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赵佳福: 作品数：105 被引量：169H指数：6; 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技厅重大专项贵州省科技计划项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>

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鸭源新城疫病毒M蛋白核定位信号突变影响病毒的毒力和复制能力被引量：3: 2018年; 【目的】研究鸭源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)M蛋白核定位信号(nuclear localization signal,NLS)突变对其毒力和复制能力的影响。【方法】利用鸭源NDV SS1株P基因和F基因上的AgeⅠ和Bstz17Ⅰ酶切位点,将overlapPCR方法获得的M蛋白NLS突变的片段替换到p NDV/SS1GFP中获得全长质粒pNDV/SS1GFP-M/NLSm。通过反向遗传学技术拯救M蛋白NLS突变体病毒,并对拯救的病毒进行血凝(hemagglutination,HA)试验、荧光试验和M基因测序鉴定。另外,对突变体病毒进行M蛋白的亚细胞定位观察,以及病毒的生物学特性、空斑形成能力和体外增殖能力测定。【结果】成功构建M蛋白NLS突变的全长质粒pNDV/SS1GFP-M/NLSm。细胞转染物接种鸡胚后的第1代尿囊液无HA效价,盲传3代才能检测到拯救病毒的HA效价。进一步的荧光试验和M基因测序确定拯救的病毒是突变体病毒r SS1GFP-M/NLSm。与亲本病毒rSS1GFP相比,突变体病毒M蛋白由细胞核定位变为细胞质定位。此外,突变体病毒的毒力、在鸡胚上的复制能力以及在细胞中的空斑形成能力显著降低,并且感染细胞后产生的细胞病变轻微,M蛋白和绿色荧光蛋白的表达量均降低,说明M蛋白NLS突变使病毒的体外增殖能力受到抑制。【结论】NLS突变导致的M蛋白细胞核定位功能丧失可明显降低鸭源NDV的毒力和复制能力。; 段志强嵇辛勤邓珊珊胡焱赵佳福倪萌萌; 关键词：新城疫病毒 M蛋白核定位信号病毒复制

影响BLM基因表达的miRNAs筛选及抑制效率研究被引量：4: 2018年; [目的]筛选调控BLM基因表达的miRNAs并研究其抑制效率。[方法]利用Target Scan Human 6.2、microRNA.org、PicTar以及miRsystem在线软件预测调控BLM基因表达的miRNAs;miRNA通过脂质体转染和特异茎环引物反转录、荧光定量PCR及Pfaffl算法检测miRNA对BLM基因表达的影响。[结果]初步筛选出hsa-miR-338-3p为调控BLM基因表达的miRNA;hsa-miR-338-3p抑制效率试验结果表明:当前列腺癌细胞(PC3)转染20μmol/L的hsamiR-338-3p minic时,实验组BLM表达量为对照组的0.44倍,抑制了BLM的表达(P<0.01);转染40μmol/L的hsa-miR-338-3p minic时,实验组BLM的表达量为对照组的2.55倍,促进了BLM的表达(P<0.01);转染60μmol/L的hsa-miR-338-3p minic时,实验组BLM的表达量为对照组的1.14倍,实验组与对照组差异不显著(P>0.05)。[结论]转染20μmol/L、40μmol/L和60μmol/L的hsa-miR-338-3p minic时BLM基因的表达量分别是对照组的0.44倍、2.55倍和1.44倍,转染不同剂量的miRNA对BLM基因的表达情况具有不同的影响。; 谌颖莲许厚强赵佳福王赛楠; 关键词：MIRNAS

敌百虫急性染毒对贵州白香猪的影响被引量：1: 2009年; 用10头贵州白香猪分为空白对照组(3头)和试验组(7头),试验组分别按5 000 mg/kg体重(1头)、3 000 mg/kg体重(1头)2、000 mg/kg体重(2头)、1 000 mg/kg体重(3头)经口灌胃一次染毒,从急性毒性效应、临床中毒症状、血液生理生化指标变化3个方面探讨敌百虫对贵州白香猪的急性毒性作用。结果表明:敌百虫对贵州白香猪的最小致死量(Dn)为1 000 mg/kg体重,全致死量(Dm)为2 000 mg/kg体重。同时探讨了大剂量、长期接触敌百虫可能引起动物免疫功能下降及血循状况改变,进而严重危害机体健康。; 李金杰许厚强徐彩龙张勇陈祥余定标赵佳福华在东; 关键词：贵州白香猪敌百虫急性染毒血液生理生化指标

