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王立魁: 作品数：15 被引量：62H指数：4; 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部留学回国人员科研启动基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>

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巢式PCR检测血清中烟曲霉基因的实验研究被引量：3: 2011年; 目的评价巢式PCR在烟曲霉侵袭性感染早期病原学诊断中的应用价值。方法构建烟曲霉播散性感染动物模型,收集不同感染时段动物血液标本20份,分别进行巢式PCR检测和真菌培养,并对感染动物多次进行影像学检查;测定25例临床诊断为侵袭性曲霉病患者的45份血清样本,并与血清半乳甘露聚糖(GM)测定结果进行比较。结果巢式PCR检测疾病模型动物血清曲霉特异基因,标本阳性率为80%(16/20),最早在感染后的第二天即可检出;而在整个感染过程中,血培养结果均为阴性,影像学检查则在感染后期才提示真菌感染的存在。临床标本的检测结果显示,巢式PCR敏感性和特异度分别为64%和100%。结论巢式PCR具有较好的敏感性及特异度,可用于曲霉深部感染的早期诊断,与血清GM测定联合应用诊断意义更大。; 李芳秋周万青王立魁史利宁邵海枫; 关键词：巢式PCR 病原学诊断

不同破壁方法提取真菌DNA的比较被引量：16: 2009年; 目的探索和评价提取致病性真菌DNA的简便方法。方法分别用6种方法(液氮冻融、-70℃冻融、溶胞酶消解、超声破碎、高盐溶液、尿素溶液)裂解真菌细胞壁,再用市售DNeasy B lood&Tissue K it试剂盒提取DNA,最后通过对提取物进行比色定量和PCR检测评价各种提取方法的优弊。结果酶消解破壁法提取真菌DNA效率最高,重复性良好。模拟全血标本中白色念珠菌检测限为102个孢子,烟曲霉及新型隐球菌检测限为103个孢子。结论酶消解破壁法提取真菌DNA在6种方法中效率最高,可用于临床常见真菌感染的PCR快速诊断。; 周万青李芳秋王立魁邵海枫史利宁; 关键词：真菌 DNA PCR

烟曲霉深部感染家兔模型的建立被引量：2: 2009年; 目的建立烟曲霉播散性感染家兔模型，为进一步研究烟曲霉深部感染的致病机制及诊疗措施提供可用的动物模型.方法免疫抑制新西兰大白兔致其免疫功能低下，经耳缘静脉注射烟曲霉分生孢子致感染.通过观察各组家兔的生命体征及尸检、脏器培养、组织病理结果等鉴定感染结局.结果实验组各家兔具有感染症状（体重渐减，体温≥39．5℃），解剖发现明显的组织病理学改变，脏器培养鉴定为烟曲霉，组化染色查到菌丝.结论成功的建立了烟曲霉深部感染家兔模型，为烟曲霉感染过程中致病机制的研究及研制新型诊疗措施提供了依据.; 周万青李芳秋王立魁刘群史利宁; 关键词：烟曲霉侵袭性曲霉病家兔模型

