索耀君
- 作品数：16 被引量：43H指数：4
- 供职机构：浙江大学医学院附属儿童医院更多>>
- 发文基金：山西省自然科学基金国家自然科学基金山西省科学技术发展计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 大鼠脊髓T11段全横断损伤模型的建立及护理被引量：13
- 2007年
- 目的制备大鼠脊髓T11全横断动物模型,模拟脊髓损伤,为后期的干细胞移植治疗研究提供实验依据。方法16只健康Wistar大鼠随机分为两组:对照组(n=8)及脊髓损伤组(SCI组,n=8)。SCI组咬除T9-T10棘突及相应椎板,横切断暴露的脊髓T11,夹除约0.3-0.5cm脊髓,对照组仅行椎板切除术。术后1,3,7,14,21d分别进行BBB运动功能评分。对模型进行人工排尿、排便、悬吊鼠尾等护理措施。结果SCI组所有动物在术后均表现出典型的脊髓截瘫症状,BBB运动功能评分很低,与对照组相比具有非常显著性差异(P<0.01)。护理措施降低了截瘫大鼠并发症的发生。结论建立了大鼠脊髓T11段全横断损伤模型,并摸索出了一套有效的截瘫模型的护理方法。
- 蔚洪恩王春芳李鹏飞李静王晓霞王晋丽索耀君
- 关键词：脊髓损伤动物护理
- 不同吸烟量对大鼠气道上皮细胞ICAM-1表达的影响
- 目的：通过研究不同吸烟量、不同吸烟持续时间吸烟及戒烟对大鼠气道上皮细胞粘附分子-1(ICAM-1)mRNA及其蛋白水平表达的影响，探讨吸烟和戒烟与慢性阻塞性肺疾病气道炎症的关系。
方法：8周龄健康雄性Wista...
- 索耀君
- 关键词：慢性阻塞性肺病吸烟量气道上皮细胞ICAM-1表达炎症反应
- 文献传递
- 人脐血间充质干/祖细胞诱导为神经样细胞的实验研究被引量：6
- 2005年
- 目的探讨人脐血间充质干细胞用于神经细胞再生的可行性与人脐血间充质干/祖细胞最佳的诱导培养条件。寻找一种合适的细胞来源进行移植以代替受损的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞来修复神经损伤。方法将脐血单个核细胞置于低血清(2%)达氏修正依氏培养基中培养,生成贴壁细胞层,依传代方法,用相同培养条件进行扩增,扩增后的贴壁细胞置入细胞培养液(加入新生大鼠神经细胞分离培养上清液)中,并添加表皮生长因子(EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)进行诱导分化。采用流式细胞术、免疫组织化学法分别检测被诱导的神经样细胞的表面标志及细胞特异性标志、结构,并进行分析。结果脐血间充质干/祖细胞克隆在脐血单个核细胞中出现频率为0.5×10-6,在传20代时,可有效扩增1.5×106倍,诱导后,70%的脐血间充质干/祖细胞分化为神经样细胞。结论采用上述扩增与诱导条件,脐血间充质干/祖细胞可得到有效扩增,并可高效向神经样细胞分化,从而证实脐血是一种细胞替代治疗前景光明的细胞来源。
- 于雁玲索耀君秦博郭宇宁李鑫楠吴启龙王春芳
- 关键词：神经样细胞细胞诱导脐血单个核细胞神经细胞再生少突胶质细胞细胞来源
- Wnt3a在大鼠骨髓源性胆碱能神经元中的表达被引量：5
- 2008年
- 目的通过研究大鼠骨髓基质细胞诱导的胆碱能神经元中Wnt3a的表达变化,了解Wnt3a在胆碱能神经元诱导分化过程中的作用,揭示神经元分化过程中可能的信号通路。方法取Wistar雄性大鼠的股骨骨髓,培养骨髓基质细胞,经三代纯化CD71免疫细胞化学鉴定后进行分组实验。实验共分四组:骨髓基质细胞组,未加任何诱导因子;胆碱能神经元诱导分化组,加入Shh,RA和bFGF诱导基质细胞向胆碱能神经元分化,并用ChAT鉴定胆碱能神经元;神经干细胞诱导组,加入bFGF、EGF和RA诱导基质细胞为神经干细胞;自然分化组,加入血清诱导分化。提取细胞总RNA,利用RT-PCR进行Wnt3a的半定量分析。结果与对照的骨髓基质细胞组,神经干细胞诱导组及自然分化组相比,Wnt3a在胆碱能神经元组中表达最高并且有统计学差异。结论Wnt3a在骨髓基质细胞来源的胆碱能神经元中高表达,提示Wnt3a可能是胆碱能神经元分化的Wnt信号通路中的一个环节。