香×苏F2代杂交猪屠宰性状、肉质性状及脏器系数的测定被引量：3: 2019年; 为了研究香×苏F2代杂交猪的杂交性能,试验随机选取6月龄的香×苏F2代杂交猪15头,以纯种苏太猪和纯种从江香猪为对照,进行屠宰性状、肉质性能及脏器系数的测定。结果表明:香×苏F2代杂交猪屠宰性状与从江香猪差异极显著(P<0. 01),优于从江香猪而劣于苏太猪;香×苏F2代杂交猪肌肉失水率、肌内脂肪含量与从江香猪、苏太猪差异极显著(P<0. 01);香×苏F2代杂交猪肝脏、脾脏和肾脏系数与从江香猪和苏太猪均差异显著(P<0. 05)。说明香×苏F2代杂交猪既发挥了苏太猪生长速度快、瘦肉率高的特性,又基本上保持了从江香猪的优良肉质特性。; 阮涌廖政倪萌萌赵佳福赵佳福段志强; 关键词：从江香猪苏太猪杂交猪屠宰性状肉质性状脏器系数

NGF基因在黔北麻羊卵巢颗粒细胞及组织的表达分析: 2023年; 旨在验证NGF基因在转录组测序中单羔组对多羔组上调的结果,并探究NGF基因对黔北麻羊产羔性状的影响。选取健康、体质量45 kg、4岁左右的单、多羔黔北麻羊母羊为研究对象,采用qPCR法检测NGF基因在单、多羔组黔北麻羊母羊不同组织的表达水平,构建pEGFP-N3-NGF重组质粒,利用脂质体转染法转染pEGFP-N3-NGF重组质粒进入卵巢颗粒细胞,分为超表达NGF试验组和pEGFP-N3空载体对照组,通过检测培养基中雌二醇、孕酮的浓度,及对卵巢颗粒细胞增殖、凋亡、NGF、GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3基因mRNA表达的影响,来探究NGF基因对卵巢颗粒细胞的影响。结果表明,NGF基因在黔北麻羊各组织中均有表达,组间比较可知,卵巢和输卵管在多羔组表达极显著高于单羔组(P<0.01)。成功将pEGFP-N3-NGF重组质粒转染进入卵巢颗粒细胞,在12 h对E2的分泌具有显著促进作用(P<0.05),而对P4的分泌在12,24 h具有显著抑制作用(P<0.05),对卵巢颗粒细胞增殖在24,48 h具有极显著抑制作用(P<0.01),对卵巢颗粒细胞的凋亡具有促进作用。而对繁殖相关基因GnRHR、FSHR、BMP4、TIMP3 mRNA的表达有极显著促进作用(P<0.01)。综上表明,NGF基因可提高E2的分泌,抑制P4的分泌,有助于黔北麻羊发情及妊娠的维持,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,也极显著促进繁殖相关基因mRNA的表达,而这些繁殖相关基因都能够调控卵泡数、卵泡的发育与形成以及排卵,因此,NGF基因能够促进这些基因表达,进而促进卵泡的发育、形成及排卵,提高山羊的产羔力,这为产羔性状相关基因的研究提供了理论基础,初步认为NGF基因可作为探究影响山羊产羔性状的候选基因。; 陈祥敖叶李诚兰赵佳福周志楠韦仕南; 关键词：黔北麻羊 NGF 卵巢颗粒细胞