半乳甘露聚糖试验对侵袭性曲霉病诊断价值的回顾性分析被引量：8: 2010年; 目的回顾性分析Platelia Aspergillus EIA法检测血清半乳甘露聚糖（GM）对侵袭性曲霉病（IA）的诊断价值。方法根据诊断标准回顾性地将诊断分为确诊、临床诊断、拟诊及排除IA，并根据患者的基础疾病及是否接受影响免疫功能的药物分为：恶性血液病及造血干细胞移植术后（HSCT）组（A组），使用了影响免疫功能药物但非恶性血液病及HSCT患者组（B组），非恶性血液病及HSCT且未使用影响免疫功能药物的患者组（C组），分析GM实验在各组患者中的以及总的敏感性、特异性、阳性预测值（PPV）和阴性预测值（NPV）。结果781例患者，最终确诊8例，临床诊断33例，拟诊189例，排除IA551例。230例不能排除真菌感染的患者中160例GM阳性，阳性率69．6％，其中确诊6例，临床诊断24例，拟诊130例。GM实验总的敏感性、特异性、NPV分别为73．2％、81．7％、97．6％。在不同类型的患者中敏感性和特异性存在差异，A组的敏感性、特异性分别为85．7％、88．4％，B组为81．2％、81．4％，C组为45．5％、78．7％；不同类型的患者GM试验结果吸光率指数（AI）的中位数分别为A组2．78，B组1．82，C组0．585；A组、B组与C组的敏感性、特异性和AI值分布上有显著差异（P〈0．05）。至少68．0％真菌培养阳性患者GM阳性时间早于培养阳性2～11d。结论Platelia Aspergillus EIA法检测GM对IA高危患者尤其是恶性血液病及HSCT患者、使用了影响免疫功能药物的其他患者有早期诊断价值，连续监测患者的GM水平，有助于了解疾病的进展程度、对治疗的反应性及预后；但在非血液病且未使用影响免疫功能药物的患者中其诊断价值有限。; 史利宁李芳秋邵海枫王立魁王卫萍黄梅; 关键词：半乳甘露聚糖侵袭性曲霉病

酶水解苦味肽对大黄鱼白细胞与溶菌酶活性的影响被引量：1: 2019年; 目的探究酶水解苦味肽对大黄鱼白细胞与溶菌酶活性的影响。方法分别利用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶,碱性蛋白酶和风味蛋白酶酶解鮸鱼鱼肉制备苦味最高的苦味肽。以幼大黄鱼为实验对象,分别设置4个不同的组(对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组),对其进行腹腔注射苦味肽,观察8周后采血检测,以白细胞/总血细胞的平均比率和溶菌酶活性为指标评价苦味肽对大黄鱼先天免疫系统的作用效果。结果胃蛋白酶水解产生的苦味肽苦味最高。对照组的白细胞/总血细胞的平均比率为14.6%,低剂量组(0.6 mg/鱼)为28.86%,中剂量组(1.2 mg/鱼)为35%,高剂量组(2.4 mg/鱼)为29.3%。在白细胞对乳胶颗粒的体外吞噬作用实验中,对照组与测试组的吞噬指数分别为1.15(0mg/L),1.88(0.4mg/L),3.84(0.8mg/L),5.94(1.2mg/L)。溶菌酶在60min内的相对裂解活性分别为0.17、0.101、0.307和0.198。与对照组相比苦味肽可以提高大黄鱼的免疫力,当注射剂量为1.2mg时,吞噬与溶菌酶活性都显著升高,可初步确定最佳注射剂量为1.2mg。结论苦味肽可以通过多途径有效地提高天然免疫的作用,可以降低大黄鱼疾病的发生,值得进一步研究。; BLESSING Gwekwe李颖杰PHARES Choto殷小龙缪文华陈美龄林慧敏霍健聪王立魁JAMAL Akida曾丽娟罗成邓尚贵王金梅; 关键词：大黄鱼先天性免疫溶菌酶测定苦味肽

COX-2/Nrf2/ARE信号通路与体内外的抗炎、抗氧化作用机理被引量：17: 2011年; 近年新研究发现COX-2可使用比COX-1更广泛的底物。比如,除了标准的花生四烯酸外,COX-2也能将二十二碳六烯酸(DHA)和二十碳五烯酸(EPA)等转换成前列腺素衍生物。这些前列腺素衍生物可进一步转化成促进消炎、抗氧化的亲电羰基衍生物(EFOX)分子,并且可以从Keap1解离转录因子Nrf2,继而可以激活多种与抗氧化相关的含ARE应答元件的基因,如血红素氧化酶-1、谷胱甘肽还原酶等。COX-2的这些新功能有可能帮助更好地理解Nrf2/ARE信号通路及其抗炎、抗氧化、诱导肿瘤细胞凋亡等机理。对外源性抗氧化剂触发体内的抗氧化基因及抗炎信号的可能性,以及与饮食相关的抗衰老机理进行探讨。; 刘薇王红霞王立魁苏丽丽罗成; 关键词：COX-2 抗炎抗氧化多糖

