苏倩倩
- 作品数：8 被引量：21H指数：2
- 供职机构：山东农业大学更多>>
- 发文基金：山东省自然科学基金山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡白细胞介素18双抗体夹心ELISA检测方法的建立及初步应用
- 2014年
- 应用识别不同表位的鸡白细胞介素18成熟蛋白(Mature chicken interleukin-18,mChIL-18)的2株单克隆抗体(mAb)1G9和2E6,建立检测mChIL-18的双抗体夹心ELISA,并利用此方法对禽网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)人工感染SPF鸡体内mChIL-18的分泌水平进行检测。结果显示,捕获抗体的最佳质量浓度为8mg/L,检测抗体的工作效价为1∶800,待检样品的最佳稀释度为1∶400,检测敏感度可达31.5ng/L,与其他细胞因子等抗原蛋白无交叉反应;跟对照组相比,REV感染鸡体内mChIL-18的表达量在7、14、21、28、35、42、49d均呈现升高,但只有14日龄时表现差异显著(P<0.05)。结果表明,本试验成功建立了ChIL-18的双抗体夹心ELISA,为鸡传染病的细胞免疫学研究提供了可靠方法。
- 王肖祎苏倩倩李恩扩胡敬东
- 关键词：单克隆抗体双抗体夹心ELISA
- 鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立
- 2013年
- 将鸡白细胞介素18的成熟蛋白（chickeninterleukin18matureprotein，mChIL-18）基因在原核系统表达，采用Ni～NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板，通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶标二抗稀释倍数，
- 苏倩倩李恩扩张海滨
- 关键词：鸡白细胞介素18间接ELISA方法原核表达成熟蛋白抗体重组蛋白
- 鸡白细胞介素18成熟蛋白的原核表达及抗体间接ELISA方法的建立
- 2012年
- 将鸡白细胞介素18的成熟蛋白(chicken interleukin 18 mature protein,mChIL-18)基因在原核系统表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化得到该重组蛋白。纯化后重组蛋白包被反应板,通过方阵滴定确定最佳抗原包被浓度、血清稀释倍数、羊抗鼠酶标二抗稀释倍数,建立检测ChIL-18成熟蛋白抗体的间接ELISA方法。经方阵滴定结果确定最佳抗原包被质量浓度为4μg/ml,阳性血清稀释比例为1∶104,羊抗鼠IgG辣根过氧化物酶结合物最佳稀释比例为1∶12 000,抗原抗体最佳结合时间是1.5 h,血清与二抗最适反应时间为1 h。阴性、阳性血清的判定标准为:被检样本的OD值是一组阴性样本OD值的2或3倍且OD450≥0.5,即为阳性,比值以P/N表示1,.5
- 苏倩倩李恩扩张海滨周霞胡敬东
- 关键词：原核表达蛋白纯化间接ELISA
- 鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定被引量：1
- 2013年
