苏庆美
- 作品数：15 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目国家科技支撑计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 隐孢子虫CP15分子疫苗及细胞因子佐剂效应研究
- 本试验根据许多学者研究发现疫苗可能是防治隐孢子虫病的有效途径之一，并且隐孢子虫子孢子表面蛋白CP15 是该病免疫诊断、免疫预防和免疫治疗的重要靶抗原，可用来研究隐孢子虫病新型疫苗。设计以CP15 为靶抗原研制核酸疫苗，亚...
- 苏庆美
- 关键词：隐孢子虫核酸疫苗亚单位疫苗
- 文献传递
- CP15亚单位疫苗对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果研究
- 为观察重组表达的CP15抗原对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果,将重组质粒pET-28a-CP15转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况和反应原性。将纯...
- 苏庆美何生虎米荣升黄燕周鹏张国恩秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：亚单位疫苗免疫保护细胞免疫
- 文献传递
- CP15亚单位疫苗对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果研究
- 为观察重组表达的CP15抗原对小鼠隐孢子虫感染的免疫保护效果,将重组质粒p ET-28a-CP15转入大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况和反应原性。将...
- 苏庆美何生虎米荣升黄燕周鹏张国恩秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：免疫保护效果隐孢子虫感染亚单位疫苗
- 隐孢子虫鼠基因型CP15基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达被引量：2
- 2011年
- 为了构建隐孢子虫鼠基因型CP15基因的重组真核表达质粒,检测其重组质粒在Hela细胞中的表达。采用PCR方法,从pMD18-T-CP15菌液中扩增了CP15及含寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)的CP15基因,酶切测序鉴定;将该基因亚克隆至pVAX1载体中,用脂质体介导的方法转染Hela细胞,RT-PCR法、间接免疫荧光法和Western-blot法检测表达蛋白的生物学活性。结果显示,扩增了约360 bp和380 bp的隐孢子虫鼠基因型CP15和含CpG-ODN的CP15基因,酶切测序鉴定成功构建了pVAX1-CP15和含有CpG-ODN的重组真核表达质粒pVAX1-C-CP15。转染Hela细胞后,用RT-PCR法检测到外源基因有效的转录,用间接免疫荧光、SDS-PAGE和Western-blot法检测到外源基因的有效表达。结果表明,构建的重组真核表达质粒能够在Hela细胞中成功转录和表达,并且表达产物具有良好的免疫活性。这为下一步深入研制具有高保护性的隐孢子虫核酸疫苗奠定了基础。
- 苏庆美何生虎米荣升张国恩黄燕周鹏秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：真核表达质粒HELA细胞
- 微小隐孢子虫CP15-P23-CP15/60基因的融合表达及抗血清的制备
- 2012年
- 以微小隐孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因。利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该3段基因片段串联在一起,各基因片段之间引入柔性氨基酸接头(GGGGS)编码基因。将串联基因克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组表达载体,转化到大肠埃希菌BL21(DE3)中进行诱导表达,将纯化的重组蛋白免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体。结果表明,获得了CP15-P23-CP15/60融合基因,并在大肠埃希菌中高效表达,Western blot显示重组蛋白能被牛抗微小隐孢子虫阳性血清识别,制备的多克隆抗体能被重组蛋白特异性识别,表明获得的重组蛋白具有较好的抗原性。
- 秦培兰米荣升黄燕周鹏张国恩苏庆美呼高伟曹薇陈兆国
- 关键词：微小隐孢子虫原核表达重叠延伸PCR
- 细胞因子与CpG-ODN对隐孢子虫CP15核酸疫苗的佐剂效应研究
- 为观察细胞因子和寡聚脱氧核苷酸(Cp G-ODN)对隐孢子虫核酸疫苗的免疫佐剂效应,将牛IL-18、IFN-γ单独或和Cp G-OND序列组合,与隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mouse genoty...
- 苏庆美何生虎米荣升周鹏黄燕张国恩秦培兰呼高伟陈兆国
- 隐孢子虫P23基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立
- 将隐孢子虫鼠基因型（Cryptosporidium mouse genotype）P23基因亚克隆到pGEX-4T-1载体中，并用大肠杆菌BL21（DE3）为宿主菌诱导表达。以纯化的rP23为诊断抗原，建立隐孢子虫间接E...
- 张国恩米荣升苏庆美黄燕周鹏胡义彬秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：隐孢子虫原核表达间接ELISA检测试剂盒
- 微小隐孢子虫CP15-P23-CP15/60基因的融合表达及其抗血清的制备
- 以微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)基因组DNA为模板,PCR扩增获得子孢子表面抗原CP15、P23和CP15/60基因。利用重叠延伸PCR(SOE PCR)将该三段基因片段串联在一起,各基因片...
- 秦培兰米荣升黄燕周鹏张国恩苏庆美呼高伟曹薇陈兆国
- 关键词：微小隐孢子虫原核表达重叠延伸PCR
- 文献传递
- 细胞因子与CpG-ODN隐孢子虫CP15核酸疫苗的佐剂效应研究
- 为观察细胞因子和CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)对隐孢子虫核酸疫苗的免疫佐剂效应，将牛IL-18、IFN-γ单独或和CpG-OND序列组合，与隐孢子虫鼠基因型(Cryptosporidium mousegenoty...
- 苏庆美何生虎米荣升周鹏黄燕张国恩秦培兰呼高伟陈兆国
- 关键词：隐孢子虫细胞因子分子佐剂表面蛋白
- 不同DNA提取方法对隐孢子虫卵囊PCR检测的影响被引量：5
- 2011年
- 为了提高隐孢子虫PCR检测的敏感性和效率,采用10种基因组DNA提取方法,对隐孢子虫卵囊DNA进行提取,对提取的DNA进行nested PCR扩增。经过3次重复试验,结果显示,Chelex 100法、FTA试纸法和Wizard DNAClean-Up System试剂盒法敏感性最高,能够稳定地扩增出1×102个卵囊提取的DNA,适合隐孢子虫病分子流行病学调查时大量样品DNA的提取。
- 陈兆国米荣升周鹏黄燕张国恩苏庆美秦培兰呼高伟林矫矫
- 关键词：隐孢子虫DNA
