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流感病毒RNA聚合酶亚基PA6片断的克隆及表达被引量：3: 2004年; 目的将流感病毒RNA聚合酶PA6亚基片段进行亚克隆、表达,获得重组的亚克隆多肽,为进一步研究PA6亚基功能奠定基础。方法以PA亚基cDNA为模板,用PCR方法扩增出PA6片段,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE32重组,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定,IPTG诱导各亚克隆系高效表达,优化表达条件。结果PCR法扩增出402bp的片段,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒,在E.coliM15中表达得到相对分子量约为17KD的重组蛋白,获得重组多肽。结论成功地亚克隆及表达了流感病毒RNA聚合酶PA6亚基。; 赵宏宇赵育莹曲章义郑宏霞刘勇杨宝峰; 关键词：流感病毒 RNA聚合酶亚克隆

重组人3型腺病毒六邻体蛋白纯化及抗原性检测被引量：9: 2005年; 目的纯化重组人3型腺病毒六邻体蛋白并检测其抗原性。方法在原核表达系统中高效表达重组人3型腺病毒六邻体蛋白。利用Ni-NTA琼脂糖亲和层析柱进行蛋白纯化。用纯化的重组六邻体蛋白免疫新西兰家兔,利用免疫印迹技术检测其血清中抗体效价以鉴定该蛋白的免疫原性和反应原性。结果得到纯化的重组人3型腺病毒六邻体蛋白,该蛋白免疫后产生高效价抗体,该抗体能与重组六邻体蛋白、含有该蛋白的重组工程菌株以及人3型腺病毒发生特异性的免疫印迹反应,证明该重组六邻体蛋白具有良好的抗原性和3型腺病毒特异性。结论所获得的重组人3型腺病毒六邻体蛋白具有良好的抗原性和特异性,为开发基因工程疫苗奠定了基础。; 郑红霞刘勇曲章义郭彩玲王立群崔洪波; 关键词：腺病毒蛋白纯化抗原性

流感病毒RNA聚合酶重组质粒pQE32-PB2-1转化效率的实验研究: 2004年; 目的:甲型流感病毒RNA聚合酶PB2-1亚基的基因工程重组质粒pQE32-PB2-1转化入受体菌,并优化转化条件,以建立其高效、快速的转化体系.方法:以大肠杆菌DH5α菌株为受体菌,研究了氯化钙溶液浓度(25、50、75、100mmol/L),热休克温度(30、37、42、50℃),转化时间(15、30、60、75min)及热休克作用时间(60、80、100、120sec)对基因工程重组质粒pQE32-PB2-1转化效率的影响.结果:氯化钙溶液浓度、转化时间、热休克温度、热休克作用时间对转化效率的影响有统计学意义(P<0.05).氯化钙溶液浓度和转化时间之间及热休克温度和热休克作用时间之间分别存在交互作用.结论:在本实验条件下,以75mmol/L氯化钙制备感受态细胞,转化60min,经42℃热休克作用120秒后直接涂平板选择转化子,可获得高效、快速的转化效果.; 赵宏宇刘勇王君郑红霞曲章义; 关键词：重组质粒流感病毒

流感病毒RNA聚合酶的结构和功能研究: 流感病毒严重危害人类的健康,全世界各国对流感的防治都十分重视,以往针对流感病毒表面抗原HA和NA而进行的疫苗预防和抗NA药物的研究,往往因为抗原性的变异导致防治效果不佳。针对对流感病毒感染和生活周期肩负重要功能、又相对稳...; 曲章义赵育莹赵宏宇郑红霞刘勇; 文献传递

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刘勇