赵艳君
- 作品数：10 被引量：23H指数：3
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院基础医学院基础医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划美国中华医学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 生物素标记DNA探针测定人性别被引量：1
- 1989年
- 白细胞或胎儿绒毛组织染色体DNA经限制酶Hae (?)消化后,用光生物素(photo-biotin)标记人Y染色体特异的3.4 kb DNA片段作探针,进行Southern印迹杂交,并以生物素结合蛋白-碱性磷酸酶体系显示生物素探针杂交信号。结果表明,0.1μg男性DNA可显示清晰的信号,而5μg女性DNA则无信号出现;平行试验证明生物素探针测定人性别的结果与32P标记探针完全一致。提示生物素探针可用于X连锁遗传病、性异常,运动员体检,法医学及异性别骨髓移植方面的性别分析。
- 王申五赵艳君张萍沈岩姜先华阮幼林孙念怙
- 关键词：生物素标记DNA探针
- 生物素标记DNA探针的研制(简报)
- 1987年
- 目前国内外应用核酸分子杂交技术检测外源基因以诊断病毒等微生物的感染,探测内源基因的多态性和缺陷以诊断遗传病和研究肿瘤。其中基因探针(即DNA探针)是关键,常用~32P放射性同位素标记DNA作探针。由于~32P脱氧核苷三磷酸半衰期短、价钱昂贵、主要依靠进口、以及保存和防护运输等原因,使基因诊断技术不能广泛应用。本文参考国外经验,用生物素标记的DNA作探针巳获得成功. 生物素标记的DNA是已知片断,例如作者用生物素标记HBV-DNA及Y染色体特异的DNA等.标记方法既采用传统的缺口平移法,以Bio-ll-duTP(BRL公司产品)为标记底物。
- 王申五卢岩田刚高庆生赵艳君吴冠芸
- 关键词：生物素辅酶DNA
- 快速检测DNA甲基化的新方法被引量：2
- 1993年
- DNA甲基化对基因表达的调控作用日益受到重视.对原核及真核细胞的多数研究结果表明:DNA甲基化作用能引起基因表达的抑制,二者呈反相关;在细胞发育和分化过程中。
- 范钰沈岩傅四东林田赵艳君吴冠芸
- 关键词：甲基化聚合酶链反应DNA
- 60例 DMD/BMD 患者用抗肌营养不良 cDNA 探针的基因分析被引量：1
- 1993年
- 使用14kb的抗肌营养不良cDNA,在60例不相关的肌营养不良DMD/BMD(杜氏/贝氏肌营养不良)患者中检测到31例基因片段缺失及1例基因部分区域重复。缺失的主热点区位于基因中心区域,这一区域涉及cDNA次级片段5b-7检测范围3’区的4个外显子及C8检测范围的全部外显子。末观察到缺失的位置或长度与临床症状的严重性之间存在明确关系。
- 张俊武赵艳君吴冠芸储文明刘敬忠吴沪生赵时敏孙念怙
- 关键词：进行性肌营养障碍CDNA
- PCR扩增SRY核心序列鉴定性别被引量：3
- 1993年
- 本文应用聚合酶链反应(PCR)扩增Y染色体SRY核心序列,结合微量DNA提取,建立了一个特异而快速、简便鉴定性别的方法。应用这一方法检测了2例X—连锁隐性遗传病风险胎儿和3例性反转患者。
- 赵艳君吴冠芸石玉平杨建华郑美玲丁琰张绍芳王素桂付学文刘风喜李元
- 关键词：SRYPCR扩增性别鉴定
- 野生型及启动子区突变的HPFHAγ基因在MEL细胞中的表达被引量：4
- 1995年
