丁国华
- 作品数：77 被引量：705H指数：14
- 供职机构：哈尔滨师范大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金黑龙江省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学环境科学与工程更多>>
- cDNA-AFLP技术及在差异表达基因克隆上的应用被引量：21
- 2007年
- cDNA-AFLP技术是在AFLP技术基础上发展起来的主要用于研究基因差异的技术,具有高效可靠的优点,受到研究者的青睐,被广泛应用于包括植物在内的各类生物的基因表达的研究中。简要阐述了cDNA-AFLP技术的原理,重点讨论了操作过程中可能出现的问题和技术关键,并就该技术与其他差异表达技术进行了比较,以说明其在克隆差异表达基因上的优势,还简要列举了一些在抗病育种等领域的应用实例。
- 于虹丁国华
- 关键词：CDNA-AFLP
- 黄瓜抗病基因同源序列的克隆及其对霜霉病抗病基因标记的研究
- 由古巴假霜霉菌(Pseudoperonospora cubensis Rostow)引起的黄瓜霜霉病(Downymildew)是当前严重影响黄瓜生产的主要病害之一,1868年首次被发现,近年来日趋严重.防治霜霉病可采取喷...
- 丁国华
- 关键词：黄瓜抗病基因同源序列霜霉病分子标记种质资源
- 黄瓜NBS类型抗病基因同源序列的克隆与分析被引量：45
- 2005年
- 简要报道利用简并引物从黄瓜基因组DNA中分离得到15条NBS类型RGA,登录GenBank获得登录编号分别为AY555482-AY555495和AY545993。其中10条为可通读序列,与已报道的甜瓜RGA有较高的同源性。
- 丁国华秦智伟刘宏宇周秀艳池春玉王志坤
- 关键词：黄瓜RGANBS
- 黄瓜RGA基因的半定量RT-PCR表达分析被引量：6
- 2010年
- 以黄瓜(Cucumis sativusL.)抗霜霉病品种东农129为材料,利用RT-PCR半定量法研究了接种霜霉病菌(Pseudoperonospora cubensisRostow)、喷施水杨酸(SA)和氯化钙(CaCl2)等不同处理对黄瓜抗病基因类似序列(RGA)表达的影响.结果表明:CsRGA1和CsRGA5基因的表达受霜霉病菌的侵染而启动或加强,外施SA和CaCl2都能够增强其表达;CsRGA4和CsRGA8属于组成型表达基因,其表达可能与霜霉病菌的侵染无关;CsRGA2的表达与外施SA和CaCl2缺乏密切关联.
- 丁国华许春梅于虹周秀艳秦智伟
- 关键词：黄瓜半定量RT-PCR
- 黄瓜种质资源遗传多样性的RAPD分析
- 本文利用RAPD技术对国内外不同生态型的53份黄瓜种质资源进行遗传多样性研究.从120条随机引物中得到20条稳定性、可重复性好的引物对53份黄瓜基因组DNA进行扩增,共扩增出147条带,78.9﹪扩增带表现为多态性.聚类...
- 王志坤丁国华周秀艳秦智伟
- 关键词：黄瓜种质种质资源
- 文献传递
- 一品红的北方繁殖技术
- 2003年
- 池春玉丁国华徐启江彭一良杨守志
- 关键词：一品红繁殖技术扦插繁殖离体繁殖
- 番茄LeRma1基因的克隆与表达
- 2015年
- 以番茄‘哈大粉801’为试材,利用RT-PCR技术,克隆得到1个E3泛素蛋白连接酶基因LeRma1(GenBank登录号XM_004243764.1)。对LeRma1基因进行序列分析,并对LeRma1基因在番茄植株的不同部位以及在非生物胁迫(干旱、盐、碱、高温、低温)下的表达和生理特性进行研究,为培育和改良番茄品种提供理论依据。结果表明:(1)序列分析显示,LeRma1基因的cDNA全长序列729bp,编码242个氨基酸,分子量为27.05kD,理论pI 7.97;同源分析显示,番茄LeRma1蛋白与马铃薯的一致性最高(91%)。(2)半定量PCR检测表明,LeRma1基因在番茄根、茎、叶、花、果实中均有表达,且表达差异不明显。(3)干旱胁迫下,LeRma1基因在番茄叶片中优势表达,而在整个干旱过程中根部的LeRma1基因表达量变化不明显;抗旱相关基因LEA、DREB2A、ABI3在干旱胁迫过程中,番茄叶片中均有表达,且其表达量呈上升趋势,而在根部DREB2A、ABI3基因基本没有检测到。(4)干旱胁迫过程中,番茄植株中丙二醛(MDA)含量呈显著升高趋势,质膜系统严重损伤,体内保护酶(SOD、POD、CAT)活性上升,且根部活性总体明显高于叶片。(5)在非生物逆境(盐、碱、高温、低温)胁迫过程中,LeRma1基因在番茄叶片和根部的表达几乎都有增强的趋势,且在叶片中均是胁迫3h后诱导起始增强表达。研究认为,LeRma1基因是一个受干旱胁迫诱导增强表达的基因,且在叶片中优势表达,说明LeRma1基因对植物耐受干旱胁迫所起的作用存在一定的组织差异性,而且LeRma1基因可能参与番茄的干旱应答及信号转导过程,在番茄抵抗其他非生物胁迫中LeRma1基因也可能具有一定的作用。
- 陈默金晓霞于丽杰朱宏丁国华傅文上付畅
- 关键词：番茄克隆
- 应用花粉管通道法导入外源DNA抗赤星病烤烟D<,1>代遗传变异的研究
- 该试验对采用子房注射(ZZ)、切柱头滴加(QD)和柱头滴加(DZ)等花粉管通道技术将抗赤星病烤烟CV87总DNA导入感病烤烟NC89后得到的D<,1>代植株进行了以下几方面的检测分析.这些检测包括株高、株型、叶型、生育期...
