胡友金
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 供职机构：中南大学湘雅医学院医学遗传学国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 联合锌指酶的靶向rDNA区的非病毒载体系统的建立
- 背景 基因治疗是二十一世纪最具潜力的疾病治疗方式.载体的选择在基因治疗中具有非常重要的作用,目前主要分为病毒载体和非病毒载体两大类,由于病毒载体的随机整合特性以及本身的免疫原性而存在安全性的隐患,非病毒载体受到了广泛的关...
- 胡友金
- 关键词：基因打靶基因治疗RDNA
- 骨髓间充质干细胞核糖体DNA区非病毒基因打靶平台的建立
- 背景:干细胞基因治疗有望为许多重大疾病治疗方法的发展带来突破。基因转移载体和靶细胞是基因治疗的两个关键因素。本室开发了一种全新的非病毒基因打靶载体——核糖体DNA区打靶载体，该载体避开了病毒载体的强免疫原性及普通载体的随...
- 胡友金
- 关键词：骨髓间充质干细胞基因打靶非病毒载体
- 文献传递
- 用原核增强子提高hTERT启动子介导的基因表达被引量：8
- 2006年
- 目的：探讨原核增强子能否提高hTERT启动子的转录活性及对其肿瘤特异性的影响。方法：将增强子SV40、CMV分别或组合构建一系列GFP和荧光素酶报告基因载体，转染人肝癌、鼻咽癌、宫颈癌、结直肠癌细胞、成纤维肉瘤和正常成纤维细胞，流式细胞仪计数和双荧光酶分析系统检测基因的表达效率。结果：在正常成纤维细胞中这些载体均不能有效表达；而在肿瘤细胞中hTERT启动子能介导基因表达但效率不高，增强子能使基因表达增强3～26倍，特别是单独CMV增强子和SV40-CMV双增强子使荧光素酶表达提高20-26倍，是常用的CMV增强子／启动子的2～7倍；完整CMV增强子／启动子对hTERT启动子的活性影响因不同细胞而异。结论：增强子能显著增强hTERT启动子的转录活性并对其肿瘤特异性没有影响，CMV增强子或SV40-CMV双增强子／hTERT启动子是高效特异的通用调控元件，用于靶向性肿瘤基因治疗具有巨大潜力。
- 王丽娜李卓薛志刚薛金锋胡友金周银李剑潘乾夏昆梁德生夏家辉
- 关键词：端粒基因表达
- 真核细胞中多重表达框mRNA的选择性翻译起始(英文)被引量：1
- 2015年
- 扫描模型和遗漏扫描模型是真核生物m RNA翻译起始的两种主要机制,但其仍存在某些例外情况,如对具有多顺反子结构的m RNA,选择性翻译起始的发生机制目前仍不清楚.本研究基于GFP蛋白开放表达框(ORF)构建了一系列重组表达载体,用以转录在移码翻译顺序及同一翻译顺序下,AUG起始密码子处于不同序列背景,以及间隔不同距离的多顺反子结构m RNA.通过转染人Bel-7402细胞系,研究了这些多顺反子结构m RNA的翻译起始模式.结果表明,在移码翻译顺序下,多顺反子m RNA可翻译出对应的不同蛋白质,而在同一翻译顺序下,GFP蛋白表达框中的多个AUG密码子,仅有首位起始密码子可发挥作用,提示核糖体在从首位起始密码子开始翻译的同时,可能会有部分核糖体继续向下扫描并识别下游的起始密码子,而这种选择性的翻译起始效率,主要取决于密码子所处的序列背景及间隔距离等因素.
- 薛金锋刘雄昊李卓胡友金薛志刚谭杨高庭吴奔邬玲仟梁德生
- 关键词：翻译起始核糖体
- 人核糖体DNA打靶载体介导mda-7基因对肝癌的体外基因治疗研究(英文)被引量：1
- 2009年
- 人核糖体DNA打靶载体pHr是一种由中南大学医学遗传学国家重点实验室开发构建的针对人类基因组的同源重组质粒载体.利用pHr构建了一种mda-7/GFP融合基因的人源基因表达载体pHr-CMG,并研究了其在肝癌细胞系Bel-7402中的作用.利用荧光显微镜、RT-PCR和Western blotting检测了mda-7/GFP融合基因的表达;利用细胞周期分析、MTT和Hoechst33258染色研究了其在细胞中的作用.结果显示,pHr-CMG载体能在Bel-7402细胞中有效表达MDA-7/GFP融合蛋白,进而抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡,推测其可能是由载体表达了mda-7基因引起细胞在G2/M期累积所导致的.同时,实验结果证实了人核糖体DNA打靶载体系统以及pHr-CMG表达载体的有效性,为其在进一步基因治疗研究中的应用提供了理论和实验基础.
- 薛金锋刘雄昊何嫱薛志刚胡友金李卓杨俊林高庭潘乾龙志高邬玲仟夏昆梁德生夏家辉
- 关键词：肝癌基因治疗
- 胎膜来源的间充质干细胞促进烧伤愈合的研究被引量：3
- 2010年
- 目的:研究胎膜来源的间充质干细胞在治疗SD大鼠Ⅲ度烧伤中的作用。方法:用胰酶消化法分离足月产胎膜细胞,加入Amino-MAXⅡ培养基进行培养。流式细胞仪检测细胞表面标志物CD29、CD73、CD14、CD45。分别用浓度为3mg/ml、5mg/ml、7mg/ml、9mg/ml的明胶溶液包被脱细胞真皮(ADM),以5×106/ml的密度将细胞种植在包被和未包被的ADM表面,2小时后收集未贴附在ADM上的细胞,计算细胞种植效率。实验组:以7mg/ml的明胶包被ADM,以5×106/ml的密度种植第2～3代细胞,培养3～5天后,移植至SD大鼠Ⅲ度烧伤创面;对照组Ⅰ移植单纯的ADM,对照组Ⅱ未进行移植,术后定期观察创面大体情况,计算创面收缩率、表皮再生面积比例,第5周切取新生皮肤组织行HE染色。结果:胎膜分离的细胞以长梭形为主,表达与间充质干细胞相关的表面抗原标志物CD29、CD73,极少表达造血细胞标志物CD14、CD45。不同浓度明胶溶液包被和未包被的ADM,其细胞种植效率均无明显区别(P>0.05);相比对照组,实验组移植物成活时间更长,创面再上皮化时间较早,创面收缩率较小,再生表皮面积亦较多(P<0.05);再生表皮更厚,有明显的表皮突,真皮层毛细血管丰富。结论:成功分离、培养了胎膜来源的间充质干细胞。胎膜来源间充质干细胞复合ADM可促进SD大鼠Ⅲ烧伤创面表皮再生,加速创伤愈合,抑制创面收缩。
- 刘雄昊戴国胜冯劢赵凯吴奔杨俊林胡友金李卓薛金锋邬玲仟梁德生
- 关键词：胎膜间充质干细胞脱细胞异体真皮烧伤治疗皮肤组织工程
- 利用锌指酶提高人源基因载体打靶效率的初步研究
- 背景：基因治疗是指通过一定的方法将外源DNA分子导入病人体细胞并有效表达，从而纠正缺陷性状和表型，达到治疗疾病的目的。目前应用于基因治疗的的载体主要包括病毒载体和非病毒载体两大类.病毒载体和非病毒载体都具有各自的优势，被...
- 胡友金
- 关键词：基因治疗非病毒载体打靶载体
- 文献传递
