田雷
- 作品数：11 被引量：41H指数：2
- 供职机构：东北农业大学食品学院乳品科学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：黑龙江省教育厅科学技术研究项目博士科研启动基金黑龙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 牛αS1酪蛋白5′调控序列驱动报告基因LacZ在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达
- 2007年
- αS1酪蛋白是牛乳中含量最高的酪蛋白.本研究克隆了牛αS1酪蛋白5′调控序列约1.2kb的片段,应用基因重组技术将其插入lacZ基因上游,构建真核表达载体gαs1p-psv.胶原酶消化法对奶山羊乳腺上皮细胞进行了分离培养,并用免疫荧光法鉴定了乳腺上皮细胞.将重组载体转染奶山羊乳腺上皮细胞,在细胞培养液中,转染后24h可以检测到lacZ基因的表达,之后表达水平有逐渐升高的趋势,72h开始降低,144h降到最低;在细胞破碎液中,转染后24h表达水平最高,之后表达水平有逐渐降低的趋势,144h降到最低.转染细胞的第1代表达水平最高,随细胞传代表达水平降低,传到第3代时基本检测不到表达产物.对转染后的细胞进行了β-半乳糖苷酶原位细胞染色.实验证明,得到的牛αS1酪蛋白5′调控序列能指导外源基因在奶山羊乳腺上皮细胞中表达.
- 田雷李庆章张莉
- 关键词：山羊乳腺上皮细胞Β-半乳糖苷酶基因表达
- LacZ基因在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达
- 本文对LacZ基因在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达进行了探讨。本研究从荷斯坦奶牛的乳腺组织中提取了基因组DNA，以此DNA为模板通过PCR技术克隆了牛αS1-酪蛋白基因的5’调控序列1 195bp的片段。对此DNA片段进行序...
- 田雷
- 关键词：上皮细胞基因表达
- 文献传递
- 泌乳奶牛乳腺中LAT1和4F2hc的表达定位研究
- 2013年
- 采用荧光定量RT-PCR和间接免疫荧光方法对泌乳期高乳蛋白率、泌乳期低乳蛋白率以及干奶期的荷斯坦奶牛乳腺中LAT1和4F2hc的表达变化与定位变化进行研究,结果表明,泌乳期高乳蛋白率的荷斯坦奶牛乳腺中LAT1特异在乳腺腺泡上皮细胞基底侧表达,4F2hc在乳腺腺泡上皮细胞中表达,LAT1和4F2hc的表达量均显著高于泌乳期低乳蛋白率的荷斯坦奶牛和干奶期的荷斯坦奶牛,预示在奶牛乳腺泌乳过程中,LAT1和4F2hc参与调控乳蛋白的生物合成速率。
- 林叶侯晓明李庆章田雷闫宏博李春黄田英
- 关键词：奶牛泌乳乳腺
- 必需氨基酸上调乳腺腺泡中L型氨基酸转运载体1的表达被引量：1
- 2014年
- 为探讨泌乳乳腺中必需氨基酸与L型氨基酸转运载体1(L-type amino acid transporter 1,LAT1)表达之间的关系,本研究通过体外构建奶牛乳腺泌乳模型,采用免疫印迹方法检测生理浓度的必需氨基酸对乳腺腺泡中LAT1及其辅因子4F2重链(4F2heavy chain,4F2hc)表达变化的影响。结果表明,生理浓度的必需氨基酸显著上调体外培养的奶牛乳腺腺泡中LAT1和4F2hc的表达,提示LAT1是奶牛乳腺上皮细胞内负责转运必需氨基酸的主要转运载体,LAT1和4F2hc的表达受必需氨基酸的诱导。
