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范文辉: 作品数：55 被引量：81H指数：5; 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>

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一种超高灵敏的埃博拉病毒胶体碳侧流免疫层析检测方法的建立被引量：5: 2018年; 埃博拉出血热(Ebola hemorrhagic fever, EHF)由于其高感染性和高致死率特点,快速鉴别诊断并实施隔离是最有效的防止疫情扩散的措施。文中建立了一种可以快速、高灵敏筛查埃博拉病毒(Ebolavirus,EBOV)感染的现场检测技术,用碳纳米颗粒标记抗EBOV基质蛋白VP40兔多克隆抗体,组装成一种可在15min内检测埃博拉病毒的胶体碳侧流免疫层析试纸条。将标记胶体碳颗粒的兔多抗喷涂于玻璃纤维素膜上制备碳标垫;以1mg/mL的抗VP40单克隆抗体(McAb,4B7F9)和羊抗兔IgG,按照2μL/cm的包被量印迹于硝酸纤维膜上,分别作为检测线与质控线,组装试纸条。该试纸条能够特异地检测EBOV重组VP40蛋白、EBOV病毒样颗粒(Virus-like particles,VLP)和灭活EBOV,而与马尔堡病毒样颗粒(MARV-VLP)、流感病毒A/PR/8 (IAV/PR/8)、黄热病毒(YFV-17D)、登革热病毒2型(DEN2)无交叉反应,显示良好的特异性,对1 500份阴性血清进行检测,假阳性率为1.3‰,仅为WHO授权ReEBOV^(TM)胶体金试纸的1/100;该胶体碳试纸条检测灭活EBOV的最低检出限为100 ng/mL (相当于10~6 copies/mL),远优于ReEBOV^(TM)胶体金试纸条检出限(10μg/mL,相当于10~8 copies/mL)。热稳定性评价显示试纸条可在室温稳定保存1年以上。文中建立的EBOV胶体碳免疫层析试纸条能够快速、超高灵敏、特异地检测EBOV,为现场快速筛查EBOV感染提供一种新方法。; 魏艳秋段勇成毕玉海王萌李云龙王选林玮范文辉王晶刘文军杨利敏

H5亚型流感病毒HA头部球状结构域在毕赤酵母中的高效表达及其免疫原性分析被引量：7: 2019年; 为了研究H5亚型流感病毒HA蛋白中头部球状结构的免疫原性及其基因优化对蛋白表达的影响,本研究构建了重组真核表达载体pPICZ?A-H5HA,并将其转化至毕赤酵母,经筛选获得重组菌株。SDS-PAGE和Western blotting结果分析显示,目的蛋白可在酵母中高效分泌表达,发酵液上清中目的蛋白浓度高达0.2 mg/mL,分子量约为37kDa。将酵母发酵上清经浓缩、纯化后,获得重组目的蛋白H5HA。将不同剂量的H5HA与不同佐剂联用后分别以滴鼻和肌肉注射两种方式免疫试验动物,进行免疫效力的评价。试验结果表明,H5HA具有较好的免疫原性,可诱导SPF鸡产生较高水平的IgG (血凝抑制效价达1∶64、病毒中和抗体效价为1∶218),最佳使用剂量为50μg/羽,与白油佐剂联用时效果最佳,且肌肉注射方式的免疫效果优于滴鼻方式。研究结果为H5亚型流感病毒亚单位疫苗的研制提供了理论支撑。; 范文辉王萌刘丽蓉张鹤张爽凌红丽刘文军李晶; 关键词：血凝素蛋白毕赤酵母亚单位疫苗

利用CRISPR-Cas9系统构建的敲除IFN-β基因的293T细胞系: 本发明公开了利用CRISPR-Cas9系统构建的敲除IFN-β基因的293T细胞系。本发明所提供的敲除IFN-β基因的293T细胞系，具体为人胚肾细胞293T-KO-IFN-β，它在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物...; 刘文军李晶范文辉李芸张爽

