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褚章波
作品数:
5
被引量:6
H指数:1
供职机构:
华中科技大学同济医学院
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发文基金:
国家自然科学基金
湖北省卫生厅科研基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
胡豫
华中科技大学同济医学院
黄靖
香港大学深圳医院
孙春艳
华中科技大学同济医学院
郭涛
华中科技大学同济医学院
张璐
华中科技大学同济医学院
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作者
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褚章波
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黄靖
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胡豫
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张璐
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陈蕾
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中华血液学杂...
1篇
中华病理学杂...
年份
1篇
2015
1篇
2011
1篇
2009
2篇
2008
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5
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脑源性神经营养因子基因沉默对RPMI8226细胞表达VEGF的影响
2015年
目的 研究脑源性神经营养因子(BDNF)对多发性骨髓瘤(MM)细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用,初步探讨BDNF与MM血管新生的关系.方法 设计和构建针对人BDNF基因的siRNA表达载体,用脂质体Lipofectamine^TM2000介导转染,将空载体质粒pGenesil-1和重组质粒pGenesil-shRNA-BDNF分别转染MM细胞株RPMI8226细胞(分别命名为P0组、P1组).采用RT-PCR法和Western-blot法鉴定干扰后BDNF的表达;MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖、凋亡;RT-PCR法和ELISA法检测干扰BDNF对细胞表达VEGF的影响.结果 ①成功构建了针对BDNF的siRNA真核表达载体.与未转染组(Pn组)及P0组相比,P1组BDNF mRNA水平及蛋白水平显著下调(P值均<0.05);②P1组细胞的增殖活性(0.42±0.06)显著低于Pn组(0.56±0.06)和P0组(0.50±0.04)(P值均<0.05);③P1组细胞的早期凋亡率[(53.84±9.95)%]明显高于Pn组[(5.23±2.46)%]和P0组[(9.10±3.46)%] (P值均<0.01);④P1组细胞VEGF121、VEGF145和VEGF165mRNA表达水平分别为Pn组的(0.62±0.07)、(0.47±0.09)和(0.57±0.02)倍(P值均<0.05).⑤P1组细胞VEGF的分泌水平分别为Pn组的(0.36±0.05)倍和P0组的(0.44±0.06)倍(P值均<0.05).结论 BDNF基因沉默可促进RPMI8226细胞凋亡并抑制其增殖,下调RPMI8226细胞VEGF的表达,BDNF可能通过调控MM细胞VEGF的表达而参与MM血管新生的病理过程.
黄靖
褚章波
陈蕾
王雅丹
张璐
胡豫
孙春艳
关键词:
RNA干扰
脑源性神经营养因子
血管内皮生长因子A
脑源性神经营养因子激活其受体TrkB在多发性骨髓瘤发病机制中的作用
被引量:5
2008年
目的研究异常表达的脑源性神经营养因子(BDNF)在多发性骨髓瘤(MM)发生、发展中的作用及其信号通路。方法采用锥虫蓝拒染法检测BDNF对人MM细胞系RPMI8226、U266和KM3细胞存活的促进作用,MTT比色法观察BDNF对苯丙氨酸氮芥和长春新碱细胞毒作用的影响,Western blot检测BDNF对MM细胞TrkB磷酸化的影响。通过动物模型观察BDNF对肿瘤生长和实验动物存活时间的影响。结果BDNF以浓度依赖性方式促进MM细胞的存活,50μg/LBDNF作用后存活细胞数较对照组明显增加。BDNF可明显降低苯丙氨酸氮芥和长春新碱的细胞毒性,50μg/LBDNF作用后,苯丙氨酸氮芥和长春新碱的EC50值分别为无BDNF作用时的2倍和3倍。体内实验表明BDNF可明显促进异种移植的MM裸鼠模型中肿瘤的生长,经BDNF处理和未经BDNF处理组肿块的平均体积分别为3240.9mm^3和1032.7mm^3(P〈0.05),生存时间分别为13d和21d(P〈0.05)。MM细胞中异常表达的TrkB是BDNF的功能性受体,外源性BDNF作用后,MM细胞TrkB磷酸化水平明显增加,并且Trk抑制剂K252a可明显抑制BDNF诱导的MM细胞迁移。结论外源性BDNF可磷酸化激活MM细胞表面TrkB受体,促进骨髓瘤细胞的增殖、存活、迁移并参与骨髓瘤细胞的化疗耐药,在MM的病理生理进程中起重要作用。
孙春艳
胡豫
郭涛
黄靖
张璐
褚章波
关键词:
多发性骨髓瘤
脑源性神经营养因子
受体蛋白质酪氨酸激酶类
磷酸化
脑源性神经营养因子在多发性骨髓瘤发病机制中的作用
MM是浆细胞的恶性肿瘤。浆细胞是人体获得性免疫系统的重要组成部分;恶性浆细胞的高度异质性导致致命的免疫缺陷和进展性的骨质破坏。随着医学科学的进步,越来越多有价值的干预措施被引入临床实践并且其效果得到验证。但是由于骨髓瘤细...
