)、(509.83±26.45)、(355.44±15.87)、(387.34±22.16)pmol/(min·mg),显著低于对照组[(735.80±17.27)pmol/(min·mg),P<0.05],其他中药成分实验组与对照组比较,其转化率无统计学差异。结论建立了中药有效成分对CYP2C9酶作用的体外大鼠肝微粒体研究方法,并初步评价了黄芩素、蛇床子素、大黄素、獐牙菜苦苷、淫羊藿苷、白藜芦醇对CYP2C9具有抑制作用,在临床联合用药中需注意其可能引起的药物-药物相互作用。; 张远冬刘学庆郭延垒张有金石亮王二豪于超; 关键词：大鼠肝微粒体 CYP2C9 中药有效成分

生长抑制特异性蛋白1(Gas1)在早孕小鼠子宫内膜蜕膜化中的作用: 2020年; 该文旨在探讨生长抑制特异性蛋白1(growth arrest specific 1,Gas1)在早孕小鼠子宫内膜中的表达规律以及其在子宫内膜蜕膜化中的作用。通过免疫组化、Western blot和RT-qPCR检测Gas1在正常妊娠小鼠、假孕小鼠子宫内膜中的表达变化;分别构建体内小鼠子宫人工诱导蜕膜化模型和体外小鼠原代子宫内膜基质细胞人工诱导蜕膜化模型,通过Western blot和RT-qPCR检测Gas1在两种模型中的表达;在分离的小鼠原代子宫内膜基质细胞中过表达Gas1,通过Western blot、RT-qPCR和流式细胞术等方法检测其对蜕膜化、增殖和凋亡的影响;通过Western blot检测Gas1在人正常早孕蜕膜组织和自然流产蜕膜组织中的表达。结果表明,Gas1在小鼠孕D5、D6、D7的着床点表达显著低于着床旁;在体内和体外人工诱导蜕膜化模型中,Gas1在诱导组的表达明显低于非诱导组;而Gas1的上调则可通过影响细胞增殖和凋亡抑制蜕膜化。此外,Gas1在自然流产患者子宫内膜组织中的表达明显高于正常早孕组。该研究初步表明了Gas1可能通过介导细胞增殖和凋亡,影响小鼠子宫内膜基质细胞蜕膜化,从而在调控胚胎着床过程中起重要作用。; 谭淇蔓徐翰婷李南燕刘学庆何俊琳丁裕斌王应雄高茹菲陈雪梅; 关键词：胚胎植入凋亡

高胰岛素增加早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管紧张素Ⅱ的表达: 2017年; 目的探讨高水平胰岛素对早孕小鼠子宫内膜蜕膜化进程中血管标志分子血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)的影响。方法皮下注射胰岛素构建高水平胰岛素动物模型。将其与正常雄鼠交配后收集妊娠第6、7和8天(D6、D7和D8)的子宫组织及血清,并监测血糖。另将其与输精管结扎的雄鼠交配构建人工诱导蜕膜化模型,于假孕D8收集子宫组织。ELISA检测血清中胰岛素及雌、孕激素的变化,real-time PCR检测子宫内膜Ang-ⅡmRNA的表达,Western blot对子宫内膜Ang-Ⅱ蛋白表达进行检测。结果高胰岛素模型中血清胰岛素水平于妊娠D6、D7和D8均明显升高(P<0.001)、雌激素水平于妊娠D8出现显著下降(P<0.05),孕激素水平于妊娠D6、D8出现明显下降(P<0.01)。与对照组比较,高胰岛素模型中子宫内膜组织中Ang-Ⅱ的mRNA及蛋白的表达显著增加(P<0.05)。结论高胰岛素增加孕鼠蜕膜化进程中子宫内膜组织Ang-Ⅱ的表达,从而影响子宫内膜蜕膜化进程中的血管生成。; 陈文琪张晨王应雄何俊琳刘学庆陈雪梅穆欣艺丁裕斌高茹菲; 关键词：胰岛素血管生成

早孕小鼠子宫内膜mTOR基因表达增高被引量：2: 2008年; 利用实时荧光定量PCR、原位杂交法、免疫组化(SP法)和Western印迹法分别检测未孕、假孕及孕d3、d4、d5、d6、d7小鼠子宫内膜哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin,mTOR)mRNA和蛋白质的表达,研究mTOR基因在早孕小鼠子宫内膜的表达规律。结果显示妊娠子宫内膜组织mTOR的表达较未妊娠的子宫内膜组织显著增加(P<0.05);着床窗期表达最高(d4,d5),且与其他妊娠各期比较差异有统计学意义(P<0.05);原位杂交和免疫组化分析显示mTORmRNA和蛋白质表达主要在子宫内膜基质细胞,与上皮细胞各组比较差异有统计学意义(P<0.05)。研究表明mTOR在子宫内膜基质细胞的规律性表达所调控的细胞生长、增殖和分化可能是胚胎正常着床的分子机制之一。; 曾兰何俊琳丁裕斌陈雪梅王应雄刘学庆; 关键词：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白胚泡着床子宫内膜实时荧光定量PCR 原位杂交