- 丁国华
- 关键词：烤烟外源DNA导入抗赤星病花粉管通道法
- 外源表油菜素内酯对镉胁迫下龙葵(Solanum nigrum L.)的缓解作用被引量：4
- 2015年
- 为了解外源表油菜素内酯(EBL)对龙葵镉(Cd)胁迫的调节作用,对100μmol L-1 Cd胁迫处理7 d和20 d后的龙葵喷施10-9、10-5 mol L-1 EBL 7 d,研究其生长状况、不同器官的生理生化作用以及3个泛素基因(Rma1、BUB、UBC)的表达变化.结果表明:与对照相比,Cd胁迫下龙葵叶片和根部MDA含量、抗氧化酶(POD、SOD、CAT)活性升高,表明Cd对龙葵有一定的毒害作用.与单一Cd胁迫相比,外源EBL(10-9、10-5 mol L-1)处理下龙葵株高、根长、干重、鲜重显著(P<0.05)增加,而叶绿素含量增加不显著.与单一Cd胁迫7 d相比,EBL(10-9、10-5 mol L-1)+Cd处理组叶片和根部抗氧化酶活性增加不显著,其中10-9 mol L-1 EBL+Cd处理组叶片MDA含量显著(P<0.05)降低,泛素基因UBC、Rma1表达上调;10-5 mol L-1EBL+Cd处理组叶片Rma1表达上调.与单一Cd胁迫20 d相比,10-9 mol L-1 EBL+Cd处理组叶片和根部MDA含量降低显著(P<0.05),叶片和根部SOD、CAT活性以及叶片POD活性增加显著(P<0.05),叶片Rma1基因和根部BUB、UBC基因表达上调;10-5 mol L-1 EBL+Cd处理组叶片BUB、UBC基因和根部UBC基因表达上调.本研究表明Cd胁迫后,EBL通过提高叶片和根部抗氧化酶系统活性,减轻膜脂过氧化程度来缓解Cd胁迫对龙葵的损伤,并且泛素Rma1、BUB、UBC基因参与该过程,且表达存在时空特异性;当Cd胁迫20 d时,以10-9 mol L-1 EBL对龙葵的缓解作用更为显著.
- 李洋金晓霞丁国华朱宏于丽杰
- 关键词：CD胁迫泛素基因
- 中华水韭耐重金属胁迫基因的分离
- 2014年
- 以中华水韭为试验材料,用200μmol·L-1的氯化镉溶液和2g·L-1的硝酸铅分别对其进行胁迫处理,采用cDNA-AFLP技术分离差异表达基因,通过Blast(The Basic Local Alignment Search Tool)同源性比对分析基因功能,为寻找耐重金属胁迫相关基因和揭示水韭对环境变化响应的分子机理奠定基础。试验结果如下:共有15条差异条带被成功克隆和测序,其中13条差异片段可以在数据库找到与之同源的序列。镉胁迫差异表达TDF9与ABC型(ATP-binding cassette)转运蛋白C亚族基因有84%同源性。铅胁迫差异表达TDF4和TDF7与环形锌指蛋白(RING Zinc Finger Protein)有75%同源性。这些基因的发现为揭示水韭对环境变化敏感的分子机理奠定基础。
- 曹思源王芳丁国华李佳琦高歌安梦妍
- 关键词：中华水韭重金属胁迫铅镉CDNA-AFLP
