闫洪超 作品数:37 被引量:88 H指数:5 供职机构: 徐州医学院附属医院 更多>> 发文基金: 徐州市科技发展基金 江苏省高校自然科学研究项目 徐州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
转染Elf5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力及凋亡变化 被引量:3 2016年 目的观察转染Elf5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力及凋亡变化。方法将目的基因Elf5+EGFP克隆到载体pc DNA3.1中,构建重组质粒pc DNA3.1-Elf5+EGFP,转入感受态细胞,挑选阳性克隆菌落,大量抽提质粒。培养人卵巢癌干细胞并分为重组质粒组、空质粒组、空白对照组。重组质粒组转染pc DNA3.1-Elf5+EGFP真核表达载体,空质粒组转染pc DNA3.1-EGFP空载质粒,空白对照组不进行转染。采用Western blotting法检测Elf5蛋白。分别于转染后1、2、3、4、5、6 d采用MTT法检测细胞增殖能力;转染24 h后采用侵袭小室检测细胞侵袭能力并计算穿膜细胞数;转染24 h后流式细胞术检测不同周期细胞及凋亡细胞。结果成功构建了pc DNA3.1-Elf5+EGFP真核细胞表达载体,重组质粒组细胞中Elf5蛋白稳定表达。转染后1、2、3、4、5、6 d重组质粒组细胞增殖能力低于空白对照组和空质粒组(P均<0.05)。重组质粒组穿膜细胞数少于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组G_0/G_1期细胞百分比高于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。重组质粒组细胞凋亡率高于空质粒组、空白对照组(P均<0.05)。结论转染ELF5基因的人卵巢癌干细胞增殖、侵袭能力受到抑制,细胞凋亡增多。 仇影影 谢肖磊 邱玲琳 闫洪超关键词:卵巢癌 肿瘤干细胞 细胞增殖 5-杂氮-2'-脱氧胞苷对卵巢癌HO8910细胞WWOX基因甲基化状态及其生物学行为的影响 被引量:1 2012年 目的:检测卵巢癌HO8910细胞株中WWOX基因甲基化状态,探讨5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对WWOX基因甲基化状态及其对HO8910细胞株生物学行为的影响。方法:将HO8910细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)方法检测两组细胞WWOX基因甲基化状态;蛋白印迹法检测两组细胞WWOX蛋白的表达。体外实验:分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、体外侵袭实验及流式细胞仪等分析5-Aza-CdR对HO8910细胞生物学活性的影响。体内实验:用处理前后的HO8910细胞株分别接种于BALB/c裸鼠腹腔,观察两组裸鼠的生存时间及肿瘤生长情况,并采用Western blot分别检测两组裸鼠肿瘤组织中WWOX蛋白的表达。结果:(1)WWOX基因在HO8910细胞株中呈甲基化状态,经5-Aza-CdR处理后呈去甲基化状态。(2)Western blot检测结果显示,5-Aza-CdR处理组WWOX蛋白表达水平高于对照组(0.71±0.023 vs 0.13±0.012,P<0.05)。(3)5-Aza-CdR处理组各时间点的细胞增殖能力较对照组下降(P<0.05)。(4)体外侵袭实验显示,5-Aza-CdR处理组穿膜细胞数较对照组少(92.2±4.7 vs 172.1±5.2,P<0.05)。(5)流式细胞检测显示5-Aza-CdR处理组中67.13%的细胞阻滞于G0/G1期,较对照组高(21.52%,P<0.05)。(6)裸鼠体内实验表明,5-Aza-CdR处理组裸鼠体内的致瘤能力明显低于对照组,且5-Aza-CdR处理组WWOX蛋白表达水平明显高于对照组(0.65±0.031 vs 0.25±0.047,P<0.05)。结论:5-Aza-CdR能逆转HO8910细胞WWOX基因甲基化状态,并抑制细胞增殖。 