一种广谱新型冠状病毒的人源抗体及其应用: 本发明涉及广谱新型冠状病毒的人源抗体及其应用。利用原型株RBD与Beta毒株RBD抗原递次筛选模式，快速聚焦保守靶位，成功在体外分离到结合在RBD不同表位的能对VOC实现广谱中和的全人源抗体。其中，IMCAS‑123抗体...; 高福仝舟刘科芳赵欣王奇慧王立魁谢谊马素芳; 文献传递

不同破壁方法提取真菌DNA的比较: 目的探索和评价提取致病性真菌DNA的简便方法。方法分别用6种方法(液氮冻融、-70℃冻融、溶胞酶消解、超声破碎、高盐溶液、尿素溶液)裂解真菌细胞壁,再用市售DNeasy Blood &Tissue Kit试剂盒提取DNA...; 周万青李芳秋王立魁邵海枫史利宁; 关键词：真菌 DNA PCR; 文献传递

缺氧诱导因子-1α参与癌细胞迁移和侵袭的作用机理被引量：4: 2016年; 在实体瘤中,无论是良性肿瘤,还是恶性肿瘤,低氧都是一种普遍现象,并且绝大多数肿瘤中存在低氧微环境。低氧与肿瘤的恶性进展、放射与化疗的耐受性和不良的预后有着密切的联系。缺氧诱导因子1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)广泛存在于大多数肿瘤组织中,并且HIF-1是一种存在于低氧条件下的转录因子。它是由氧调控表达的HIF-1α亚基与组成型表达的HIF-1β亚基组成的异二聚体。在常氧环境下,通过激活泛素蛋白酶体及氧依赖性降解区域的脯氨酸羟化而使HIF-1α迅速降解,半衰期约为5 min,而在低氧状态下,HIF-1α与β亚基二聚化并稳定存在。二聚化的HIF-1能够促进癌细胞的增殖、迁移以及侵袭。因此,HIF-1α有可能成为抑制癌细胞生长迁移与侵袭的靶点,这将为化疗及高压氧治疗提供新的思路。综述近年国内外抗氧化环境下HIF-1基因所主导的与癌细胞迁移和侵袭及其抑制相关的分子机理的研究,以便通过在抗炎、抗氧化条件下的增氧作用机理改进化疗效果。; 蒋珺康晓曦罗成王立魁张燕; 关键词：抗氧化细胞凋亡

人精子蛋白17增强型绿色荧光蛋白共表达卵巢癌细胞模型的建立被引量：4: 2008年; 目的:建立人精子蛋白17(hSp17)与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)共表达的卵巢癌细胞模型。方法:用PCR方法获取hSp17基因片段,HindⅢ/KpnⅠ双酶切、T4 DNA连接酶连接的方法将hSp17基因片段克隆至含报告基因EGFP的真核表达载体pEGFP-N1中,脂质体介导转染卵巢癌细胞HO8910,荧光倒置显微镜观察及Westernblot检测转染细胞中hSp17/EGFP融合蛋白的表达,G418筛选稳定表达的细胞株。结果:酶切和测序结果均证实pEGFP-N1/hSp17重组质粒的构建完全正确。荧光观察与Western blot均证实了hSp17/EGFP蛋白的共表达,且成功筛选出稳定表达的细胞株。结论:成功构建hSp17/EGFP共表达的卵巢癌细胞模型,为研究hSp17异常表达对肿瘤细胞生物学行为的影响,以及hSp17为靶标的肿瘤诊断和生物治疗奠定基础。; 韩艳玲李芳秋刘群周万青张蕾王立魁; 关键词：卵巢癌绿色荧光蛋白

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