- 林叶侯晓明田雷齐帮若李庆章
- 关键词：必需氨基酸
- 人α-乳白蛋白在奶牛乳腺上皮细胞中的表达被引量：1
- 2011年
- 将人α-乳白蛋白(α-LA)0.76 kb的cDNA序列连接到PSV载体SV40启动子后,构建真核表达载体hα-LA–psv。将构建的真核表达载体转染奶牛乳腺上皮细胞,人α-乳白蛋白的表达量约为0.85 g/L。结果表明,构建的真核表达载体能够在体外培养的牛乳腺上皮细胞中高效表达人α-乳白蛋白。
- 张莉李庆章田雷崔英俊赵冰吕英高学军姜毓君
- 关键词：基因表达奶牛乳腺上皮细胞
- 复合酶对蛋鸡、仔猪、奶牛生长性能影响的研究
- 2009年
- 试验在蛋鸡、仔猪、奶牛三类动物日粮中添加复合酶进行空白对比,了解饲用复合酶对蛋鸡、仔猪、奶牛生长性能的影响。
- 田雷
- 关键词：复合酶蛋鸡仔猪奶牛
- 牛αs1-酪蛋白5′调控序列调控人α-乳白蛋白DNA序列真核表达载体的构建
- 牛乳和人乳在组成上是有差别的,人乳蛋白主要是乳清蛋白,约占总蛋白的70%,而牛乳中的蛋白主要是酪蛋白约占总蛋白的78.8%,乳清蛋白含量低,只占总蛋白的21.2%。所以,改良牛乳的蛋白组成和含量,使之更接近于人乳,会提高...
- 张莉李庆章田雷
- 文献传递
- 复合酶对蛋鸡、仔猪、奶牛 生产性能影响的研究
- 田雷
- 关键词：复合酶蛋鸡仔猪奶牛非淀粉多糖
- 牛αS1-酪蛋白5′调控序列驱动人α-LA基因与LacZ基因在牛乳腺上皮细胞中的表达被引量：6
- 2008年
- 将牛αS1-酪蛋白5′调控序列约1.2kb的片段,连接到含SV40启动子调控下β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的PSV载体上,做为启动子,在其后连接0.76kb的人α-乳白蛋白基因(α-LA),构建真核表达载体αS1-LA-psv.采用组织块接种法,培养奶牛乳腺上皮细胞,经传代纯化后,对细胞接种存活率、群体倍增时间、生长曲线、形态学等生物学性状进行检测,用免疫荧光细胞染色法对培养的奶牛乳腺上皮细胞进行角蛋白18鉴定,结果表明,成功建立奶牛乳腺上皮细胞系,细胞传至20代以上时仍保持旺盛的增殖活力.将构建的真核表达载体αS1-LA-psv转染奶牛乳腺上皮细胞,培养24～120h均检测到了β-半乳糖苷酶的表达;培养72h检测到细胞中人α-乳白蛋白的表达,表达量约为0.64g/L.实验结果表明,建立的奶牛乳腺上皮细胞系具有外源基因表达活性,得到的牛αS1-酪蛋白5′调控序列能作为启动子指导外源基因的表达,构建的真核表达载体能在体外培养的牛乳腺上皮细胞中同时表达人α-乳白蛋白和β-半乳糖苷酶.
- 张莉李庆章陈建晖高学军田雷
- 关键词：Β-半乳糖苷酶基因奶牛乳腺上皮细胞基因表达
- 乳腺特异性人α-乳白蛋白真核表达载体的构建
- 2009年
- 从正常人血液中提取人基因组DNA。以其为模板,扩增人α-乳白蛋白(α-LA)2.36kb的总DNA序列,经测序鉴定后,将其连接到PSV载体SV40启动子后,构建真核表达载体LA-DNA-psv.扩增牛XS1-酪蛋白5'调控序列约1.2kb的片段,测序鉴定。切去LA-DNA-psv载体原来的SV40启动子,连接牛αS1-酪蛋白5'调控序列约1.2kb的片段为启动子,构建真核表达载体αS1-LA-DNA-psv。为在动物乳腺中特异高效表达人α-乳白蛋白做准备研究。
- 张莉李庆章田雷