闫洪超 仝建业 于楠 韩秋峪 魏敏 陆晓媛关键词:卵巢肿瘤 WWOX基因 人卵巢癌HO8910细胞株中干细胞的筛选及生物学特性鉴定 被引量:3 2012年 目的筛选人卵巢癌HO8910细胞株中的干细胞并观察其生物学特性。方法以常规培养的HO8910细胞为基础(对照组),采用紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法筛选卵巢癌干细胞(干细胞组)。对筛选出的干细胞分别采用MTT法检测细胞的增殖情况;体外侵袭实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测CD24、CD44、CD45、CD133、CD117表达及Hoechst33342染色阳性率;Western blot检测ABCG2、Nanog、Oct4及BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达,并对卵巢癌干细胞在裸鼠体内的致瘤性进行检测。结果 (1)在紫杉醇结合无血清培养筛选条件下,部分HO8910细胞能够较好的生长,具有干细胞特性。(2)干细胞组各时间点的细胞增殖能力较对照组明显增强。(3)干细胞组穿膜细胞数较对照组明显增多。(4)干细胞组CD24+、CD44+、CD45+的阳性表达率与对照组比较,差异均无统计学意义;CD133+、CD117+的阳性表达率及Hoechst33342染色阳性率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(5)干细胞组ABCG2、Nanog、Oct4、BCRP等干细胞标志基因的蛋白表达水平与对照组比较均明显增强。(6)干细胞组细胞在裸鼠体内致瘤性明显高于对照组。结论紫杉醇结合无血清培养基悬浮培养法能够筛选出具有干细胞特征的卵巢癌干细胞;卵巢癌干细胞在体外及体内的生物学特性较普通卵巢癌细胞有很大差异。 闫洪超 于楠 仝建业 陆晓媛 韩秋峪 魏敏关键词:卵巢癌 肿瘤干细胞 TNF-α在妊娠期糖尿病患者胎盘组织中表达的免疫组化研究 被引量:3 2006年 目的分析妊娠期糖尿病患者胎盘组织中TNF-α的表达。方法采用免疫组化染色技术,检测了31例妊娠期糖尿病患者(GDM组)及30例正常妊娠妇女(正常妊娠组)胎盘组织中TNF-α的表达情况。结果GDM组胎盘TNF-α的表达显著高于正常妊娠组。结论TNF-α的表达与妊娠期糖尿病的发生、发展有关,其机制尚需进一步研究。 闫洪超 薛加强 陈淑敏 杜文升关键词:妊娠期糖尿病 TNF-Α 免疫组化 米非司酮在妇科治疗中的应用研究 2012年 目的:探讨米非司酮在妇科治疗中的应用前景。方法:终止妊娠时,研究组患者给予米非司酮配伍米索前列醇终止妊娠,对照组患者进行传统刮宫手术治疗。紧急避孕时,大剂量组患者给予25mg米非司酮进行紧急避孕,小剂量组患者给予10mg米非司酮进行紧急避孕。两组患者除米非司酮药物成分有所不同外,药片的性状、大小、颜色、气味等方面应完全相同。结果:米非司酮对患者进行终止妊娠时,在成功流产人数、不完全流产人数以及流产失败人数均无显著性差异的情况下,相较于传统手术终止妊娠患者具有出血量较少、住院时间较短以及并发症较少等优点。米非司酮用于紧急避孕时,大剂量组患者避孕有效率为89.71%,明显高于小剂量组患者有效率72.06%。结论:应用米非司酮不仅能进行终止妊娠和紧急避孕,还能够对患者出现的晚孕促宫颈成熟以及抗肿瘤等进行配合治疗,并具有较高的安全性和有效性。 窦伟丹 闫洪超关键词:米非司酮 妇科 多囊卵巢综合征诱导排卵成功的相关因素分析 2007年 目的探讨氯米芬(CC)诱导多囊卵巢综合征(PCOS)排卵成功的相关因素。方法通过回顾性分析320例1024个周期的排卵率(OR)、排卵周期率(OCR)与临床特征及内分泌指标的关系。结果本组OR70.0%,OCR44.3%,功血、无排卵月经型OCR明显高于继发性闭经型(P<0.005),功血型明显高于月经稀发型(P<0.05);无多毛、非肥胖者OR显著高于多毛和肥胖者(P<0.01)未婚妇女OCR高于不孕和已育者(P<0.025)。LH/FSH≥3、T正常者OCR分别高于LH/FSH<3和T升高者,PRL正常者OR高于PRL升高者(P<0.05)。