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赵郭存

作品数:6 被引量:17H指数:1
供职机构:深圳大学生命科学学院过敏反应与免疫学研究所更多>>
发文基金:国家自然科学基金深圳出入境检验检疫局科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 2篇生物学
  • 1篇轻工技术与工...

主题

  • 5篇克隆
  • 3篇单克隆
  • 2篇单克隆抗体
  • 2篇蛋白
  • 2篇免疫
  • 2篇抗体
  • 2篇变应原
  • 1篇伊蚊
  • 1篇印迹
  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体
  • 1篇杂交
  • 1篇杂交瘤
  • 1篇杂交瘤细胞
  • 1篇牛奶
  • 1篇主要变应原
  • 1篇榛子
  • 1篇鳙鱼
  • 1篇小清蛋白
  • 1篇免疫学

机构

  • 6篇深圳大学

作者

  • 6篇刘志刚
  • 6篇赵郭存
  • 4篇张强
  • 2篇邹菊
  • 1篇易海涛
  • 1篇邬玉兰
  • 1篇吉琼梅
  • 1篇孔小丽
  • 1篇杨波
  • 1篇闫浩
  • 1篇黄钟
  • 1篇夏立新
  • 1篇刘芳

传媒

  • 1篇食品科技
  • 1篇江西师范大学...
  • 1篇免疫学杂志
  • 1篇中国公共卫生
  • 1篇中国病原生物...
  • 1篇食品安全质量...

