祖勉
- 作品数：10 被引量：55H指数：4
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院药物研究所更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家科技重大专项卫生行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 临床常用中成药的体外抗流感病毒活性评价被引量：24
- 2010年
- 本文旨在研究我国临床常用清热解毒中成药的体外抗病毒活性。通过应用已建立的流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)抑制剂筛选模型,评价了33种临床常用中成药的NA抑制活性,应用已建立的流感病毒诱导的细胞病变效应模型,对具有NA抑制作用的部分中成药进行了体外抗病毒活性评价。结果表明,临床常用中成药液体制剂的NA抑制活性普遍较高,包括双黄连口服液、清开灵口服液、清热解毒口服液和热毒宁注射液,其中双黄连口服液在细胞水平对于病毒感染所致细胞病变效应(CPE)也具有较高抑制活性;中成药固体制剂中,双黄连注射粉针的NA抑制活性最高,而复方鱼腥草片则显示较高的体外抗病毒活性。综合分析表明,大多数中成药具有一定的NA抑制活性,但只有部分药物具有明显的体外抗病毒活性,其活性结果对于中成药的活性物质基础研究和临床用药将具有指导意义。
- 祖勉周丹高丽刘艾林杜冠华
- 关键词：流感病毒神经氨酸酶细胞病变效应中成药
- 茶黄素及其衍生物的体外抗流感病毒活性研究
- 本文旨在研究茶黄素及其衍生物(TFs)的体外抗流感病毒活性,并对其作用机制进行初步探讨。分别应用本实验室已建立的流感病毒神经氨酸酶(Neuraminidase,以下简称NA)抑制剂筛选模型和流感病毒血凝素(hemaggl...
- 祖勉刘艾林杜冠华
- 关键词：抗病毒抗炎流感病毒
- 文献传递
- 流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选模型的建立被引量：3
- 2013年
- 目的:建立适于高通量筛选的流感病毒核酸内切酶(PAN)抑制剂筛选模型。方法:在大肠杆菌中诱导表达质粒,经蛋白纯化和浓缩,得到目的蛋白PAN。提取噬菌体M13K07的单链环状DNA为底物,应用荧光定量方法建立PAN抑制剂高通量筛选体系,并对应用虚拟筛选技术挑选的100个样品进行PAN抑制活性筛选。结果:反应体系在底物质量浓度0.2μg.mL-1,pH 9.0,Mn2+浓度1 mmol.L-1,37℃温孵60 min的条件下酶活性最佳。此时Z'因子为0.77,可用于高通量筛选。筛选结果发现7个样品对PAN具有抑制活性。结论:本研究建立的流感病毒核酸内切酶抑制剂高通量筛选体系可用于PAN抑制剂的筛选。
- 周伟玲杨帆祖勉李超刘艾林杜冠华
- 关键词：流感病毒高通量筛选
- 茶黄素及其衍生物药理作用研究进展被引量：11
- 2011年
- 目的简述茶黄素及其衍生物的来源,化学结构和合成转化,重点讨论茶黄素及其衍生物的药理作用及其主要作用机制。方法查阅近年茶黄素药理作用相关研究文献,结合本实验室近期相关工作,通过分析、归纳进行评述。结果茶黄素类具有抗心血管系统疾病、抗炎、免疫调节和抗肿瘤、抗病毒等多种药理作用。结论茶黄素类作为药用资源具有广泛的药理作用,对其作用机制的深入研究将为进一步开发奠定理论基础。
- 祖勉刘艾林杜冠华
- 关键词：茶黄素衍生物药理作用
- 淫羊藿苷对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体的保护作用被引量：10
- 2010年
- 目的:探讨淫羊藿苷(ICA)对快速老化小鼠SAMP8脑线粒体功能的影响。方法:将8月龄快速老化小鼠SAMP8随机分为模型组、盐酸多奈哌齐1mg/kg组、吡啦西坦200mg/kg组、ICA75mg/kg组和150mg/kg组,每组6只;8只同月龄抗快速老化小鼠SAMR1作为正常对照组。给药30d后,提取小鼠脑线粒体,测定线粒体呼吸功能、肿胀度、膜电位、活性氧(ROS)和ATP含量。结果:与SAMR1正常对照组相比,SAMP8小鼠脑线粒体呼吸功能显著降低,表现为线粒体Ⅲ态呼吸明显降低,Ⅳ态呼吸改变不明显,呼吸控制指数和磷氧比值降低(P<0.05);线粒体膜肿胀度增高,膜电位降低,线粒体内ROS含量增高,而ATP含量明显降低(P<0.05)。与SAMP8模型组相比,ICA75mg/kg和150mg/kg均可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和呼吸功能(P<0.05,P<0.01)。结论:ICA可明显改善SAMP8小鼠脑线粒体结构和功能。
- 吴满刚贺晓丽强桂芬时丽丽李晓秀祖勉刘东华毕明刚杜冠华
- 关键词：淫羊藿苷快速老化小鼠阿尔茨海默病线粒体
- 临床常用中药的神经氨酸酶抑制活性评价
- 流感病毒神经氨酸酶(NA)是一种重要的病毒表面糖蛋白,可催化裂解唾液酸残基与邻近寡糖之间的α-糖苷键,有利于病毒顺利穿透呼吸道黏液层到达易感细胞表面,促进病毒找到合适的胞饮位点进入靶细胞,促进子代病毒释放并抑制子代病毒的...