- 王晋丽王春芳王晓霞李鹏飞李静蔚洪恩索耀君王菲
- 关键词：骨髓基质细胞分化胆碱能神经元WNT3A
- 不同吸烟量对大鼠气道上皮细胞中细胞间黏附分子1表达的影响
- 2009年
- 目的通过研究不同吸烟量、不同吸烟持续时间吸烟及戒烟对大鼠气道上皮细胞中细胞间黏附分子1（intercellular adhesion molecule-1，ICAM-1）mRNA及其蛋白水平表达的影响，探讨吸烟和戒烟与慢性阻塞性肺疾病气道炎症的关系。方法雄性Wistar大鼠40只，随机分为对照组、长期大量吸烟组、长期小量吸烟组、短期大量吸烟组、长期大量吸烟后戒烟组，每组各8只，用原位杂交法及免疫组织化学法检测ICAM-1mRNA及其蛋白在各组大鼠气道上皮细胞中的表达。结果与对照组ICAM-1 mRNA及其蛋白（1．45±0．98，8．83±0．77）水平比较，长期大量吸烟组（6．93±1．44，19．22±0．22）、短期大量吸烟组（2．92±0．67，12．91±1．31）、长期小量吸烟组（4．76±0．68，14．03±2．39）、长期大量吸烟后戒烟组（4．84±0．94，14．95．±1．82）表达均明显升高，以长期大量吸烟组最为显著，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。与长期大量吸烟组相比，长期小量吸烟组、短期大量吸烟组、长期大量吸烟后戒烟组ICAM-1 mRNA及其蛋白水平均低于长期大量吸烟组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论吸烟引起大鼠气道上皮细胞ICAM-1 mRNA及其蛋白的表达水平升高，并随吸烟时间和量的增加其表达增加，戒烟后其表达可下降。提示戒烟可减轻气道炎症，是预防慢性阻塞性肺疾病的有效措施。
- 索耀君许建英
- 关键词：吸烟慢性阻塞性肺疾病细胞间黏附分子1
- 人脐血单个核细胞的体外培养观察被引量：1
- 2006年
- 目的对脐血间充质干细胞进行体外培养,以进一步阐明其生物学特性,为今后的基础研究和临床应用打好基础。方法采用DMEM培养基培养脐血单个核细胞,流式细胞仪检测细胞表面标志。结果脐血单个核细胞在体外培养24d时,细胞表面CD11b、CD34、CD44和CD45表达阴性,GFAP和nestin表达也为阴性。结论培养所得的单个核细胞区别于脐血中的造血干细胞。
- 索耀君王春芳马韬秦博李鑫楠吴启龙郭宇宁李静李鹏飞窦岩赵嘉惠田树华
- 关键词：胎血间质细胞造血干细胞细胞培养
- 大鼠骨髓基质细胞表面抗原CD71、CD44和CD45的检测被引量：4
- 2007年
- 目的研究表面抗原CD71、CD44和CD45在体外培养的大鼠骨髓基质细胞的表达,了解骨髓基质细胞的生物学特性。方法采用全骨髓法分离培养大鼠骨髓基质细胞,待原代培养的细胞达70%以上汇合时,用含胰酶和EDTA的消化液消化细胞,进行传代培养。传至第3代(P3)的骨髓基质细胞采用流式细胞术检测表面抗原CD71、CD44和CD45的表达,专用配套软件计算细胞表面抗原阳性%率。结果骨髓基质细胞呈纺锤形、成纤维细胞样生长,漩涡状分布。传至第3代的细胞形态趋于一致。流式细胞仪检测结果显示,CD71、CD44和CD45阳性细胞百分比分别为99.07±7.6%、52.81±7.3%和10.85±5.0%。结论P3的骨髓基质细胞具有较强的增殖特性。
- 蔚洪恩王春芳李鹏飞窦岩索耀君
- 关键词：骨髓基质细胞表面抗原