Bloom解旋酶基因RNA干扰载体对前列腺癌PC3细胞的抑制作用被引量：5: 2016年; 目的采用RNA干扰(RNAi)技术抑制前列腺癌PC3细胞系中Bloom解旋酶基因的表达,探讨Bloom解旋酶基因表达下调后对PC3细胞的抑制作用。方法使用实验室前期成功构建的两条针对于Bloom解旋酶基因的RNAi载体shRNA-1和shRNA-2转染前列腺癌PC3细胞,以未转染RNAi载体为对照组,分别在转染24、48、72h后通过MTT法检测细胞增殖情况,转染48h后通过Transwell小室法检验细胞侵袭、迁移能力,细胞划痕实验检测细胞迁移情况,Hoechst/PI双染法检测细胞凋亡情况。结果转染RNAi载体后,与未转染对照组相比,各实验时间点的转染组细胞增殖率降低(P<0.05),Transwell细胞侵袭和迁移实验中穿过室膜的细胞数与对照组比均减少(侵袭:119±24、118±30vs 227±38;迁移:122±13、121±47vs 277±32,P<0.05),划痕愈合率与划痕迁移距离均降低,48h时差异有统计学意义(P<0.05),而且细胞凋亡明显增加。结论以RNAi载体干扰Bloom解旋酶基因的表达可抑制前列腺癌PC3细胞的增殖、迁移和侵袭能力并促进其凋亡,为前列腺癌的靶向基因治疗提供了依据。; 罗霂榃许厚强刘忠伟段志强赵佳福吴萍陈福; 关键词：RNA干扰前列腺肿瘤细胞侵袭

敲减BLM解旋酶表达增强前列腺癌PC3细胞对丝裂霉素C的敏感性被引量：11: 2017年; 丝裂霉素C是一种广谱抗肿瘤抗生素,对多种癌症有抗癌作用,其作用原理可使细胞的DNA发生链间交联,引起DNA双链断裂,阻碍DNA的复制,从而抑制肿瘤细胞分裂。临床上主要用于胃癌、肠癌、肝癌及胰腺癌等消化道癌方面的治疗。本文研究丝裂霉素C对转染人BLM解旋酶基因(shRNA载体)前后前列腺癌PC3细胞活性的影响。使用前期成功构建的干扰载体转染PC3细胞,在转染48 h后加药,通过荧光定量PCR、MTT法、Transwell小室实验、细胞划痕实验、流式细胞术,分别检测加药12、24、36 h BLM基因的表达量、PC3细胞增殖能力、侵袭能力、迁移能力及凋亡情况的变化。结果显示,敲减BLM基因表达后的PC3细胞相对于正常PC3细胞其增殖能力、侵袭能力和迁移能力能显著被丝裂霉素C抑制,且丝裂霉素C能显著促进其细胞的凋亡,说明BLM基因低表达的前列腺癌细胞对丝裂霉素C更敏感。研究结果为丝裂霉素C在前列腺癌的临床治疗上奠定了理论基础。; 吴萍许厚强赵佳福刘忠伟段志强陈福谌颖莲; 关键词：丝裂霉素C 前列腺癌细胞细胞活性

利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛MyoDⅠ基因核心启动子的方法: 本发明公开了一种利用双荧光素酶报告基因确定关岭牛<I>MyoDⅠ</I><i/>基因核心启动子的方法，包括以下步骤：构建含关岭牛MyoDⅠ基因启动子全长片段和亚克隆片段的重组载体；对骨骼肌生长相关的细胞进行培...; 许厚强李飞陈伟陈祥赵佳福; 文献传递

鸡importin β1基因的克隆及生物信息学分析被引量：3: 2016年; [目的]对鸡importin β1基因进行克隆和生物信息学分析。[方法]根据Gen Bank公布的鸡importin β1基因序列(XM_015299473)设计合成特异性引物,通过RT-PCR从DF-1细胞中扩增importin β1基因CDS区并进行克隆和测序,利用生物信息学工具对其理化性质、二级结构和系统进化树进行分析。[结果]鸡importin β1基因CDS全长2 268bp,共编码755个氨基酸,该蛋白等电点为4.61,相对分子质量84.15 k Da,分子式为C3712H5901N979O1152S46。蛋白质二级结构预测显示,鸡importin β1蛋白含有丰富的二级结构,以α-螺旋为主(占64.90%)。importin β1基因同源性及系统进化树分析结果表明鸡与鹌鹑的亲缘关系最近。[结论]鸡importin β1基因的克隆和生物信息学分析为进一步研究其功能奠定了基础。; 胡焱段志强嵇辛勤阮涌赵佳福雷云万彪; 关键词：克隆生物信息学

鸡核转运受体β1蛋白重组真核表达载体的构建与亚细胞定位分析: 引言核转运受体β1(importin β1)蛋白是核输入蛋白家族中的一员,是真核生物中广泛分布的核质转运受体蛋白,其在细胞的基因转录、细胞周期调控以及增殖分化等过程中发挥着重要作用。近年来的研究发现,importin β...; 袁超孙鑫吴燕芝赵佳福阮涌倪萌萌段志强

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