王德刚
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
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- Holt-Oram 综合征家系中新发突变 TBX5c.755+1 G>A的鉴定及其致病机理初探
- 【背景与目的】 Holt-Oram综合征(Holt-OramSyndrome,HOS)，又名心手综合征(Heart-HandSyndrome)，是一种以上肢发育异常和先天性心脏病为主要临床特点的常染色体显性遗传病。TB...
- 王德刚
- 关键词：HOLT-ORAM综合征TBX5基因致病机理
- 文献传递
- pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响被引量：4
- 2007年
- 背景与目的:精卵融合是发生在受精过程中的重要生物学事件,Izumo是位于顶体内膜上的Ⅰ型免疫球蛋白,是一种具有精子特异性的膜蛋白,在精卵融合中起关键作用。我们研究pCXN2-mIZUMO在小鼠C57BL/6肌肉中的表达及对其生育能力的影响,为进一步研究免疫避孕手段提供实验依据。材料与方法:用重组质粒pCXN2-mIZUMO分别免疫雌和雄性C57BL/6小鼠。ELISA测定小鼠体内的抗Izumo抗体水平,检测小鼠抗血清在体外受精中对受精率的影响,被免疫的雌性、雄鼠分别与正常的雄、雌鼠交配,雌雄合笼比例为2:1,分娩完成后统计其产仔数。结果:pCXN2-mIZUMO可以在小鼠体内诱发抗Izumo特异性免疫应答。被pCXN2-mIZUMO免疫后的小鼠抗血清在体外能够降低其受精率;各组产仔数分别为:实验雌鼠组2.9±0.66;对照雌鼠组5.4±0.82;实验雄鼠组5.1±0.99;对照雄鼠组6.0±1.34。实验雌鼠组的生育能力比对照雌鼠组明显降低(P<0.05)。结论:重组质粒pCXN2-mIZUMO免疫雌性小鼠具有降低生育能力的作用。
- 安刚黄天华谢庆东王德刚
- 关键词：免疫避孕基因免疫
- 重组小鼠精子蛋白Izumo的制备及其免疫避孕潜力的研究
- 【背景与目的】在众多的免疫避孕候选抗原中,精子抗原被认为是目前最有希望和最具应用前景的避孕疫苗靶抗原。2005年,一种新的精子特异表达的精卵融合关键蛋白Izumo的发现可能为避孕疫苗的研究提供了新思路和新材料。本课题旨在...
- 王德刚
- 关键词：精卵融合免疫避孕精子抗原
- 文献传递
- 基因疫苗pCXN2-ml ZUMO对小鼠生育能力的影响
- 【目的】评价基因疫苗pCXN2-mlZUMO对小鼠C57BL/6进行免疫避孕的效果。【方法】选取40只5-6周龄的雌性C57BL/6,其中15只作为阴性对照注射载体质粒pCXN2,15只作为试验组注射重组质粒pCXN2-...
- 安刚王德刚黄天华
- 文献传递
- 重组小鼠Izumo的表达及其特异性抗体对小鼠体外精卵融合的影响被引量：4
- 2007年
- 背景与目的:精子膜蛋白Izumo在精卵融合中起关键作用。本研究旨在表达和纯化重组小鼠Izumo蛋白(mIzumo),探讨重组mIzumo在小鼠体内的免疫原性及其特异性抗体对小鼠体外精卵融合的影响。材料与方法:将编码mIzumo蛋白的cDNA序列亚克隆到pET28a(+)原核表达载体上,构建pET28a(+)-mIzumo重组质粒。在BL21(DE3)大肠杆菌中表达重组6His-mIzumo融合蛋白,并通过Ni2+亲和层析纯化。使用福氏佐剂乳化纯化的6His-mIzumo,分别免疫雌性和雄性C57BL/6小鼠,并采集免疫前和免疫后血清。用Western Blot和ELISA检测血清中抗6His-mIzumoIgG抗体的特异性和滴度。采用IVF和精卵融合试验检测血清中抗6His-mIzumo抗体对小鼠精卵融合的影响。结果:纯化的6His-mIzumo在SDS-PAGE凝胶上显示为约60kD的单一条带。免疫了重组蛋白的雌性和雄性小鼠都产生了抗6His-mIzumoIgG抗体。抗6His-mIzumoIgG抗体与重组蛋白,小鼠睾丸、附睾及精子膜蛋白存在交叉反应,免疫印迹显示为约60kD的特异性条带。ELISA结果表明,免疫6His-mIzumo后至少6周之内,血清中的抗6His-mIzumoIgG抗体维持在最高水平。免疫后血清处理组的小鼠精子与去透明带卵母细胞发生胞膜融合的能力明显低于免疫前血清处理组(P<0.01)。结论:纯化的6His-mIzumo融合蛋白能够诱发雌性和雄性小鼠产生可阻断精卵融合发生的特异性血清抗体。因此,6His-mIzumo可作为同种异体抗原用于免疫避孕候选疫苗的研究。
- 王德刚黄天华谢庆东安刚
- 关键词：精卵融合免疫血清免疫避孕