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2011
  • 1篇2010
  • 1篇2009
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
鳙鱼变应原小清蛋白单克隆抗体制备及鉴定被引量:1
2012年
目的制备、纯化及鉴定抗鳙鱼小清蛋白单克隆抗体。方法以重组鱼主要过敏原小清蛋白(parvalbu-min)为抗原免疫BALB/c小鼠,融合免疫鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤NS-1,半固体培养基法结合有限稀释法筛选稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,杂交瘤细胞株诱生小鼠腹水,采用蛋白A亲和层析法获得纯化抗体,间接ELISA方法和w estern blot鉴定抗体效价和特异性以及与其他过敏源的交叉反应性;采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型。结果共获得抗parvalbumin细胞株7株,1G1,1B5,1A5,2B9,1H4,1B7,1G3。1G1、1B7、1A5、1H4和1G3效价均高于1∶400 000,P/N>2.1;1B5效价高于1∶200 000,2B9效价较低;Western blot检测表明所有抗体均能识别parvalbumin;抗体亚类为IgG1型,1G1,1A5,2B9,1H4,1B7特异性结合parvalbumin,与其他种类过敏原无交叉反应,1G3和1B5与虾和大豆过敏原有交叉反应性,P/N>2.1。结论获得高效价抗体5株,发现parvalbumin与虾、大豆过敏原存在交叉反应性,为建立parvalbumin检测体系提供依据。
张强赵郭存邹菊刘志刚
关键词:变应原小清蛋白单克隆抗体
平榛主要过敏原Corh1单克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
2011年
目的制备和鉴定鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的单克隆抗体(Monoclonal Antibody,McAb)。方法用重组Cor h 1蛋白为免疫原,免疫Balb/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤NS-1细胞融合。通过间接ELISA法筛选分泌特异性McAb的杂交瘤细胞。用杂交瘤细胞株诱导小鼠产生腹水,再用蛋白A亲和层析法纯化抗体。采用Ig类与亚类鉴定试剂盒鉴定该单克隆抗体的Ig亚型;通过间接ELISA、Western Blotting鉴定该McAbs的特性和交叉性。结果获得4株可稳定分泌鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的McAbs,其Ig亚型均为IgG1,均具有良好的效价;ELISA和Western Blotting分析表明该4株单抗均能识别重组Cor h 1蛋白,其中3株单抗能够识别天然平榛提取物。结论成功制备了4株鼠抗平榛主要变应原Cor h 1的单克隆抗体,为建立平榛主要变应原Cor h 1检测及纯化方法奠定了基础。
赵郭存张强邹菊黄钟刘志刚
关键词:主要变应原单克隆抗体杂交瘤细胞交叉性
不同加工方式对牛奶过敏原免疫原性的影响被引量:1
2011年
方法:提取其中奶制品的蛋白质,SDS-PAGE分析组分并用混合血清进行免疫印迹。使用间接ELISA比较原奶和加工过的牛奶的IgG结合能力。结果:实验结果表明酸奶和蛋白酶水解(HA)奶粉的蛋白质组分较其他样品有显著变化,印迹结果显示经煮沸的牛奶、配方奶粉、酸奶和HA奶粉免疫原性明显较低,ELISA结果指示经煮沸的牛奶、配方奶粉、酸奶和HA奶粉特异性IgG结合能力均有不同程度的减小。结论:实验结果表明加热、发酵和水解可能使牛奶免疫原性降低。
张强赵郭存刘志刚
关键词:牛奶免疫原性
花生过敏原Ara h2.02的克隆、表达及免疫学鉴定被引量:13
2010年
通过提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h2.02基因,将反转录的基因连入pMD19-T Simple Vector,提质粒酶切鉴定并测序,将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中,IPTG诱导表达、Western-blotting检测该重组蛋白的免疫原性.测序结果表明:克隆的花生Ara h2.02基因片段全长为519 bp,编码为172个氨基酸,与GenBank中蛋白序列100%相同.诱导表达后的蛋白经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符.Western-blotting结果表明该蛋白能与花生过敏病人混合血清中的IgE结合,具有免疫原性.成功克隆并表达了花生过敏原Ara h2.02,该基因表达的重组蛋白具有良好的免疫原性.
易海涛刘志刚闫浩刘芳赵郭存夏立新
关键词:花生克隆免疫印迹
白纹伊蚊AL-100 30ku蛋白基因的克隆及其原核表达载体的构建被引量:1
2009年
目的克隆白纹伊蚊主要过敏原AL-100 30ku蛋白基因,并构建其原核表达载体。方法RT-PCR克隆白纹伊蚊主要过敏原AL-100 30ku的全长基因,设计简并引物,扩增白蚊伊蚊30ku的完整开放阅读框,与pET-28a载体连接,构建原核表达载体。结果成功克隆白纹伊蚊主要过敏原30ku基因并构建其原核表达载体。该基因含有长度为816bp的开放阅读框,编码271个氨基酸。该蛋白质的分子质量单位为28.33ku,等电点为4.04,编码序列与数据库中已知的白纹伊蚊30ku基因的同源性为99%。结论成功克隆了白蚊伊蚊主要过敏原30ku基因并构建了原核表达载体,为白纹伊蚊主要过敏原30ku蛋白的重组表达和免疫活性鉴定等奠定了基础。
赵郭存刘志刚邬玉兰孔小丽
关键词:白纹伊蚊KU克隆原核表达载体
榛子主要过敏原Cor h 1单克隆抗体识别抗原表位区域的确定
2012年
目的确定已获得的四株榛子主要过敏原Cor h1单克隆抗体识别的抗原表位区域。方法构建谷胱甘肽疏基转移酶(GST)与Cor h1不同截短体的表达载体并表达GST-Cor h1融合蛋白,采用ELISA和Western blot检测单抗与不同融合蛋白的反应,并结合DNAstar表位分析软件推知不同单抗的抗原识别表位区域。结果确定了四株Cor h1单抗的抗原识别表位区域,分别是4G7和2H3抗体的抗原表位位于Cor h1第120~126位氨基酸,5F2和1G4抗体的抗原表位位于Cor h1第43~52位氨基酸。结论四株Cor h1单抗的抗原识别表位区域的确定,为Cor h1的进一步研究和食品安全检测奠定了基础。
赵郭存张强杨波吉琼梅刘志刚
关键词:CORH抗原表位
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