万大方
- 作品数：142 被引量：463H指数：12
- 供职机构：上海市肿瘤研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 人乙肝病毒转基因小鼠肝脏形态观察和DNA图象分析初报被引量：3
- 1995年
- 观察了３２例２３～５５日龄人乙肝病毒转基因小鼠的肝脏形态，发现１７例小鼠的部分肝细胞巨大，核呈圆形、椭圆形或不规则形，核膜厚，核染色质粗大、浓染，核仁大而明显，核质比例大，肝小叶结构基本完整。其中的７例异常肝细胞所占比例较高，但未见典型的肝炎病变。ＤＮＡ图象分析显示，异常细胞核内ＤＮＡ含量增加，ＤＮＡ含量大于五倍体的细胞占各期细胞总数的比例达１２％～５６％。
- 万曙光励雁峰张萍萍万大方钱耕荪顾健人成国祥徐少甫
- 关键词：乙型肝炎病毒转基因小鼠
- 人类17号染色体短臂1区3带3亚带区域内人肿瘤相关基因和编码蛋白
- 本发明公开了一种新的与肿瘤相关的人蛋白HC6，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊断和治疗诸如癌症等疾病的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这种与...
- 顾健人温传俊覃文新赵新泰万大方
- 文献传递
- 转染外源HCAP1基因对B淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖的作用被引量：1
- 2005年
- 目的:HCAP1基因定位于人类染色体17p13．3,此区域在多种肿瘤组织呈杂合性缺失,本研究旨在探 讨HCAP1外源基因产物对B淋巴瘤细胞系Raji细胞增殖的作用。方法:应用脂质体介导法,将HCAP1基因转染Raji 细胞,经G418筛选、获得稳定表达外源HCAP1基因的细胞,用台盼蓝活细胞计数、绘制生长曲线、软琼脂集落培养及 BrdU(5溴-2’脱氧尿嘧啶)标记法,观察HCAP1基因产物对Raji细胞增殖的作用。结果:与转染空载体的对照细胞 比较,稳定表达外源HCAP1基因的细胞生长速度明显减慢,倍增时间明显延长,细胞集落形成数明显减少,BrdU掺 人细胞比例降低。结论:外源HCAP1基因产物的过表达对Raji细胞的增殖有抑制作用。
- 郭列平王嵘吴向华杜均祥牧启田孙奋勇万大方顾建人
- 关键词：淋巴瘤RAJI细胞
- 人类17p13.3区域内人肿瘤相关基因CT120及其编码蛋白
- 本发明公开了一种新的与肿瘤相关的人蛋白CT120，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于诊断和治疗诸如癌症等疾病的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这...
- 万大方顾健人何祥火
- 文献传递
- 染色体17p13.3区段肝癌等恶性肿瘤相关基因群的分离与功能研究
- 顾健人万大方赵新泰何玫覃文新李锦军何英华黄薇
- 1996年10月-2003年7月，由国家“863”高新技术发展规划资助，进行了研究。以中国高发肿瘤之一的肝癌为材料，用微卫星(MSA)和比较基因组杂交(CGH)法完成了60例肝癌样本的全基因组扫描，确定基因组不稳定的最高...
- 关键词：
- 关键词：染色体肝癌恶性肿瘤
- 小核糖核酸及其应用
- 本发明公开了与肝癌预后有关的特异性表达的小核糖核酸，本发明还公开了有关该小核糖核酸的用途，例如含有特异性地针对所述小核糖核酸的探针，用于预测肝癌预后的辅助性检测试剂或试剂盒等。
- 何祥火顾健人杨胜利万大方李文晰
- 文献传递
- 一个新基因的两种剪接体在人肺癌细胞中不同功能的研究
- 何祥火万大方顾健人潘志美姚明魏霖李锦军张萍萍贺丽苹俞晔
- 本研究列入国家重点基础研究发展规划(973)(G1998050209)和国家高技术研究发展计划(863)(2005BA711A01)。 研究时间：2000年～2006年 本研究以我国高发肿瘤之一肺癌为材料，用电子克隆...