- 研究了野生型Ａγ珠蛋白基因、中国型胎儿血红蛋白持续存在综合症（ＨＰＦＨ）Ａγ基因（启动子区─１９６Ｃ→Ｔ突变）及希腊型ＨＰＦＨＡγ基因（─１１７Ｇ→Ａ突变）在鼠红白血病（ＭＥＬ）ＧＭ９７９细胞中的表达。比较每个整合的Ａγ基因表达的ｍＲＮＡ量，─１９６Ｃ→Ｔ突变Ａγ基因未显示比野生型Ａγ基因明显增加的表达水平，而─１１７Ｇ→Ａ突变Ａγ基因在未分化的及ＨＭＢＡ或丁酸钠诱导分化的ＭＥＬＧＭ９７９细胞中的表达水平增加到野生型Ａγ基因相应水平的２．３倍至３．１倍。此结果提供了又一个实验证据，说明启动子─１１７Ｇ→Ａ突变是希腊型ＨＰＦＨ中胎儿Ａγ基因在成人中持续活跃表达的原因，这也为β地中海贫血和镰刀性贫血的基因治疗提供了新途径，即可以考虑用转移─１１７Ｇ→Ａ突变Ａγ基因的方法改善患者的贫血症状。
- 张俊武赵艳君吴冠芸程再玉
- 关键词：胎儿血红蛋白血红蛋白病HPFH
- 两步多重 PCR 技术快速检测杜氏肌营养不良基因缺失被引量：4
- 1993年
- 杜氏肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy,DMD）是男性最常见的X连锁致死性遗传病之一,临床上较轻型的BMD（Becker muscular dystrophy）是其等位基因型。DMD和BMD的发病率分别为30/10万和3/10万。三分之一的新生男婴患者由新生突变所引起。DMD基因定位于Xp23,是已知的最大基因,约有2300kb。由于该基因太大,用传统的限制性内切酶片段长度多态性（RFLPs）进行家系连锁分析,或应用cDNA探针进行Southern印迹杂交检测基因缺失均较繁琐费时,在临床上不易推广。PCR技术自1985年问世以来,已广泛应用于遗传病的基因诊断。Chamberlain等在DMD基因的两个缺失热点内,以9个易缺失外显子的旁侧顺序为引物进行多重PCR扩增,快速检测出DMD基因的绝大部分缺失型。本实验参照其多重PCR合成9对引物,并选用缺失率较高的5对引物和另外4对引物进行两步多重PCR,对中国人群中的DMD患者进行筛查,获得满意结果。
- 马生林吴冠芸储文明张俊武刘敬忠赵艳君吴沪生叶其芬邹丽萍
- 关键词：肌营养障碍聚合酶链反应基因缺失
- 干血纸片直接扩增法的改进被引量：3
- 1994年
- 干血纸片直接扩增法的改进吴冠芸，朱宁宁，赵艳君，范钰，龙桂芳血液样品点在纸上，干燥后可长期保存，便于运输，ＳｃｈＷａｒｔｚ等［１，２］报道了干血纸片直接ＰＣＲ扩增ＤＮＡ，较ＭｃＣａｋｅ等［３，４］将干血斑从纸上洗下，经过简单的处理，再进行扩增的方法要...
- 吴冠芸朱宁宁赵艳君范钰龙桂芳
- 关键词：DNA聚合酶链反应扩增
- 两个DMD cDNA片段在进行性肌营养不良症基因诊断中的应用被引量：1
- 1992年
- 本文使用了缺失热点区的两个DMD cDNA片段1b-2a及8为探针检测Duc-henne型及Becker型肌营养不良(DMD/BMD)患者的基因缺失。在34例不相关患者中分别检测到5例及8例基因片段缺失,缺失检测率分别为14.7％及23.5％,总检出率为38.2％。结果表明,中国肌营养不良患者的基因缺失也不是随机分布的,主要集中于基因中心附近,其次在基因5′侧。
- 储文明张俊武吴冠芸赵艳君刘敬忠孙(忄念)怙卞美璐吴玉珍宁杨吴沪生叶其芬邹丽萍
- 关键词：肌营养不良进行性基因诊断
- 与胎儿珠蛋白基因持续表达有关的(A_γδβ)°—地贫纯合子及杂合子的分子鉴别被引量：5
- 1991年
- 我们分子鉴别了一个缺失型中国(A_γδβ)°-地贫家系。先证者为这一缺失的纯合子,具有中度贫血症状。家系的另五个成员均为这一缺失的杂合子,其胎儿血红蛋白(HbF)为16—21％,接近或达到HPFH杂合子的HbF水平,并且几乎不表现贫血症状。限制性内切酶图谱分析证明了β-珠蛋白基因簇内的DNA顺序缺失,缺失的5′端点位于Aγ基因IVSⅡ内,3′端点在β-珠蛋白基因下游区远端,距HPFH-2的3′缺失端点上游区约11kb。缺失的总长度约为80kb。本文讨论了这一缺失导致胎儿血红蛋白在成人中持续活跃表达的可能机制。
- 张俊武吴冠芸赵艳君陈松森刘体超邱泽风邓小林
- 关键词：地中海贫血
