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排序方式：

长期施用氮肥和磷肥对渭北旱塬土壤中氨氧化古菌多样性的影响被引量：8: 2012年; 采用基于氨单加氧酶基因的PCR-RFLP和DNA测序技术,以黄土高原旱地黑垆土为材料,研究长期施用氮肥和磷肥对土壤氨氧化古菌多样性的影响。结果显示,不同施肥处理土壤样品得到的氨氧化古菌的OTU数分别为25(种植不施肥,CK)、21(不施肥不种植,LD)、18(单施氮肥,N)、25(单施磷肥,P)和13(氮、磷共施,NP)。氨氧化古菌的多样性指数H′和优势度指数Ds变化趋势基本相同,分别为P>CK>LD>NP>N和P>CK>NP>LD>N;种群丰富度和均匀度指数在不同处理间变化较大,分别为CK>P>LD>N>NP和P>NP>LD>N>CK。各处理优势氨氧化古菌绝大部分属于Cluster S,少数属于Cluster M,获得的序列全部属于难培养泉古菌门。不同施肥方式的长期定位试验土壤中氨氧化古菌多样性变化较大,而优势氨氧化古菌系统进化定位没有显著变化。; 武传东闫倩辛亮王保莉曲东; 关键词：氨氧化古菌长期施肥群落结构

梭菌氢酶基因部分片段的同源克隆及敲除载体的构建被引量：1: 2012年; 为从分子水平探索典型铁还原菌-梭菌的铁还原能力与其氢酶产氢之间的关系,以从水稻土中分离得到一株具有高铁还原能力和高产氢能力的梭菌为材料,通过同源克隆获得长度为761bp氢酶基因的部分序列。生物信息分析发现,该基因片段覆盖氢酶的活性中心,是氢酶的主要功能结构域。采用Overlap PCR的方法构建含有四环素抗性基因的氢酶基因敲除载体(pMD-19-HTH),以期进一步构建氢酶基因缺失的梭菌突变体,为分析氢酶产氢与铁还原的关系奠定基础。; 闫倩闫苗章王保莉曲东; 关键词：氢酶同源克隆重叠PCR

不同土地利用方式下滨海盐土细菌多样性变化被引量：1: 2011年; 采用细菌16S rDNA的PCR-RFLP技术,以天津滨海盐土为材料,研究农田(S1和S2)、菜地(S3和S4)和果园(S5)3种土地利用方式下5个土样的细菌多样性。结果显示,基于限制性内切酶HhaⅠ和RsaⅠ的PCR-RFLP分析分别得到93、165、115、158和163个酶切类型,除S1和S3存在一个共同的优势类型,比例分别为33.70%和19.50%外,其余样品没有明显的优势类型;采用α多样性测度对试验结果进行统计分析表明,土壤细菌的多样性指数(H′、Ds)和物种丰富度指数(dMa)均为S2>S5>S4>S3>S1,可见不同土地利用方式下,细菌多样性发生变化;基于16S rDNA核酸序列构建的系统发育树表明,测序的26个序列分属于8个类型,其中酸杆菌所占比例最大(34.62%),其次为变形菌纲(23.08%)、厚壁菌门(15.38%)和放线细菌(11.54%),另外有少量硝化螺旋菌纲、绿弯菌纲、芽单胞菌纲和浮霉菌纲的克隆。可见,不同土地利用方式下,滨海盐土土壤的细菌多样性丰富且彼此间存在显著差异。; 张丽闫倩王保莉曲东; 关键词：土地利用方式盐土多样性 PCR-RFLP

梭菌氢酶基因hyd的同源克隆、原核表达以及敲除载体的构建: 土壤中异化铁还原菌的新陈代谢活动影响了地表有机物和矿物的循环，在有机物和重金属污染的生物修复中扮演重要角色。近年来的研究表明，在有机质或H2氧化所偶联的Fe（Ⅲ）还原中，许多微生物可以从中贮存能量以维持生长。乙酸...; 闫倩; 关键词：氢酶同源克隆原核表达; 文献传递

苦荞类过敏原的原核表达及多克隆抗体制备被引量：5: 2011年; 以苦荞种子发育期全长cDNA文库中获得的与甜荞16 kD过敏原同源的基因BALP(Buckwheat Allergen-like protein,BALP;GenBank登录号GO496294)为基础,构建了原核表达载体pET47b-BALP,实现了在大肠杆菌Rosetta gami2(DE3)中的高效表达,并对诱导表达的时间和IPTG的浓度进行了优化。利用钴离子螯合层析纯化了重组蛋白并制备了高效价的抗BALP多克隆抗体。结果表明,克隆的该苦荞类过敏原与已报道的甜荞16 kD过敏原在氨基酸序列上具有83%的相似性,该苦荞类过敏原以包涵体的形式表达,最佳诱导时间为6 h,IPTG浓度为0.4 mmol/L。Western blotting显示天然的BALP仅存在于苦荞种子的清蛋白中。原核表达体系的建立和多克隆抗体的制备为进一步探讨BALP在苦荞麦中的功能以及研究BALP结构与功能的关系奠定了基础。; 李学俊郭彦飞闫倩陈鹏; 关键词：苦荞原核表达多克隆抗体

植物源过敏蛋白被引量：5: 2011年; 植物过敏原是最普遍的一类过敏原,也是与人类关系最密切的一类过敏原。本文简单介绍了植物中蛋白质类过敏原的种类、特性及低敏植物性食品开发等研究新进展。; 陈鹏郭彦飞闫倩

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闫倩