王芸
- 作品数：12 被引量：62H指数：6
- 供职机构：新疆大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项科技部基础研究重大项目前期研究专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生化学工程农业科学更多>>
- 昆虫抗冻蛋白的研究被引量：9
- 2004年
- 抗冻蛋白是具有热滞活性 ,能结合并抑制冰晶生长和抑制冰的重结晶的一类蛋白质。近几年来 ,昆虫抗冻蛋白的研究取得了较快的发展 ,本文通过分析昆虫抗冻蛋白的结构特点、抗冻活性、作用机制 ,并讨论了抗冻蛋白在食品工业、医学、基因工程方面的应用。结果表明 ,昆虫抗冻蛋白虽然结构呈多样性 ,但有很多关键的残基具有保守性 ,对维持抗冻蛋白结构和功能的完整性发挥着重要的作用 ;抗冻蛋白是由多基因家簇编码的。其作用机制主要是吸附 -抑制机制 ,抗冻蛋白依靠氢键吸附到冰晶格 ,抑制冰晶生长 ;
- 刘忠渊张富春王芸毛新芳
- 关键词：昆虫抗冻蛋白热滞活性
- 赤翅甲抗冻蛋白基因的原核表达及蛋白生物活性检测被引量：19
- 2005年
- 根据GenBank中序列人工合成赤翅甲 Dendroides canadensis 的抗冻蛋白基因 (afp), 将其克隆到载体 pGEX_4T_1上, 构建融合表达的重组质粒, 转化大肠杆菌 BL21并进行原核表达。通过优化表达的诱导条件和SDS_PAGE检测, 证明人工合成的赤翅甲抗冻蛋白基因能够特异性地表达, 并以可溶性融合蛋白形式存在, 相对分子质量约为40 kD。抗冻蛋白的生物活性检测表明, 赤翅甲的抗冻融合蛋白能够提高细菌的耐寒能力。
- 刘忠渊张富春王芸吕国栋
- 关键词：抗冻蛋白原核表达抗冻活性
- 昆虫抗冻蛋白DAFP的原核表达、纯化和抗血清制备被引量：6
- 2005年
- 目的:制备昆虫抗冻蛋白DAFP特异性的鼠抗血清。方法:根据GenBank已发表的Dendroides canadensis抗冻蛋白基因序列(gi:2737939),人工合成加拿大拟步甲虫(Dendroides canadensis)的抗冻蛋白基因(dafp),并克隆到原核表达载体pGEX-4T-1和pMAL-p2x中,在大肠杆菌中进行表达。表达的融合蛋白经Glutathione Sepharose4B纯化后,免疫小鼠制备抗DAFP的抗血清,抗体的效价及特异性分别采用ELISA和Western blot进行检测。结果:SDS-PAGE检测表明,人工合成的dafp基因在大肠杆菌中可表达相对分子质量(Mr)为38000的可溶性融合蛋白。以该融合蛋白免疫小鼠所制备的抗体,其ELISA滴度为1∶5000,Western blot证实BL21/pGEX-4T-1-dafp菌和TB1/pMAL-p2x-dafp菌的表达产物可特异性地与该抗体结合。结论:在大肠杆菌中成功地表达了DAFP的融合蛋白并制备出抗融合蛋白的鼠抗血清,为进一步研究DAFP的特性奠定了基础。
- 王芸吕国栋薛娜张富春马纪
- 关键词：昆虫抗冻蛋白原核表达蛋白印迹抗冻蛋白基因抗血清制备纯化
- 人乳头瘤病毒16型(新疆株)E7基因的克隆与突变研究
- 2003年
- 目的 :克隆分析人乳头瘤病毒 16型 (HPV16 )新疆株的E7基因 ;并对E7基因进行突变改造 ,以比较野生型与突变型HPV16E7基因的功能。方法 :根据从中国新疆维吾尔族妇女宫颈癌活检组织标本中提取的DNA ,进行PCR扩增获得HPV16E7基因 ,然后分别将其克隆到pMD18-T载体上进行DNA序列分析。根据HPV16E7基因的特点 ,分别设计点突变引物 ,用PCR的方法进行HPV16E7基因的点突变。结果 :PCR检测显示扩增出HPV16 (新疆株 )E7基因 ;测序结果表明HPV16 -XJ的E7基因全长2 97bp ,与德国标准株一致 ;利用设计突变位点的引物经PCR扩增 ,经序列测定后 ,分别得到了第 70、172、2 71位碱基突变的HPV16E7基因 ;分别构建了野生型与单、双、三点突变的重组质粒pMD18-T -HPV16E7。结论 :人乳头瘤病毒 16型 (新疆株 )E7基因结构与德国标准株相同。HPV16E7基因多点突变的改造 ,为探索HPV16E7基因功能的变化和开展疫苗研究奠定了理论基础。
- 张茂祥张富春蹇晓红马正海王芸张馨玉王宾
- 关键词：人乳头瘤病毒E7基因克隆突变
- 胡杨逆境光合生理及其甜菜碱醛脱氢酶基因动态表达研究
- 本文以一年生胡杨（Populus euphratica Oliv.）幼苗叶片为材料，在盐胁迫（100、200、300、500mmol/L NaCl）和旱胁迫（10、20、30%PEG）不同梯度和时间胁迫条件下，通过对胡杨...