褚章波
关键词:
多发性骨髓瘤
脑源性神经营养因子
破骨细胞
发病机制
脑源性神经营养因子对RPMI8226细胞表达和分泌血管内皮生长因子的调控作用
被引量:1
2008年
脑源性神经营养因子(BDNF)是神经营养因子超家族成员之一,多项研究证实BDNF及其功能性受体TrkB高表达于多种恶性肿瘤,包括人类多发性骨髓瘤(MM)^[1]。既往研究发现,MM患者血浆中BDNF水平明显增高,而且与血管内皮生长因子(VEGF)表达水平存在相关性^[2],本实验中我们检测了外源性BDNF对人类MM细胞株RPMI8226细胞中VEGF表达和分泌水平的影响,BDNF/TrkB信号通路在此过程中的作用,为BDNF通过诱导VEGF表达而参与MM血管新生病理过程提供依据。
黄靖
胡豫
孙春艳
郭涛
王雅丹
洪柳
张璐
褚章波
关键词:
脑源性神经营养因子
分泌血管内皮生长因子
细胞表达
RPMI8226细胞
VEGF表达
脑源性神经营养因子基因沉默对HeLa细胞增殖和凋亡的影响
2009年
目的以高表达脑源性神经营养因子(BDNF)的宫颈癌细胞系HeLa细胞为模型,筛选针对BDNF基因的有效干扰RNA序列,并观察BDNF基因沉默对HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法设计和构建两个针对人BDNF基因的siRNA真核表达载体,经酶切鉴定和DNA序列分析鉴定后用脂质体Lipofectamine 2000介导转染,将空载体质粒pGenesil-1和两个重组质粒pGenesil—shRNA—BDNF1、pGenesil—shRNA—BDN心分别转染人人HeLa细胞(依次命名为P0、P1和R组);采用RT—PCR和Western blot法分别从mRNA水平和蛋白水平检测BDNF表达的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞的增殖水平;流式细胞仪和Hoechest33258染色检测细胞凋亡。结果成功构建了针对BDNF的siRNA真核表达载体。P1组与未转染、P0、P2组相比,BDNFmRNA表达水平(F=48.19,P〈0.01)和BDNF蛋白表达水平(F=13.74,P〈0.01)均明显降低,P2组则未达实验预期的干扰目的(P〉0.05)。通过MTr实验,发现P.组细胞生长速度明显减慢,增殖高峰后移;流式细胞术检测证实早期凋亡率P1组[(53.4±4.2)%]明显高于未转染组[(0.8±0.4)%]、P。组[(5.1±1.8)%]和P2组[(7.9±2.4)%;F=269.77,P〈0.01]。结论BDNF基因高表达于宫颈癌细胞系HeLa细胞,BDNF基因沉默能明显增加HeLa细胞的凋亡并抑制其增殖,提示BDNF基因可能成为恶性肿瘤治疗的新靶点。
黄靖
孙春艳
郭涛
褚章波
王雅丹
胡豫
关键词:
脑源性神经生长因子
HELA细胞
RNA干扰
细胞凋亡
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