小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A的表达被引量：1: 2004年; nm23家族除与肿瘤转移抑制有关,它还参与调节正常细胞的发育、增殖、分化及凋亡等过程。运用RT-PCR、Western blot 和免疫组织化学技术,分析小鼠胚泡黏附时子宫内膜着床点和着床旁组织nm23-M1/NDPK A 的表达,以未交配鼠作对照,为进一步阐明胚泡着床的机制提供有意义的实验依据。RT-PCR 结果显示,小鼠胚泡黏附时子宫内膜nm23-M1/NDPK A mRNA 表达明显高于对照组,并且着床点明显高于着床旁,Western blot 和免疫组织化学分析nm23-M1/NDPK A 蛋白表达,也得到一致的结果。提示nm23-M1/NDPK A 参与胚泡着床这一重要生命活动过程。; 潘卫王应雄黎刚杨戎何俊琳刘学庆; 关键词：着床 RT-PCR 小鼠胚泡子宫内膜胚胎

Hsa-miR-193b抑制人子宫内膜腺癌细胞株HEC-1B侵袭能力被引量：4: 2011年; 目的探讨Hsa-miR-193b对人子宫内膜腺癌细胞系HEC-1B侵袭的影响及其相关机制。方法将Hsa-miR-193b模拟物(mimics)、Hsa-miR-193b抑制剂(inhibitor)转染HEC-1B细胞,Real-time PCR证实转染是否成功;Transwell小室法检测转染Hsa-miR-193b mimics后HEC-1B细胞的侵袭能力;通过miRGen、Targetscan、Pictar数据库筛查Hsa-miR-193b指向与侵袭相关的靶基因;Real-time PCR检测转染Hsa-miR-193b mimics转染组和对照组mRNA水平;Western blot检测各组GRB7蛋白表达的水平。结果①Hsa-miR-193b mimics、Hsa-miR-193b inhibitor转染HEC-1B细胞成功,两转染组Hsa-miR-193b表达水平与未转染组比较差异有统计学意义(P<0.05)。②转染Hsa-miR-193b mimics组与对照组比较,肿瘤细胞的侵袭能力明显降低(P<0.05)。③转染后,靶基因GRB7蛋白Hsa-miR-193b mimics组表达下降(P<0.05)、Hsa-miR-193b inhibitor组表达增加(P<0.05),且各组GRB7 mRNA水平无显著变化。结论在HEC-1B中转染Hsa-miR-193b mimics能下调GRB7蛋白表达,并抑制HEC-1B细胞的侵袭。; 李荣陈雪梅何俊琳丁裕斌杨德辉许皓郑安舜刘学庆; 关键词：子宫内膜癌

小鼠胚胎白血病抑制因子基因表达研究: 2000年; 目的　探索白血病抑制因子（LIF）基因在小鼠胚泡着床后有无表达。方法　采用RT-PCR技术对孕龄5d、 7d、10d、12d、和15d的小鼠胚胎（共50个，每组 10个）LIF基因表达进行检测。结果　在孕龄 5d的二个胚胎和孕龄 7d的一个胚胎中检测到LIF基因弱表达，而在孕龄10d以上的胚胎中均未发现有LIF基因表达。结论　推测LIF基因的表达在小鼠胚胎组织中受到限制。; 何俊琳王应雄翁亚光刘学庆陈雪梅; 关键词：白血病抑制因子小鼠 RT-PCR 基因表达

人绒毛外滋养层细胞HTR-8/SVneo中Toll样受体mRNA的表达及对吲哚胺2,3-双加氧酶mRNA水平的影响被引量：1: 2013年; 目的系统检测人绒毛外滋养细胞HTR-8/SVneo中Toll样受体(TLR)mRNA的表达情况,定量分析TLRs配体刺激前后吲哚胺2,3双加氧酶(indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO)mRNA的表达差异。方法 RT-PCR检测HTR-8/SVneo细胞中TLR 1-10mRNA的表达情况;实时荧光定量RT-PCR检测TLR3、TLR4、TLR7/8、TLR9配体刺激前后IDO mRNA表达水平。结果 HTR-8/SVneo细胞中有IDO及TLR 1-10 mRNA表达;在48 h内IDO mRNA表达随着时间延长,呈升高趋势;IDO mRNA的表达与培养基营养状况相关;TLRs配体刺激后,除TLR-3转录水平表达下调外,TLR-4、7、8、9 mRNA表达均上调;poly(I∶C)刺激后IDO mRNA表达低于正常组,IFN-γ刺激后表达高于正常组(P<0.05)。结论 TLRs mRNA的表达提示该细胞具有抗感染作用;HTR-8/Svneo细胞中IDO mRNA的表达与母胎界面营养状况相关;TLRs配体刺激剂对TLRs及IDO mRNA表达的影响不仅验证了TLRs的功能活性,而且提示了IDO在抗病原体免疫应激中可依赖TLRs途径发挥作用。; 许巍杨贵波端家忠王越姚文荣刘学庆陈雪梅丁裕斌王应雄何俊琳; 关键词：TOLL样受体

不孕女性子宫内膜LIF基因表达研究被引量：1: 2001年; 王应雄翁亚光何俊琳刘学庆陈雪梅; 关键词：不孕症子宫内膜女性白血病抑制因子基因表达

多媒体技术应用于医学本科教学的调查分析被引量：3: 2005年; 对500名医学本科生进行问卷调查,了解使用多媒体辅助教学技术的必要性和学生对多媒体教学的看法。调查表明,近70%的学生对多媒体课堂教学具有较大兴趣,86%以上的学生认为多媒体教学对学习有较明显的帮助。同时,近60%的学生认为多媒体的使用应视教学内容而定,超过50%的学生认为在多媒体教学中非常有必要使用板书,75%左右的学生认为在多媒体教学中需要配合其他辅助媒体手段的使用,近60%的学生认为多媒体教学不可以取代传统教学。; 何俊琳王应雄王亚雄刘学庆; 关键词：多媒体技术医学教学问卷调查

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刘学庆

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