LH/FSH、T、BMI与OR、OCR及PRL与OR有明显相关性(P<0.05)。结论CC诱导PCOS排卵疗效与月经类型、多毛、肥胖、婚育状态、LH/FSH、T、PRL有关。 张素娟 薛加强 闫洪超关键词:多囊卵巢综合征 排卵 氯米芬 测定血清肌酸激酶用于诊断侵蚀性葡萄胎的初步观察 2001年 目的 探讨血清肌酸激酶 (CK)用于诊断侵蚀性葡萄胎的临床价值。方法 用速率法测定 47例正常早孕妇女 (早孕组 )、2 4例葡萄胎妇女 (葡萄胎组 )、30例侵蚀性葡萄胎妇女 (侵葡组 )的血清CK含量。结果 早孕组CK含量 (77.5± 12 .0 )U/L ,葡萄胎组 (72 .0± 13.6 )U/L ,侵葡组 (175 .6± 39.8)U/L。早孕组与葡萄胎组血清CK含量无显著差异 ,侵葡组血清CK含量明显高于早孕组和葡萄胎组 (P <0 .0 1)。以葡萄胎组CK值 10 8U/L为标准 ,诊断侵蚀性葡萄胎敏感性、特异性、阴性预测值及阳性预测值分别为 90 .0 %、87.2 %、81.8%和 93.2 %。结论 血清CK可以作为诊断侵蚀性葡萄胎的参考指标之一 。 闫洪超 薛加强 邓巧玲 徐银海关键词:侵蚀性葡萄胎 肌酸激酶 血清诊断 借助妇科内镜技术 提高留学生教学质量 2015年 妇科内镜技术是当今妇科领域快速发展的一门新兴技术,目前在临床上常用的妇科内镜包括腹腔镜、宫腔镜和阴道镜。妇科内镜由于其独特的优势,一方面在许多妇科疾病的诊断和治疗方面具有非常重要的作用,另一方面在妇科临床教学方面也具有很大的优越性。将妇科内镜技术合理地应用于我校留学生教学中,增强教学的生动性、趣味性,调动留学生学习的主动性和积极性,提高教学质量。 闫洪超 林小满 韩秋峪 黄红香关键词:妇科内镜技术 留学生 教学质量 妊娠期糖尿病患者血清TNF-α浓度与空腹血糖水平的相关性研究 被引量:3 2006年 目的分析妊娠期糖尿病(GDM)患者血清TNF-α水平及其与血糖水平的相关性。方法选取GDM患者71例,正常孕妇40例作为对照组,测定血糖和TNF-α浓度。结果GDM患者TNF-α水平显著升高,与血糖呈正相关。 闫洪超 陆晓媛 薛加强关键词:妊娠期糖尿病 TNF-Α 血糖 WWOX基因转染对卵巢上皮性癌细胞生长的影响 被引量:5 2008年 目的 研究抑癌基因WWOX对卵巢上皮性癌(卵巢癌)细胞生长的影响,寻求卵巢癌基因治疗的新途径。方法 将携有WWOX基因的真核表达载体体外转染卵巢癌细胞系H08910细胞(重组质粒组),筛选稳定转染的细胞并扩增培养,以转染空载质粒(空质粒组)及未经转染(空白对照组)的H08910细胞作为对照,用蛋白印迹法检测重组质粒组细胞中WWOX蛋白的表达情况。体外实验:分别用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法、体外侵袭实验、琼脂克隆形成实验及流式细胞仪等分析WWOX基因对H08910细胞生物学活性的影响。体内实验:将转染细胞接种于BALB/c裸鼠腹腔,观察裸鼠生存时间和肿瘤生长情况。结果 (1)重组质粒组细胞中WWOX蛋白能稳定表达,空质粒组及空白对照组细胞未检测到WWOX蛋白的表达。(2)MTT比色法检测显示,重组质粒组各时间点的细胞增殖能力较空质粒组及空白对照组明显下降,差异均有统计学意义(P〈0.05)。(3)重组质粒组细胞的琼脂克隆形成率(19.8%)明显低于空质粒组(54.5%)及空白对照组(56.0%),差异有统计学意义(P〈0.05)。(4)流式细胞仪检测显示,重组质粒组中(72.08±o'39)%的细胞被阻滞于G0/G1期,分别与空质粒组[(41.02±1.08)%]及空白对照组[(39.31±0.67)%]比较,差异均有统计学意义(P〈0.05)。(5)体外侵袭实验显示,重组质粒组穿膜细胞数为(89.7±3.1)个,分别与空质粒组[(91.2±1.3)个]及空白对照组[(91.4±1.3)个]比较,差异均无统计学意义(P〉0.05)。(6)裸鼠体内实验表明,重组质粒组裸鼠体内的成瘤能力(包括转移灶数目、转移灶重量及移植瘤最大直径、腹水量)明显低于空质粒组及空白对照组,差异均有统计学意义(P〈0.05)。结论 抑癌基因WWOX可干扰卵巢癌细胞的细胞周期并� 闫洪超 薛加强 陆晓媛 万美荣 冯霞 刘小云关键词:氧化还原酶类 基因 肿瘤抑制 转染