- 王芸
- 关键词：甜菜碱甜菜碱醛脱氢酶叶绿素荧光
- 文献传递
- 利用毕赤酵母表达外源蛋白的研究被引量：18
- 2004年
- 综述了毕赤酵母表达系统的优越性、表达受体菌和表达载体、酵母转化、分泌信号、翻译后加工和修饰等特点 ,以及广泛的医用、商业用途 ,在理论研究特别是蛋白质结构与功能方面的潜在应用价值。
- 刘忠渊张富春毛新芳王芸
- 关键词：毕赤酵母真核表达系统外源蛋白
- 赤翅甲抗冻蛋白dafp-1基因在pMAL-p2x系统的表达与检测
- 本研究将合成的赤翅甲抗冻蛋白(Dendroides Canadensis antifreeze protein,DAFP-1)基因构建到pMAL-p2x载体，进行大肠杆菌表达，检测融合蛋白MBP-DAFP的抗冻活性功能，...
- 马纪吕国栋刘忠渊王芸
- 关键词：抗冻蛋白基因载体
- Tenebrio molitor抗冻蛋白基因家族cDNA片段的克隆、序列分析及原核表达被引量：9
- 2006年
- 利用反转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)的方法,克隆黄粉甲虫(Tenebriomolitor)抗冻蛋白基因cDNA片段并进行序列分析和原核表达。同源性分析表明,获得9条新cDNA片段,与黄粉甲虫抗冻蛋白基因家族的其他基因序列具有较高的同源性。重组质粒pGEX-4T-1-tmafp-XJ430,转化E.coliBL21进行原核表达,SDS-PAGE分析结果表明,抗冻蛋白基因以可溶性融合蛋白表达,相对分子量为38kDa。构建真核表达载体pCDNA3-tmafp-XJ430,免疫小鼠,获得的抗血清滴度为1:2000。Westernblotting结果为单一的条带,证明该抗血清具有针对抗冻蛋白TmAFP-XJ430抗原的专一性。
- 刘忠渊王芸吕国栋王贤磊张富春马纪
- 关键词：抗冻蛋白CDNA片段原核表达
- 家蚕抗菌肽在毕赤酵母中的表达被引量：6
- 2004年
- 目的 :用毕赤酵母真核系统表达有抑菌活性的家蚕抗菌肽 (cecropin -XJ)。将pGEX - 4T - 1-cecropin -XJ上的抗菌肽基因cecropin -XJ克隆至穿梭质粒pSuperY上 ,用BlnI酶切使之线性化后 ,采用电击法转化酵母SMD116 8,转化子用小瓶发酵 ,经SDS -PAGE检测 ,表达产物可以在α信号因子的引导下 ,分泌到培养基中 。
- 王芸刘忠渊吕国栋张富春
- 关键词：毕赤酵母分泌表达抑菌活性
- 准噶尔小胸鳖甲抗冻蛋白生物学特性研究
- 抗冻蛋白(antifreeze protein,AFP)是一类具有热滞活性(thermal hysteresis activity,THA)和重结晶抑制效应的蛋白质,具有广阔的应用前景。昆虫抗冻蛋白的研究正处于起步阶段,...
- 邱立明马纪赵干王芸刘忠渊张富春
- 关键词：抗冻蛋白热滞活性蛋白表达
- 文献传递
