凡宁
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
- 供职机构:合肥工业大学医学工程学院更多>>
- 发文基金:安徽省长三角科技联合攻关项目更多>>
- 相关领域:生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- N^+注入诱变选育β-环状糊精葡萄糖基转移酶高产菌株及其发酵条件优化被引量:2
- 2012年
- 以一株产β-环状糊精葡萄糖基转移酶的蜡状芽孢杆菌BC-0801为出发菌株,利用10keV,剂量为40×2.5×1013ions/cm2氮离子进行诱变选育,获得一株高产β-环状糊精葡萄糖基转移酶的突变体BC-0802。对该突变体BC-0802发酵培养基的碳源、氮源及无机离子进行单因素试验分析,采用3个因素正交试验确定其最佳发酵培养基成分质量浓度及发酵条件为:玉米粉30g/L、酵母浸膏15g/L、K2HPO41g/L,发酵温度30℃、pH 9.0、接种量2%、发酵周期36h。结果表明;突变体的平均酶活力可达3415.8U/mL,相较于出发菌株酶活力提高了3.67倍,且该突变体的遗传稳定性较好。
- 张洪斌凌国庆胡雪芹凡宁
- 关键词:诱变
- 重组环糊精葡萄糖基转移酶温控型工程菌的构建及其培养条件的优化被引量:1
- 2014年
- 采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法从蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)中扩增了β-环糊精葡萄糖基转移酶(β-cyclodextrin glucanotransferase,β-CGTase)基因,将该基因克隆到pBV220质粒中,转化E.coli DH5α,经氨苄青霉素抗性筛选和酶切验证后,得到能表达β-CGTase的重组大肠杆菌E.coli DH5α/pBVcgt。通过对工程菌产酶条件的优化,得到最佳产酶条件为:OD600 nm值达到1.0、初始培养温度30℃、发酵培养基初始pH 8.0、温度梯度诱导39℃培养0.5 h,40℃培养0.5 h,41℃培养1 h,42℃培养2 h。酶活力由优化前的445 U/mL提高到956 U/mL,酶活力提高了1.15倍。温度梯度诱导比直接诱导酶活力提高20%。该酶的克隆表达以及发酵条件的研究表明,该酶能在大肠杆菌原核表达体系中高效表达。
- 凡宁张洪斌凌凯凌国庆胡雪芹
- 关键词:蜡状芽孢杆菌工程菌
- 重组β-环糊精糖基转移酶工程菌的构建、表达及其应用研究
- 近年来随着环糊精的应用越来越广泛,β-环糊精糖基转移酶作为β-环糊精生产过程中的关键酶也因此成为了国内外研究者的热点。 论文通过PCR方法从温控型工程菌 DH5α/pBV220cgt中得到蜡状芽孢杆菌的β-环糊精糖基转...
- 凡宁
- 关键词:酶学性质工程菌基因表达