- 关键词：
- 关键词：人肺癌信号转导
- 以PAC和BAC克隆为探针筛选cDNA文库被引量：7
- 2000年
- 目的 建立噬菌体P1衍生的人工染色体 (PAC)和细菌人工染色体 (BAC)筛选人正常肝cDNA文库的方法 ,并期望分离到与肝癌相关的新基因。方法 用位于 17p13.3肝癌杂合性缺失区内的PAC5 79和BAC15 2 9克隆为探针 ,以噬菌斑杂交筛选法筛选人正常肝cDNA文库 ,并对分离出的cDNA阳性克隆进行部分测序和计算机序列比较及Southern杂交分析 ,进一步确定可能与肝癌相关的新基因。结果 以PAC5 79为探针 ,筛选出78个阳性克隆 ,经初步分析 ,其中 18个为可能的肝癌相关新基因。以BAC15 2 9为探针 ,筛选出 8个阳性克隆 ,经初步分析 ,其中 5个为可能的肝癌相关新基因。结论 以PAC和BAC克隆为探针筛选cDNA文库是一种有效的表达序列分离法 。
- 韩力薇覃文新赵新泰黄弋张萍萍万大方顾健人
- 关键词：CDNA文库杂交筛选克隆PACBAC
- 转染外源HC56基因对Jurkat细胞足叶乙甙作用敏感性的研究被引量：3
- 2002年
- 目的 探讨HC5 6基因与化疗敏感性的关系。方法 把HC5 6基因转染Jurkat细胞 ,经G418筛选 ,获得稳定表达外源HC5 6基因的细胞克隆后 ,应用MTT法 ,观察HC5 6基因产物对Jurkat细胞拓扑异构酶Ⅱ抑制剂足叶乙甙 (etoposide ,VP16)敏感性的影响。结果 HC5 6基因转染Jurkat细胞 ,在 1μg ml、10 μg ml、5 0 μg ml浓度的VP16作用下 ,对细胞生长的相对抑制率分别为 5 1.7%± 4.2 % ,45 .1%± 3 .7% ,79.6%± 6.2 % ,明显高于在相应的VP16浓度作用下的PBK CMV空载体转染的对照细胞(分别为 9.5 %± 0 .6% ,7.0 %± 0 .5 % ,10 .2 %± 0 .9% ) (P <0 .0 1)。结论 HC 5
- 牧启田王嵘吴向华杜均样万大方顾建人
- 关键词：JURKAT细胞足叶乙甙化疗敏感性基因转染
- 肝癌中具有高突变率位于染色体17p13.3区的新抑癌基因被引量：2
- 2002年
- 目的 以往研究表明肝癌中染色体 1 7p1 3 .3区有高频率的杂合性缺失。其最小杂合性缺失范围已被确定在D1 7S643至D1 7S1 574位点间 ,而且其中的D1 7S92 6位点有最高的杂合性缺失率。含有该位点的基因组克隆P579已被测序分析 ,在P579范围共有 1 3个新基因。这里报告其中的一个新基因 (命名为肝癌抑癌基因 1 ,HCCS1 )的克隆和特性研究结果。方法 利用直接杂交筛选方法获得基因组克隆P579中的基因克隆。根据HCCS1基因克隆的cDNA序列与基因组序列进行比较确定基因的外显子与内含子。应用RT PCR扩增组织中的HCCS1基因 ,序列测定检查突变。应用免疫组化检测HCCS1在组织中的表达。应用克隆形成试验和裸鼠成瘤试验检测HCCS1的生物学功能。结果 HCCS1有 1 8个外显子 ,cDNA全长约2 .0kb ,蛋白产物定位于线粒体。HCCS1在肝癌组织中有高频率的突变 ,免疫组化检测表明HCCS1在癌旁组织的表达明显高于癌组织。HCCS1转染肝癌细胞明显抑制其克隆的形成及在裸鼠体内的成瘤。
- 赵新泰李锦军何英华过建英赵瑞皎叶芸万大方顾健人
- 关键词：肝细胞癌抑癌基因染色体基因克隆免疫组化法