- MiR-615在平行培养的神经干细胞与运动神经元的表达比较被引量：2
- 2012年
- 目的探讨MiR-615在脊髓源性神经干细胞与运动神经元间的表达特征。方法通过免疫磁珠法分离纯化胚胎大鼠脊髓运动神经元;通过神经克隆球形成技术分离纯化胚胎大鼠脊髓源性神经干细胞。采用TaqMan miR-615Assay定量检测培养的脊髓源性神经干细胞与运动神经元中miR-615的表达差异。结果通过平行培养技术分别获得了纯化的脊髓源性神经干细胞与运动神经元。定量检测结果显示,miR-615在分离的运动神经元中较在脊髓源性神经干细胞中显著高表达。结论本文提示miR-615可能在神经干细胞定向分化为运动神经元过程中发挥重要的调节作用。
- 索耀君王春芳
- 关键词：神经干细胞运动神经元
- 人脐血间充质干细胞诱导分化为神经细胞的研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨体外诱导人脐血间充质干细胞(MSCs)向神经细胞分化的条件,为治疗中枢神经系统损伤提供实用的干细胞来源。方法体外分离、纯化、扩增脐血MSCs,流式细胞仪检测细胞表面标志。采用脑源性神经营养因子BDNF 10ng/ml+维甲酸RA0.5μM+碱性成纤维生长因子bFGF 20ng/ml协同诱导脐血MSCs定向分化。免疫荧光染色检测诱导后细胞的星形胶质细胞特异标志GFAP及神经元特异标志MAP2的表达情况。建立大鼠脊髓横断损伤模型,将BrdU标记的诱导后的细胞移植入损伤的脊髓中,采用BBB运动功能评分标准在术后24h及1、2、3、4、5周各时间点对大鼠进行运动功能评分。用组织学和免疫组化方法检测移植到大鼠脊髓中的BrdU阳性细胞的存活、迁移、分化情况。结果脐血MSCs体外培养三代后,细胞表面CD11b、CD34、CD45和CD44表达阴性。诱导分化7d后,大部分细胞的形态类似神经元,免疫荧光染色检测MAP2阳性细胞占大多数,明显多于GFAP阳性细胞。5周后,细胞移植组大鼠的后肢运动功能恢复情况较对照组好。免疫组织化学结果显示植入的细胞可长时间在宿主脊髓中存活,并向损伤处两端迁移。结论人脐血MSCs于体外在特定的条件下可以诱导分化为神经元样细胞。移植脐血MSCs诱导后的神经细胞可在损伤的脊髓中存活、迁移,并能促进脊髓损伤后行为和功能恢复。
- 李静王春芳王晓霞李鹏飞索耀君
- 关键词：人脐血间充质干细胞神经细胞脊髓损伤
- 骨髓基质干细胞的诱导分化及其治疗癫痫的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨骨髓基质干细胞诱导分化为神经元样细胞的方法及脑内移植治疗大鼠癫痫模型的作用。方法无菌条件下分离纯化BMSCs,用bFGF 10ng/ml、RA0.5μmol/L的DMEM/F12诱导72h后,部分用于免疫荧光检测nestin,其余的继续用bFGF 10ng/ml、RA 0.5μmol/L及神经营养因子NT-3 20ng/ml、BDNF 20ng/ml的DMEM/F12诱导4d,检测GAD67。皮下注射匹罗卡品建立癫痫大鼠模型,采用行为学分析筛选模型。通过立体定位仪,用微量注射器将BMSCs来源的神经干细胞和神经营养因子移植入癫痫鼠海马内,观察大鼠行为变化,存活2、4周后,心脏灌注取脑,冰冻切片免疫组化双标检测移植细胞的存活、迁移、分化情况。结果BMSCs诱导72h后,nestin表达阳性,4d后GAD67检测60%阳性。采用匹罗卡品造模,方法简便,但死亡率较高,仅15%-20%的动物造模成功。BMSCs源神经干细胞移植后可在海马内存活,向周围的脑区内迁移和整合。结论BMSCs源的神经干细胞在体外可诱导为γ-氨基丁酸能神经元并且对慢性癫痫有一定的治疗作用。
- 王晓霞王春芳李鹏飞李静索耀君
- 关键词：骨髓基质干细胞Γ-氨基丁酸能神经元癫痫
