袁慧敏
- 作品数:9 被引量:12H指数:2
- 供职机构:延边大学农学院动物科学系更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金公益性行业(农业)科研专项更多>>
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- 猪精子获能期间蛋白质磷酸化时间依赖性的上调被引量:1
- 2010年
- 通过获能猪精子酪氨酸磷酸化蛋白分离和表达,来确定精子获能的最佳状态。将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在体积分数为5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色的方法来评价精子获能状态,经过SDS-PAGE分离后,进行Western免疫印迹分析,检测获能猪精子间酪氨酸磷酸化蛋白的分布。有27,47 ku的2种蛋白发生酪氨酸磷酸化,其中27 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平自精子体外培养后呈递增趋势,而47 ku的蛋白酪氨酸磷酸化水平在精子培养1.5 h时最高,后呈递减趋势,1.5 h时获能状态最佳。
- 张旭成袁慧敏金一
- 关键词:酪氨酸磷酸化精子获能SDS-PAGE电泳WESTERN印迹
- 延边奶山羊-绵羊体细胞重构胚融合条件的研究被引量:1
- 2011年
- 采用延边奶山羊耳皮肤成纤维细胞为供核细胞,绵羊卵母细胞为核移植受体,构建了山羊-绵羊异质重构胚,探讨了不同融合电场强度、脉冲次数对重构胚融合率及重构胚体外发育率的影响。结果表明,融合电场强度为1200~1400V/cm、融合脉冲次数为2次,是延边奶山羊-绵羊体细胞克隆的适宜融合条件。
- 王贺张涛袁慧敏于昊赢孙晓东李钟淑方南洙
- 关键词:绵羊电融合重构胚
- 酪氨酸磷酸化蛋白在体外获能猪精子上的分布被引量:1
- 2010年
- 为研究猪精子获能过程中蛋白酪氨酸磷酸化的变化规律,将猪精子悬浮于改良的Tris缓冲液(mTBM)获能培养基中,在5%CO2孵箱37℃培养,以考马斯亮蓝染液染色为指标评价精子获能状态,用免疫荧光技术检测酪氨酸磷酸化的蛋白在精子上的分布。结果显示,随着获能的进行,发生蛋白酪氨酸磷酸化的精子占总精子的百分比增加,由未获能前35%增至获能1.5 h时的88%,酪氨酸磷酸化的蛋白分布变广,由精子头部扩增至精子头部、鞭毛主段和中段。
- 张旭成袁慧敏金一
- 关键词:精子获能酪氨酸磷酸化
- 黑熊-牛异种重构胚最佳供体的研究
- 2011年
- 选用不同代数的黑熊成纤维细胞(3~6、7~9、10~12代)构建异种重构胚,筛选出最佳供体细胞代数,根据卵裂率、多细胞胚发育率、囊胚率评价黑熊成纤维细胞质量。结果表明,7~9代组与3~6代组、10~12代组卵裂率、多细胞胚发育率差异显著,3~6代组和10~12代组差异不显著,3组囊胚率差异均不显著。说明7~9代黑熊成纤维细胞为最佳供体细胞代数,且异种重构胚发育率最高。
- 袁慧敏张旭成王贺高璐方南洙李钟淑李福俊
- 关键词:黑熊成纤维细胞
- 鹿体外受精的研究进展
- 随着胚胎生物工程技术的深入研究和不断发展,在我国开展对鹿胚胎体外生产技术的研究显得越来越重要与紧迫。本文就鹿类体外受精的发展历史,精子的体外获能、卵母细胞体外成熟培养、受精作用机制以及体外受精等方面作一综述。
- 张旭成袁慧敏金一
- 关键词:体外受精生物工程卵母细胞
- 文献传递
- 不同冷冻保护剂对黑熊成纤维细胞冷冻效果的影响被引量:4
- 2011年
- 选用含有不同浓度的3种冷冻保护剂:二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甘油(GC),对黑熊耳皮肤成纤维细胞进行冷冻保存,筛选出最佳冷冻保护剂和最佳浓度。用台盼蓝对解冻复苏的细胞进行染色,分析细胞活力,以细胞活率和24 h贴壁率评价冻存效果。结果表明:二甲基亚砜添加浓度7.5%和10%差异不显著,与其他组差异显著;甘油添加浓度10%和15%差异不显著,与其他组差异显著;乙二醇添加浓度15%显著高于其他组。研究结果显示,二甲基亚砜浓度为7.5%对黑熊耳部成纤维细胞冷冻效果最好。
- 袁慧敏张旭成王贺高璐刘佳丽方南洙李钟淑李福俊
- 关键词:黑熊皮肤成纤维细胞冷冻保护剂
- 鹿体外受精的研究进展及展望
- 2009年
- 鹿是一种十分珍贵的药用动物,具有极高的经济价值和研究价值。鹿体外受精技术的研究可以为扩大优良公、母鹿特别是母鹿的遗传作用、加快遗传进展、提高我国鹿群的群体品质奠定技术基础。
- 张旭成袁慧敏金一
- 关键词:体外受精技术母鹿药用动物
- 黑熊成纤维细胞的冷冻保存及对黑熊—牛克隆胚体外发育的影响
- 本试验研究了黑熊耳部成纤维细胞的原代培养方法,并对黑熊成纤维细胞冷冻保存的冷冻保护剂和冷冻方法进行了筛选,探讨了处理后成纤维细胞对黑熊-牛克隆胚体外发育的成活影响,为建立黑熊-牛的克隆胚发育体系,促进黑熊-牛后代发育率,...
- 袁慧敏
- 关键词:黑熊成纤维细胞体外培养
- 文献传递
- L-半胱氨酸对冻融后猪精子质量参数和膜脂质过氧化反应的影响被引量:5
- 2010年
- 试验检测冷冻稀释液中添加L-半胱氨酸对冻精解冻后精子质量参数、膜脂质过氧化程度的影响。结果显示:(1)在冷冻稀释液中添加0.1 mg.mL-1L-半胱氨酸能显著地提高冻融后精子的活率、顶体完整率及体外受精率(P<0.05),但对运动学参数没有影响(P>0.05)。(2)在冷冻稀释液中添加L-半胱氨酸(0.1、0.2和0.3mg.mL-1L-半胱氨酸)能显著降低膜脂质过氧化水平(P<0.05)。该结果表明冷冻稀释液中添加L-半胱氨酸能改善猪精子的冷冻效率。
- 张旭成魏世宝袁慧敏金一
- 关键词:精子L-半胱氨酸