- 将鸡白细胞介素18成熟蛋白(mature chicken interleukin 18,mChIL-18)基因亚克隆至原核表达载体pET-28a(+),并在大肠杆菌中高效表达,采用Ni-NTA亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫BALB/c小鼠,经融合、筛选制备特异性单克隆抗体(mAb),并通过间接ELISA、间接免疫荧光(IFA)和Western blot等方法对mAb做初步鉴定。结果表明,试验成功表达了mChIL-18蛋白,并获得2株持续且稳定分泌抗体的杂交瘤细胞(1G9、2E6),其腹水ELISA效价分别为1:5.12×105和1:3.2×104,亚类鉴定结果均为IgM。Western blot结果显示,2株单抗均能特异性识别原核表达的mChIL-18蛋白,IFA分析表明它们均能与真核表达的mChIL-18发生特异性反应,ELISA叠加试验证实1G9与2E6针对2个不同的抗原表位。本研究所获单抗可以用于建立鸡IL-18的检测方法,为进一步开展其生物学功能研究奠定了基础。
- 苏倩倩王肖祎李恩扩彭志成胡敬东
- 关键词：鸡白细胞介素18单克隆抗体特异性鉴定
- 鸡白介素18成熟蛋白的发酵工艺及其对新城疫疫苗的免疫增强作用被引量：2
- 2012年
- 为探讨重组鸡白介素18(mChIL-18)毕赤酵母工程菌在5L发酵罐中大规模发酵的工艺及其对新城疫疫苗的免疫增强作用,复苏工程菌GS115/pPIC9K-mChIL-18于YPD培养基,在其D600值达到5.2左右时转入发酵罐中,采用分批补料方式对毕赤酵母工程菌进行高密度发酵。控制和优化各种发酵条件,经历84h结束发酵。将发酵液离心,用6×His镍柱对上清中的表达产物进行纯化,并将纯化后的mChIL-18用脂质体包被后和新城疫疫苗一起对鸡群免疫。结果显示,毕赤酵母工程菌在5L发酵罐采用甲醇诱导补料批式发酵,在pH5.5,溶氧值20%～30%,温度28℃,诱导72h,mChIL-18的表达产量为560mg/L,发酵上清经纯化后纯度可达70%以上;用0.2mL的mChIL-18脂质体能够显著增强机体的免疫力,其中HI抗体效价和淋巴细胞亚群CD4+、CD8+含量均显著高于对照组。这表明mChIL-18毕赤酵母工程菌在5L发酵罐高密度发酵成功,并能显著增强新城疫疫苗的免疫效果,为IL-18在生产实践得到更好的应用奠定了基础。
- 张海滨周明东周霞苏倩倩胡敬东赵宏坤
- 关键词：发酵工艺新城疫疫苗免疫增强
- 全株玉米青贮饲粮对生长育肥猪生产性能的影响
- 玉米是我国种植的三大粮食作物之一，但大部分的玉米秸秆却未被高效利用，造成农副产品的利用率低。因此，如何提高农副产品的附加值和资源的综合利用率十分必要。玉米秸秆经过生物发酵后，有利于动物的消化吸收。猪作为典型的单胃动物，具...
- 苏倩倩
- 关键词：生长育肥猪屠宰性能
- 鸡白细胞介素18成熟蛋白的表达、纯化及其单克隆抗体的制备与特性鉴定
- 白细胞介素18能明显诱导Th1和NK细胞产生IFN-γ，还可诱导IL-2、GM-CSF及TNF-α等多种细胞因子的产生。IL-18不但具有抗病毒、抗肿瘤活性，也可作为加强和改善机体免疫应答的免疫佐剂，与病毒的保护性抗原基...
- 苏倩倩
- 关键词：原核表达蛋白纯化单克隆抗体特异性检测
- 4种植物提取物对肉鸡氨气散发、生长性能及血液生化指标的影响被引量：17
- 2012年
- 研究旨在观察比较樟科(CFPE)、丝兰(YE)、一串红(SS)和桂花(OFL)植物提取物对肉鸡氨散发量、生产性能、免疫机能以及血液生化指标的影响。将500只0日龄AA肉鸡随机分为5组:即肉桂、丝兰、一串红和桂花提取物200mg/kg添加试验组,及基础日粮对照组。每个试验组4个重复,每个重复25只。结果表明,与对照组相比,各试验组均显著降低氨气的散发(P<0.05),提高日增重,降低料肉比(P<0.05),显著改善肉鸡血液生化指标(P<0.05):增高血清总蛋白的含量,降低血清尿素氮、血清尿酸含量和黄嘌呤氧化酶的活性;同时,桂花组显著提高血液中CD4+的含量和CD4+/CD8+,降低CD8+的含量(P<0.05)。结果提示,日粮中添加肉桂、丝兰、一串红、桂花提取物均能显著改善肉鸡生长性能,增强机体免疫机能,且在降低鸡舍中的氨气浓度,改善饲养环境方面,一串红、桂花植物提取物完全可以达到甚至超过樟科、丝兰植物提取物的作用效果。
- 周霞张海滨周明东苏倩倩陈雪锋赵宏坤
- 关键词：脲酶抑制剂肉鸡血液指标