- 祖勉刘艾林杜冠华
- 关键词：流感神经氨酸酶抑制剂活性评价
- 文献传递
- 虎杖抗H1N1流感病毒神经氨酸酶活性成分研究被引量：7
- 2012年
- 目的:分离和鉴定虎杖乙酸乙酯提取物中能显著抑制H1N1流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的活性成分。方法:基于药理活性导向法,综合利用硅胶,葡聚糖凝胶和制备液相等色谱分离虎杖提取物活性成分,采用MS和NMR等波谱数据及其理化性质鉴定分子结构。结果:从虎杖乙酸乙酯活性部位分离出7个化合物,分别鉴定为:2-methoxystypandrone(1),大黄素(2),白藜芦醇(3),虎杖苷(4),大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5),(E)-3,5,12-trihydroxystilbene-3-O-β-D-glucopy-ranoside-2'-(3″,4″,5″-trihydroxybenzoate)(6)和儿茶素-3-O-没食子酸酯(7);NA测试表明化合物3,6和7显著抑制NA活性,IC50分别为129.8,44.8,21.3μmol·L-1,进一步CPE测试表明化合物6和7具有显著抗H1N1流感病毒效果(EC50分别为5.9,0.9μmol·L-1),对宿主MDCK细胞表现出非常低的细胞毒性,选择性指数分别为56和269。结论:基于药理活性导向从虎杖提取物中分离鉴定出能显著抗H1N1流感病毒的神经氨酸酶抑制剂,对阐明其药效物质基础和抗流感药物研发具有指导意义。
- 陈考坛周伟玲刘嘉炜祖勉何紫凝杜冠华陈蔚文刘艾林
- 关键词：虎杖甲型H1N1流感神经氨酸酶抑制剂
- 重组人CLK1的真核表达及鉴定
- 2014年
- 目的:合成真核细胞CLK1(Cdc2-like kinase 1)编码基因,构建CLK1/pEGFP-N2真核表达载体并在真核细胞HEK293A中过表达,为CLK1的生物学功能研究奠定基础。方法:从人脐静脉血管内皮细胞中提取总RNA,采用RT-PCR技术用已知引物合成cDNA,将CLK1基因扩增后插入真核细胞表达载体pEGFP-N2,将重组质粒热转化至大肠杆菌感受态Trans 10细胞中获得重组菌株,提取质粒进行酶切鉴定及插入基因测序;将构建的重组质粒转染HEK293A细胞,用Western印迹及免疫荧光检测CLK1的表达水平,同时对其下游的磷酸化SF2/ASF蛋白进行检测。结果:构建了CLK1/pEGFP-N2真核表达载体,将其转染HEK293A细胞后24 h,CLK1蛋白表达水平最高;同时,CLK1过表达后使得下游的SF2/ASF蛋白磷酸化水平升高。结论:构建了人CLK1基因的真核细胞表达载体CLK1/pEGFP-N2,并在HEK293A细胞中过表达,其生物活性也得到了验证。本研究为外源性CLK1基因在真核细胞中过表达提供了一种途径,为CLK1的生物学功能研究奠定了基础,也可为真核细胞其他蛋白表达体系的构建提供借鉴。
- 李超祖勉连雯雯刘艾林杜冠华
- 关键词：真核表达重组质粒
- 没食子酸酯衍生物的抗流感用途
- 本发明公开了三种没食子酸酯衍生物在预防和治疗流感疾病中的应用。本发明的创新之处在于：三种没食子酸酯衍生物对所有类型流感病毒均具有神经氨酸酶抑制作用；具有抗流感病毒作用；可以抑制流感病毒所致炎症因子和炎症化学趋化因子的产生...
- 刘艾林陈若芸杜冠华祖勉刘超王洪庆周伟玲冯章英马林
- 文献传递
- 黄酮衍生物体外抗流感病毒及抗炎活性评价
- 目的 通过细胞水平抗流感病毒活性模型,评价一系列黄酮衍生物的体外抗病毒活性,以发现新型抗流感病毒活性化合物,为进一步结构优化提供依据.方法 应用已建立的细胞水平的抗流感病毒筛选模型,对100个黄酮衍生物进行活性筛选；利用...
- 祖勉高丽刘艾林杜冠华
- 关键词：流感病毒抗炎抗病毒
