郑天慧
- 作品数:1 被引量:9H指数:1
- 供职机构:中国农业科学院作物科学研究所农业部作物遗传育种重点开放实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 小麦ERF转录因子W17互作蛋白的筛选和解析被引量:9
- 2011年
- 来自小麦的ERF转录因子W17基因参与胁迫应答,过表达W17可显著提高转基因拟南芥的抗旱性和抗病性。本研究构建了小麦cDNA文库,通过酵母双杂技术筛选W17的互作蛋白,进一步解析ERF蛋白的作用机制。将pGBKT7-W17质粒、pGADT7和小麦文库混合转入酵母细胞AH109,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade营养缺陷型平板上培养,挑选直径大于2mm的克隆,在SD/Raf/Gal/X-gal平板上划线培养,筛选蓝色克隆。将筛出的克隆测序、BLAST分析,得到4类与W17相互作用的候选蛋白,分别是胁迫相关功能蛋白、翻译后修饰蛋白、1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(Rubisco)大亚基/小亚基以及功能未知蛋白。互作验证表明,HSP90和PPR蛋白与W17有相互作用关系。这些候选蛋白参与信号转导或免疫过程,暗示W17在植物的逆境信号转导、下游基因转录调控,甚至在翻译过程都有重要作用。
- 邱志刚徐兆师郑天慧李连城陈明马有志
- 关键词:酵母双杂交系统ERF信号转导小麦