王艳尊
- 作品数：8 被引量：14H指数：2
- 供职机构：福建师范大学生命科学学院工业微生物教育部工程研究中心更多>>
- 发文基金：福建省发展和改革委员会项目福建省科技厅重大项目福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- SNF1基因缺失酿酒酵母菌株的构建
- 能源是人类活动的物质基础,然而不可再生能源日益减少,终将耗竭,发展生物可再生能源势在必行。酵母发酵生物质产生的生物乙醇是一种可再生的液体燃料,最有希望替代最终将被耗尽的化石能源。在酿酒酵母(Saccharomyces c...
- 雷娟娟王艳尊黄建忠
- 关键词：酿酒酵母乙醇基因敲除
- 敲除sfa1基因提高酿酒酵母乙醇合成能力的研究被引量：6
- 2007年
- sfa1基因编码的酶具有乙醇脱氢酶和甲醛脱氢酶双功能活性,通过设计含有与sfa1基因两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6和pUG66为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的酿酒酵母sfa1基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS1并将质粒pSH47转入阳性克隆子,诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得sfa1基因缺陷型酵母突变株YS1-sfa1。摇瓶发酵实验表明,突变株YS1-sfa1的乙醇分解代谢活性降低,乙醇产量提高8.0%。
- 宋浩雷郭晓贤王艳尊江贤章黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除PCR
- 敲除SNF1基因提高酿酒酵母乙醇生物合成的研究被引量：2
- 2009年
- SNF1基因编码的Snf1p对起始受葡萄糖阻遏基因的转录是必需的。通过重叠延伸PCR和两步PCR法合成了两端各带有352bp和345bp与SNF1序列上下游同源的基因敲除组件。将该敲除组件转化至酿酒酵母YS2,获得被loxP-kan-loxP序列组件替换而产生kanr的阳性克隆子。然后将质粒pSH65转入阳性克隆子并诱导表达Cre酶切除kan基因,进而通过传代丢失质粒pSH65后得到SNF1单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除,得到SNF1双倍体缺陷型菌株YS2-△snf1::loxp-kan-loxp。厌氧发酵试验表明该突变株的乙醇产量较出发菌株YS2提高了8.74%。残糖量试验表明在培养基中葡萄糖消耗殆尽后,突变株相对于出发菌株而言并没有利用乙醇作为碳源,乙醇产量保持稳定未有下降。敲除SNF1基因是提高酿酒酵母生物合成乙醇的一条有效途径。
- 雷娟娟王艳尊江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强吴松刚黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除乙醇
- 酿酒酵母HOR2基因缺失突变株的构建被引量：2
- 2010年
- 目的:构建酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株并研究其对甘油和乙醇产量的影响。方法:以PCR为基础,通过同源重组的方式使目的基因缺失。结果:通过设计含有与HOR2(GPP2)基因两侧序列同源的长引物,以质粒PUG6为模板进行PCR构建含有Cre/loxP系统的酿酒酵母HOR2基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS2,获得为loxP-kan-loxP序列组件所替换而产生kanr的阳性克隆子。然后再将质粒PSH65转入阳性克隆子诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得HOR2单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除。发酵实验表明,突变株甘油产量降低3.34%,乙醇产量提高1.96%。结论:成功获得了酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株,并命名为YS2-HOR2。
- 陈永金林晓华王艳尊雷娟娟黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除乙醇甘油
- 酿酒酵母YS2-△adh2-△ald6突变株的构建及hxt1基因的过表达
- 生物质能源是化石能源良好的替代品,乙醇作为比较理想的可再生液体燃料备受国内外科学家的亲睐。酿酒酵母/(Saccharomyces cerevisiae/)作为传统乙醇生产主要用菌,选育其高产菌株一直是燃料乙醇生产的关键因...
- 王艳尊
- 关键词：酿酒酵母基因敲除过表达
- 文献传递
- 酿酒酵母adh2和ald6双基因缺失突变株的构建被引量：7
- 2009年
- 酿酒酵母乙醇合成代谢过程中,阻断或削弱乙醛至乙酸代谢流不但能增强乙醇合成流,同时还能降低发酵乙酸含量。本研究以乙醇脱氢酶Ⅱ(adh2)基因缺陷型酿酒酵母YS2-Δadh2为出发菌株,应用长侧翼同源两步PCR(LFH-PCR)策略构建乙醛脱氢酶Ⅵ(ald6)基因敲除组件,转化酿酒酵母YS2-Δadh2敲除ald6基因,之后转入表达质粒pSH65到阳性克隆中,半乳糖诱导表达Cre重组酶切除Kanr基因筛选标记,最后,传代丢失质粒pSH65获得单倍体ald6基因缺失突变株。利用同样的敲除组件和技术再次敲除其等位基因,最终获得双基因缺失突变株YS2-△adh2-Δald6。发酵实验表明与出发菌株YS2相比,突变株乙酸合成量降低18%,乙醇最高产量提高12.5%。
- 王艳尊雷娟娟江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强陈如凯黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 酿酒酵母adh2和ald6双基因缺失突变株的构建
- 生物质能源是良好的化石能源替代品，乙醇作为比较理想的可再生液体燃料受到国内外科学家的广泛关注。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)是乙醇发酵生产的主要菌种，也是基因组全序列第一个完成的真核生物，遗...
- 王艳尊雷娟娟江贤章黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除
- 酿酒酵母YS2-△adh2-△ald6突变株的构建及hxt1基因的过表达
- ＜正＞生物质能源是良好的化石能源替代品,乙醇作为比较理想的可再生液体燃料受到国内外科学家的广泛关注。作为传统乙醇生产主要用菌,选育高产酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae）一直是燃料乙醇生产的关键要因...
- 王艳尊高媛媛施巧琴吴松刚黄建忠
- 文献传递