用于预防猪繁殖与呼吸综合征的融合蛋白组合物及其相关生物材料与应用: 本发明公开了用于预防猪繁殖与呼吸综合征的融合蛋白组合物及其相关生物材料与应用，涉及包括抗原的疫苗或医药配制品领域。本发明所要解决的技术问题是如何预防猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)。为解决该问题，本发明提供了预防PRRS的...; 刘文军孙蕾范文辉孙文强娄慧聪

一种检测猪O型口蹄疫病毒抗体的方法及其专用试剂盒: 本发明公开了一种检测猪O型口蹄疫病毒抗体的方法及其专用试剂盒。本发明提供了一种检测或辅助检测待测样本是否感染猪O型口蹄疫病毒的化学发光酶联免疫试剂盒，包括抗原蛋白，所述抗原蛋白为如下a或b或c：a)序列表中序列2所示的蛋...; 刘文军杨利敏李晶崔辰张爽范文辉; 文献传递

A型流感病毒温度敏感性的关键磷酸化位点及其应用: 本发明公开了一种A型流感病毒温度敏感性的关键磷酸化位点及其应用。本发明首先保护一种重组病毒，命名为病毒WSN‑Y385F，是将A型流感病毒基因组中编码NP蛋白的第385位酪氨酸残基的密码子突变为苯丙氨酸残基的密码子得到的...; 刘文军郑伟楠李晶范文辉; 文献传递

H1N1、H3N2亚型流感病毒Mosaic-HA1的表达及对小鼠的免疫原性评价被引量：1: 2024年; 流感病毒给全球公共卫生带来了严重威胁,疫苗接种是预防流感及严重并发症的有效手段。本研究分析了北半球2012–2022年间人类甲型流感病毒(influenza A virus,IAV)流行株血凝素(hemagglutinin,HA)中HA1亚基的氨基酸突变趋势和抗原显性位点变化情况。基于世界卫生组织(World Health Organization,WHO)公布的2022年北半球流感疫苗推荐株A/Wisconsin/588/2019(H1N1)和A/Darwin/6/2021(H3N2)的HA1氨基酸序列,通过马赛克(mosaic)遗传算法设计了3种Mosaic-HA1抗原并将其在293F细胞中进行表达、纯化。将纯化后的Mosaic-HA1抗原与明矾佐剂以1:1的体积比混合制备亚单位疫苗并免疫BALB/c小鼠以评价免疫效果。酶联免疫吸附实验表明Mosaic-HA1抗原能产生同时结合两种亚型HA1的IgG,其中结合H3蛋白、H1蛋白的特异性效价IgG效价分别达到10~5、10~3以上,攻毒实验表明Mosaic-HA1能抵抗H3N2和H1N1流行毒株的攻击。本研究通过对不同亚型IAV毒株HA1中免疫显性位点进行重新组合,为多价亚单位流感疫苗开发提供了新思路。; 韩菲焦鹏涛林润山李和桥马嘉宁裴汉中张鹤孙蕾罗廷荣罗廷荣范文辉范文辉; 关键词：H1N1 H3N2 免疫原性评价

流感病毒NP蛋白突变体及其编码基因与应用: 本发明公开了一种流感病毒NP蛋白突变体及其编码基因与应用。本发明所提供的流感病毒NP蛋白突变体是将来自于野生型流感病毒A/WSN/1933毒株的NP蛋白的第253位的苯丙氨酸突变为异亮氨酸(I)后得到的，其氨基酸序列具体...; 刘文军李晶郑伟楠范文辉张爽李芸

一种重组流感病毒及其在抑制肿瘤细胞增殖和诱导干扰素的产生中应用: 本发明公开了一种重组流感病毒及其在抑制肿瘤细胞增殖和诱导干扰素的产生中应用。本发明所提供的重组流感病毒是出发B型流感病毒的基因组进行如下改造得到的：增加了含有caspase3‑1的编码基因和caspase3‑2的编码基因...; 刘文军李晶江静雯范文辉张爽; 文献传递

B型流感病毒NEP蛋白上核输出信号NES1、NES2与NES3介导vRNP出核的机制研究: 范文辉高晟妍李晶江静雯孟丽君刘文军

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